目的:藥物性牙齦增生（Drug-induced gingival overgrowth,DIGO）是因長期服用某種藥物而引起的牙齦增生和體積的增大。但由硝苯地平（nifedipine,NIF）介導(dǎo)的DIGO的發(fā)生機制尚不清楚。有研究表明,NIF介導(dǎo)的DIGO中,細胞的增殖及細胞周期的失衡可能與疾病的發(fā)生有關(guān)。隨著miRNA的發(fā)現(xiàn),越來越多的研究證明miRNA可以調(diào)控細胞的增殖、凋亡、周期。本研究初步探討miR-3940-5p在NIF刺激牙齦間充質(zhì)干細胞（gingival mesenchymal stem cells,GMSCs）中的功能及機制。方法:1.臨床上采集成人健康的牙齦,采用酶消化培養(yǎng)法體外分離培養(yǎng)GMSCs。2.構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系:利用慢病毒轉(zhuǎn)染的方法轉(zhuǎn)染GMSCs,獲得實驗組過表達miR-3940-5p（miR-3940-5p mimics）及空載體對照組（Consh）。通過real-time RT-PCR法檢測miR-3940-5p在轉(zhuǎn)錄水平的表達,測定轉(zhuǎn)染效率,確定過表達的效果。3.采用流式細胞術(shù)-CFSE法檢測對照組（Consh）及實驗組（miR-3940-5pmi... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

Real-TimeRT-PCR檢測miR-3940-5p過表達效果

27圖 2 CFSE 法檢測細胞增殖結(jié)果（A、B）CFSE 結(jié)果顯示：1.在 NIF(1 μg/ml, 2 μg/ml, 3 μg/ml)刺激下，對 GMSCs均具有促進增殖的作用；2. 在 NIF(0 μg/ml, 1 μg/ml, 2 μg/ml, 3 μg/ml)刺激下，過表達 miR-3940-5p 對 GMSCs 均具有抑制增殖的作用（* P ≤ 0.05，** P ≤ 0.01）

28圖 3 PI 法檢測細胞周期結(jié)果（A、B）PI 結(jié)果顯示：在 NIF(0 μg/ml ,1 μg/ml)刺激下，過表達 miR-3940-5p阻滯 GMSCs 細胞周期在 G0/G1 期（* P ≤ 0.05，** P ≤ 0.01）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Gingival-derived mesenchymal stem cells:An endless resource for regenerative dentistry[J]. Mohammed E Grawish.  World Journal of Stem Cells. 2018(09)
[2]BMP-2誘導(dǎo)人牙髓細胞分化過程中miRNA表達譜的變化[J]. 包麗榮,趙文青,林田,陸彥玲,吳煜.  上�？谇会t(yī)學(xué). 2017(05)

碩士論文
[1]硝苯地平刺激的人牙齦成纖維細胞中轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2的表達及作用[D]. 黃海燕.山東大學(xué) 2016



本文編號：2926020