基因治療已成為惡性腫瘤研究領域的熱點和發(fā)展趨勢，其核心策略之一就是通過基因重組等手段將目的DNA轉(zhuǎn)染入腫瘤細胞內(nèi)，誘導腫瘤細胞的凋亡達到治療疾病的目的。選擇能高效特異地增強腫瘤細胞凋亡作用的目的基因，成為該領域研究的關鍵和難點問題。 TNF（tumor necrosis factor，腫瘤壞死因子）是由正常人單核／巨噬細胞產(chǎn)生的一種對多種腫瘤細胞具有特異性殺傷作用的細胞因子，可通過誘導腫瘤細胞凋亡來發(fā)揮其抗腫瘤活性。研究表明TNF的促細胞凋亡作用是通過與細胞表面TNFR1（tumor necrosis factor receptor 1，腫瘤壞死因子受體1）結合而實現(xiàn)的。當TNFR1接受TNF的信號刺激后，其下游的TRADD（TNFR-associated death domain protein，TNF受體相關死亡結構域蛋白）可通過同源性的DD（death domain，死亡結構域）間的相互作用與TNFR1直接結合，也能使TNFR1與FADD（Fas-associated death domain protein，F(xiàn)as相關死亡結構域蛋白）通過三者的DD間接結合，進而引起FAD... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

融合基因構建示意圖

Rl)pCR分別得到約630bp的全長FADDcDNA及1350bp的全長TNFRIcDNA，克隆入pUC19質(zhì)粒，測序，結果與GeneBallk中的人FADD及TN[FRlcDNA序列完全一致。(電泳結果如圖1一1、1一2示)八Uon甘onnno︸I︼n︶氣︸OOn，產(chǎn)︸、︸，‘z，‘心.人圖1一1人FADD基因PCR及酶切鑒定(左:PCR;右:酶切):Marker;2:目的條帶20001000750500250100圖1一2人TN下Rl基因的PCR及酶切鑒定(左:PCR:右:酶切)hMarker;2:目的條帶測序正確后，構建peDNA3一FADD、pIREsZ一EoFP.FADo及peoNA3一TNFRI真核表達重組質(zhì)粒。二.融合基因TFL的構建通過PCR方法分別去除FADD及TN下RIC末端的DD結構域，擴增得D印artmenroforalandM公illofacialSurgery

Rl)pCR分別得到約630bp的全長FADDcDNA及1350bp的全長TNFRIcDNA，克隆入pUC19質(zhì)粒，測序，結果與GeneBallk中的人FADD及TN[FRlcDNA序列完全一致。(電泳結果如圖1一1、1一2示)八Uon甘onnno︸I︼n︶氣︸OOn，產(chǎn)︸、︸，‘z，‘心.人圖1一1人FADD基因PCR及酶切鑒定(左:PCR;右:酶切):Marker;2:目的條帶20001000750500250100圖1一2人TN下Rl基因的PCR及酶切鑒定(左:PCR:右:酶切)hMarker;2:目的條帶測序正確后，構建peDNA3一FADD、pIREsZ一EoFP.FADo及peoNA3一TNFRI真核表達重組質(zhì)粒。二.融合基因TFL的構建通過PCR方法分別去除FADD及TN下RIC末端的DD結構域，擴增得D印artmenroforalandM公illofacialSurgery

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]腺病毒介導HSV-TK/GCV系統(tǒng)治療舌癌的實驗研究[J]. 黃洪章,王安訓.  中華口腔醫(yī)學雜志. 2001(06)
[3]口腔頜面部惡性腫瘤患者唾液癌胚抗原及IgA測定和臨床意義[J]. 王虹,封興華,安銀東,呂菊紅,郝徐童.  實用口腔醫(yī)學雜志. 1999(06)
[4]Bcl-2蛋白在頭頸惡性腫瘤中的表達[J]. 雷正秀,劉秋潤.  臨床耳鼻咽喉科雜志. 1998(04)
[5]p16與C-myc在喉鱗狀細胞癌中的表達意義[J]. 彭解人,曾韻潔,許耀東,關中,沈溪明.  臨床耳鼻咽喉科雜志. 1997(08)
[6]口腔癌患者唾液中腫瘤相關抗原CA—50臨床意義的初步探討[J]. 陳關福,周小美,張行.  實用口腔醫(yī)學雜志. 1994(03)
[7]粘液表皮樣癌MEC-1系對常用抗腫瘤藥的敏感性[J]. 吳軍正,司徒鎮(zhèn)強,陳建元,劉斌,王為.  實用口腔醫(yī)學雜志. 1990(04)
[8]人舌鱗狀細胞癌Tca8113細胞系的建立及其生物學特性[J]. 何榮根,徐秀祺,周曉健,張秀麗,邱蔚六,張錫澤,劉嬡如,劉楨,韓玉升,胥彬,沈祖銘,韓家嫻,許良中,劉亦法.  腫瘤. 1983(03)



本文編號：2911887