發(fā)布時間：2020-12-13 06:11

　　目的探討脂磷壁酸（LTA）和／或脂多糖（LPS）對人牙周膜細胞（hPDLC）凋亡及分泌炎性細胞因子的影響。方法組織貼壁法體外培養(yǎng)hPDLC,以hPDLC為受試對象,LTA、LPS為施加因素。1.利用透射電鏡觀察LTA和／或LPS作用后hPDLC超微結構的變化及凋亡小體,用MTT法檢測LTA和LPS對hPDLC的抑制作用,ELISA檢測TNF-α的表達,流式細胞術對凋亡細胞進行定量分析；2.采用Re 1-time PCR技術檢測hPDLC Fas、Bax、Cytochrome C、Caspase-3 mRNA的表達,Western-blot技術檢測相應蛋白的表達；3.抗體芯片技術檢測炎性細胞因子的改變。結果1.凋亡相關改變：透射電鏡下，LTA和／或LPS作用hPDLC12h后,細胞質濃縮,空泡及凋亡小體出現(xiàn)；且同一時間點10μg/ml LTA與1μg/ml LPS刺激hPDLC分泌TNF-α的量無統(tǒng)計學差異；流式細胞結果表明,各實驗組細胞早期／晚期凋亡率及死亡率明顯增加。2. Real-time PCR技術檢測LTA和／或LPS作用于hPDLC 12h后,Fas、Cytochrome C... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

牙周膜細胞傳代培養(yǎng)生長曲線

3.3.2LTA和LpS作用于人牙周膜細胞后m卜a的表達LTA及LPS刺激 hPDLC12h后，上清液中可檢測到TNF一a分泌，48h內持續(xù)上升，各濃度組規(guī)律相似(表3一3，圖3一3)。10“砂園LTA組其TNF一a分泌量與同時間點l林 g/inlLPs組相似，無統(tǒng)計學差異伊>0.05);相同濃度不同作用時間內，除l8

基質逐漸減少或消失，出現(xiàn)空泡，胞核內染色質固縮并凝結成塊。而含10林留 1111LLA和1林留而LPs的各組細胞量減少，出現(xiàn)細胞壞死，可見碎片及散落的細胞器。細胞漿水腫，結構模糊(圖3一4)。

【參考文獻】：
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本文編號：2914057