發(fā)布時(shí)間：2020-12-12 04:45

　　基因治療已成為惡性腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)和發(fā)展趨勢(shì)，其核心策略之一就是通過基因重組等手段將目的DNA轉(zhuǎn)染入腫瘤細(xì)胞內(nèi)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡達(dá)到治療疾病的目的。選擇能高效特異地增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞凋亡作用的目的基因，成為該領(lǐng)域研究的關(guān)鍵和難點(diǎn)問題。 TNF（tumor necrosis factor，腫瘤壞死因子）是由正常人單核／巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有特異性殺傷作用的細(xì)胞因子，可通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡來(lái)發(fā)揮其抗腫瘤活性。研究表明TNF的促細(xì)胞凋亡作用是通過與細(xì)胞表面TNFR1（tumor necrosis factor receptor 1，腫瘤壞死因子受體1）結(jié)合而實(shí)現(xiàn)的。當(dāng)TNFR1接受TNF的信號(hào)刺激后，其下游的TRADD（TNFR-associated death domain protein，TNF受體相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白）可通過同源性的DD（death domain，死亡結(jié)構(gòu)域）間的相互作用與TNFR1直接結(jié)合，也能使TNFR1與FADD（Fas-associated death domain protein，F(xiàn)as相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白）通過三者的DD間接結(jié)合，進(jìn)而引起FAD... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

融合基因構(gòu)建示意圖

Rl)pCR分別得到約630bp的全長(zhǎng)FADDcDNA及1350bp的全長(zhǎng)TNFRIcDNA，克隆入pUC19質(zhì)粒，測(cè)序，結(jié)果與GeneBallk中的人FADD及TN[FRlcDNA序列完全一致。(電泳結(jié)果如圖1一1、1一2示)八Uon甘onnno︸I︼n︶氣︸OOn，產(chǎn)︸、︸，‘z，‘心.人圖1一1人FADD基因PCR及酶切鑒定(左:PCR;右:酶切):Marker;2:目的條帶20001000750500250100圖1一2人TN下Rl基因的PCR及酶切鑒定(左:PCR:右:酶切)hMarker;2:目的條帶測(cè)序正確后，構(gòu)建peDNA3一FADD、pIREsZ一EoFP.FADo及peoNA3一TNFRI真核表達(dá)重組質(zhì)粒。二.融合基因TFL的構(gòu)建通過PCR方法分別去除FADD及TN下RIC末端的DD結(jié)構(gòu)域，擴(kuò)增得D印artmenroforalandM公illofacialSurgery

Rl)pCR分別得到約630bp的全長(zhǎng)FADDcDNA及1350bp的全長(zhǎng)TNFRIcDNA，克隆入pUC19質(zhì)粒，測(cè)序，結(jié)果與GeneBallk中的人FADD及TN[FRlcDNA序列完全一致。(電泳結(jié)果如圖1一1、1一2示)八Uon甘onnno︸I︼n︶氣︸OOn，產(chǎn)︸、︸，‘z，‘心.人圖1一1人FADD基因PCR及酶切鑒定(左:PCR;右:酶切):Marker;2:目的條帶20001000750500250100圖1一2人TN下Rl基因的PCR及酶切鑒定(左:PCR:右:酶切)hMarker;2:目的條帶測(cè)序正確后，構(gòu)建peDNA3一FADD、pIREsZ一EoFP.FADo及peoNA3一TNFRI真核表達(dá)重組質(zhì)粒。二.融合基因TFL的構(gòu)建通過PCR方法分別去除FADD及TN下RIC末端的DD結(jié)構(gòu)域，擴(kuò)增得D印artmenroforalandM公illofacialSurgery

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人FADD基因誘導(dǎo)粘液表皮樣癌細(xì)胞凋亡的研究[J]. 劉大慶,司徒鎮(zhèn)強(qiáng),許彥鳴,于翠娟,王成濟(jì),楊安鋼.  口腔頜面外科雜志. 2002(04)
[2]腺病毒介導(dǎo)HSV-TK/GCV系統(tǒng)治療舌癌的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 黃洪章,王安訓(xùn).  中華口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2001(06)
[3]口腔頜面部惡性腫瘤患者唾液癌胚抗原及IgA測(cè)定和臨床意義[J]. 王虹,封興華,安銀東,呂菊紅,郝徐童.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1999(06)
[4]Bcl-2蛋白在頭頸惡性腫瘤中的表達(dá)[J]. 雷正秀,劉秋潤(rùn).  臨床耳鼻咽喉科雜志. 1998(04)
[5]p16與C-myc在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)意義[J]. 彭解人,曾韻潔,許耀東,關(guān)中,沈溪明.  臨床耳鼻咽喉科雜志. 1997(08)
[6]口腔癌患者唾液中腫瘤相關(guān)抗原CA—50臨床意義的初步探討[J]. 陳關(guān)福,周小美,張行.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1994(03)
[7]粘液表皮樣癌MEC-1系對(duì)常用抗腫瘤藥的敏感性[J]. 吳軍正,司徒鎮(zhèn)強(qiáng),陳建元,劉斌,王為.  實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志. 1990(04)
[8]人舌鱗狀細(xì)胞癌Tca8113細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性[J]. 何榮根,徐秀祺,周曉健,張秀麗,邱蔚六,張錫澤,劉嬡如,劉楨,韓玉升,胥彬,沈祖銘,韓家嫻,許良中,劉亦法.  腫瘤. 1983(03)



本文編號(hào)：2911887