近年來,n-3多不飽和脂肪酸已成為研究的熱門課題,人們認(rèn)識(shí)到它與人類的生命和健康關(guān)系密切。但n-3多不飽和脂肪酸在動(dòng)物體內(nèi)不能合成,只能從食物中補(bǔ)充。Fat-1基因的發(fā)現(xiàn)改變了這一現(xiàn)狀,它可以將多不飽和脂肪酸從n-6形式轉(zhuǎn)化為n-3形式,從而改變細(xì)胞中n-6/n-3 PUFAs的比例。口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma）是頜面部常見的腫瘤之一,其發(fā)病率高,生存率低,嚴(yán)重危害人類健康。傳統(tǒng)的治療方法包括手術(shù)、放化療并不能明顯提高患者的生存率。Fat-1基因的出現(xiàn)為口腔鱗癌的基因治療提供了新的方向。本研究中,我們首先利用生物信息學(xué)工具及多條重疊引物PCR拼接的策略,拼接了Fat-1編碼基因,然后構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.1-Fat1,對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株Tca8113進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染和對(duì)細(xì)胞中脂肪酸含量進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)Fat-1基因能顯著改善細(xì)胞中n-6和n-3 PUFAs的比例,通過細(xì)胞增殖及凋亡實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)Fat-1基因能有效抑制人口腔鱗癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡。本研究為探討n-3 PUFAs對(duì)口腔鱗癌的作用并建立體外移植模型打下了良好基礎(chǔ)。 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PUFAs的合成途徑Fig.1Pathwaysofpolyunsaturatedfattyacidsynthesis營養(yǎng)科學(xué)發(fā)現(xiàn)，雙鍵所在的位置影響脂肪酸的營養(yǎng)價(jià)值,一般從脂肪酸分子結(jié)構(gòu)的兩端第一個(gè)碳原子開始編號(hào)以確定雙鏈的位置

DHA可以抑制環(huán)氧化酶的活性, α-亞麻酸可以抑制A2生成減少，同樣能達(dá)到抑制血栓的目的[44]。圖2顯示DHA的機(jī)制。.2 降低血液膽固醇和甘油三酯n-3 型多不飽和脂肪酸在降低血液中甘油三酯和膽固醇水平上據(jù)報(bào)道，實(shí)驗(yàn)者給 1 名缺乏α-亞麻酸的病人補(bǔ)充α-亞麻酸乙酯現(xiàn) EPA 和 DHA 的含量增加了 3～4 倍，血液中膽固醇和甘油三0%[45]。EPA 和 DHA 等還可降低餐后高甘油三酯血癥；將其與療混合型高脂血癥上有很好療效[46]。用 n-3 型多不飽和脂肪酸喂其肝中�；D(zhuǎn)移酶和乙酰 CoA 羧化酶活性均有不同程度下降。n肪酸能夠促進(jìn)脂肪酸氧化, 增強(qiáng)脂肪酸向磷脂的轉(zhuǎn)化和

圖 1.1 Fat-1 基因拼接示意圖Fig.1.1 Schematic Representation of Fat-1 gene splicingCR產(chǎn)物電泳分離的DNA片段大小配制適宜濃度的瓊脂糖溶液進(jìn)行電泳，1 30 min，用凝膠成像系統(tǒng)觀察電泳結(jié)果并拍照。的片段的回收NA片段瓊脂糖凝膠回收試劑盒說明書進(jìn)行操作。凈的刀片切下含有目的 DNA 的瓊脂糖凝膠，并且盡量去除的凝膠，將切下來的凝膠收到 1.5mL 的 EP 管中。有切下來的凝膠的 EP 管中加入抽提液，比例為 1（凝膠毫克積微升數(shù)）。EP 管置于 50℃水浴鍋中溫育，直至凝膠完全融化。 1（凝膠毫克數(shù)）:1（異丙醇體積微升數(shù)）的比例加入異丙醇

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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