長期研究證明齲病是菌斑在牙齒表面聚集而引起的感染性疾病,變形鏈球菌族（Streptococci mutans,以下簡稱S.mutans）作為人類、動(dòng)物齲病的主要致病因子,對牙面有高度的選擇性與親和力,在口腔中主要分布于牙面。長久以來人們一直試圖采用藥物控制或預(yù)防齲病,但采用的抗生素如青霉素、紅霉素或氟化物等,均表現(xiàn)出一定的局限性,因此,尋找一種使用安全并且能有效調(diào)理口腔菌群平衡的防齲藥物成為研究重點(diǎn),研究人員開始關(guān)注天然產(chǎn)物防齲的研究�，F(xiàn)代科學(xué)研究表明,茶多酚類物質(zhì)可有效抑制牙菌斑中厭氧菌的生長。原花青素（Procyanidins, PC）是植物中存在的一類天然多酚化合物,其結(jié)構(gòu)與茶多酚相似,它對S.mutans的抑菌作用及對菌株產(chǎn)酸良好的抑制效果為其在臨床預(yù)防治療齲齒,及相關(guān)功能性食品的開發(fā)提供了廣闊的發(fā)展空間,但是有關(guān)原花青素干預(yù)齲齒發(fā)生的主要作用途徑、分子量大�。ň酆隙龋┡c作用效果的關(guān)系以及作用機(jī)理等尚不清楚。本文以高粱外種皮中幾種原花青素低聚體為研究材料,通過比較原花青素分子量大�。ň酆隙龋┡c抑制變形鏈球菌粘附效果的關(guān)系,篩選高活性抑制變形鏈球菌粘附的原花青素活性成分,在此基礎(chǔ)... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 變形鏈球菌毒力因子及其誘發(fā)齲病的相關(guān)研究
    2 天然產(chǎn)物防齲的研究進(jìn)展
    3 多酚與蛋白相互作用研究方法的介紹
        3.1 紫外-可見吸收光譜法
        3.2 熒光光譜法
        3.3 紅外光譜法
        3.4 圓二色譜法
        3.5 高效液相色譜法
        3.6 核磁共振法
        3.7 毛細(xì)管電泳法
    4 論文研究內(nèi)容
    5 創(chuàng)新點(diǎn)
第二章 高粱外種皮中低聚體原花青素的分離及鑒定
    引言
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料與試劑
            1.1.2 儀器設(shè)備
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 高粱外種皮原花青素（SPC）的提取
            1.2.2 SPC粗提物的純化
            1.2.3 SPC的ESI-MS分析
            1.2.4 SPC凝膠色譜分離
            1.2.5 SPC各級分的HPLC-MS/MS分析
    2 結(jié)果與分析
        2.1 SPC的提取及純化
        2.2 SPC的MS分析
        2.3 SPC凝膠色譜分離
        2.4 SPC各級分的HPLC-MS/MS分析
            2.4.1 SPC-Ⅰ的HPLC-MS/MS分析
            2.4.2 SPC-Ⅱ的HPLC-MS/MS分析
            2.4.3 SPC-Ⅲ的HPLC-MS/MS分析
    3 結(jié)論
第三章 抑制 S.mutans Ingbritt（c）體外粘附高活性成分的篩選
    引言
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料與試劑
            1.1.2 儀器設(shè)備
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 TSB培養(yǎng)基的配制
            1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)菌夜的制備
            1.2.3 SPC-Ⅰ、SPC-Ⅱ和SPC-Ⅲ對S. mutans Ingbritt（c）在試管壁上粘附的抑制作用
50的測定">            1.2.4 SPC-Ⅰ、SPC-Ⅱ和SPC-Ⅲ對S. mutans Ingbritt（c）IC₅₀的測定
            1.2.5 熒光檢測SPC粗提物、SPC-Ⅰ、SPC-Ⅱ和SPC-Ⅲ對S.mutans Ingbritt（c）在SHA上粘附的影響
            1.2.6 統(tǒng)計(jì)分析
    2 結(jié)果與討論
        2.1 SPC-Ⅰ、SPC-Ⅱ和SPC-Ⅲ對S. mutans Ingbritt（c）在試管壁上粘附的抑制效果
50的測定">        2.2 SPC-Ⅰ、SPC-Ⅱ和SPC-Ⅲ對S.mutans Ingbritt（c）IC₅₀的測定
        2.3 活性成分處理S. mutans Ingbritt（c）干預(yù)其在SHA上粘附的影響
        2.4 活性成分處理獲得性膜干預(yù)S.mutans Ingbritt（c）在SHA上粘附的影響
    3 結(jié)論
第四章 S.mutans Ingbritt（c）主要粘結(jié)素的制備
    引言
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料與試劑
            1.1.2 主要儀器設(shè)備
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 培養(yǎng)基的配制及標(biāo)準(zhǔn)菌液的制備
            1.2.2 透析袋的前處理
            1.2.3 S.mutans Ingbritt（c）中GTFs的制備
            1.2.4 GTFs蛋白質(zhì)含量的測定
            1.2.5 GTFs酶活的測定
            1.2.6 GTFs產(chǎn)多糖能力的測定
            1.2.7 SDS-PAGE及MALDI-TOF-MS分析
    2 結(jié)果與討論
        2.1 繪制蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.2 繪制多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.3 pI純化GTFs粗提物
            2.3.1 pH范圍：3.00～8.50
            2.3.2 pH范圍：2.50～4.00
            2.3.3 pH范圍：3.00～3.50
        2.4 GTFs的凝膠色譜純化
            2.4.1 Initial粗蛋白凝膠分離結(jié)果及性質(zhì)測定
            2.4.2 pH=3.10粗蛋白凝膠分離結(jié)果及性質(zhì)測定
            2.4.3 pH=3.40粗蛋白凝膠分離結(jié)果及性質(zhì)測定
        2.5 SDS-PAGE及MALDI-TOF-MS分析
    3 結(jié)論
第五章 SPC-Ⅲ與類GTFS活性蛋白相互作用的研究
    引言
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)原料與試劑
            1.1.2 儀器設(shè)備
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 SPC-Ⅲ與類GTFs活性蛋白（3.10、3.10-Ⅰ和3.10-Ⅱ）相互作用的紫外吸收光譜研究
            1.2.2 SPC-Ⅲ與類GTFs活性蛋白3.10-Ⅰ作用前后SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS分析
            1.2.3 SPC-Ⅲ與類GTFs活性蛋白3.10-Ⅰ作用前后2-DE和MALDI-TOF-MS分析
            1.2.4 SPC-Ⅲ與類GTFs活性蛋白3.10-Ⅱ作用前后2-DE和MALDI-TOF-MS分析
    2 結(jié)果與討論
        2.1 SPC-Ⅲ與類GTFs活性蛋白相互作用的紫外吸收光譜
        2.2 SPC-Ⅲ與類GTFs活性蛋白3.10-Ⅰ作用前后的SDS-PAGE及MALDI-TOF-MS分析
        2.3 2-DE和MALDI-TOF-MS分析與SPC-Ⅲ作用前后的類GTFs活性蛋白3.10-Ⅰ
        2.4 2-DE和MALDI-TOF-MS分析與SPC-Ⅲ作用前后的類GTFs活性蛋白3.10-Ⅱ
    3 結(jié)論
第六章 結(jié)論與展望
    結(jié)論
    展望
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]響應(yīng)面法優(yōu)化高粱外種皮中原花青素的超聲波輔助提取工藝[J]. 黃曼,徐麗嫚,陳靜,涂世,劉睿.  食品科學(xué). 2012(24)
[2]高粱原花青素的ESI-MS分析及其低聚體的RP-HPLC-MS/MS法分離鑒定[J]. 徐麗嫚,黃曼,涂世,陳靜,劉睿.  食品科學(xué). 2011(20)
[3]中草藥牙膏對變形鏈球菌粘附的影響[J]. 黃光偉,覃青云,盧凱玲,周慧.  口腔護(hù)理用品工業(yè). 2011(02)
[4]液相色譜-質(zhì)譜分析葡萄籽提取物中原花青素[J]. 蘇葉萍,杜平,金建秀,許巧霞,劉洪海.  醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2010(11)
[5]鎖陽原花青素的HPLC-MS分析[J]. 高乃群,曹玉華,陶冠軍.  現(xiàn)代化工. 2010(10)
[6]沒食子鞣質(zhì)和聯(lián)合氟化鈉對不同狀態(tài)變鏈菌葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶活性的影響[J]. 林靜,趙今,朱明,李新尚.  中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2010(05)
[7]光譜法研究綠原酸與人血清白蛋白的相互作用[J]. 畢淑云,閆麗麗,孫艷濤.  化學(xué)分析計(jì)量. 2010(02)
[8]變形鏈球菌黏附相關(guān)分子及其針對性免疫防齲的研究進(jìn)展[J]. 張鷹,文玲英,儲(chǔ)冰峰.  中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2010(02)
[9]變形鏈球菌檢測技術(shù)新進(jìn)展[J]. 洪瀟,胡德渝.  廣東牙病防治. 2009(11)
[10]青蛇果原花青素分離和低聚體純品的制備[J]. 肖俊松,曹雁平,龔玉石,謝筆鈞.  食品科學(xué). 2009(17)

博士論文
[1]藥物—人血清白蛋白相互作用的毛細(xì)管電泳法研究[D]. 何攀.河北大學(xué) 2009
[2]c-di-GMP信號(hào)通路在變形鏈球菌致齲過程中作用的初步研究[D]. 閆文娟.第四軍醫(yī)大學(xué) 2009
[3]某些中藥活性組分與蛋白質(zhì)相互作用研究[D]. 李金華.蘭州大學(xué) 2009
[4]多酚類化合物與血清白蛋白相互作用的結(jié)構(gòu)—結(jié)合力關(guān)系、理論模型和應(yīng)用研究[D]. 肖建波.中南大學(xué) 2009
[5]中藥有效成分與人血清白蛋白相互作用研究[D]. 李穎.蘭州大學(xué) 2007
[6]藥物-蛋白結(jié)合作用的HPCE和HPLC法研究[D]. 周大煒.沈陽藥科大學(xué) 2003

碩士論文
[1]拉曼光譜法研究抗炎藥、抗生素及其與DNA的相互作用[D]. 康倩倩.西南大學(xué) 2012
[2]黃酮類化合物與牛血清白蛋白的相互作用研究[D]. 李強(qiáng).南昌大學(xué) 2011
[3]光譜法和原子力顯微鏡研究小分子藥物與人血清白蛋白相互作用[D]. 李娜娜.汕頭大學(xué) 2011
[4]高效親和色譜法對四種中藥活性成分與人血清白蛋白相互作用的研究[D]. 于雪.西北大學(xué) 2010
[5]五種中藥有效成分與三種球蛋白相互作用的研究[D]. 鄭茂東.山西醫(yī)科大學(xué) 2010
[6]光譜法研究三種黃酮類藥物小分子與牛血清白蛋白的相互作用[D]. 董念.中南大學(xué) 2009
[7]苦蕎麥殼中原花青素及其預(yù)防齲齒和抗氧化作用研究[D]. 李濤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[8]綠茶中EGCG提取純化方法及其與牛血清蛋白相互作用的研究[D]. 王進(jìn).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[9]親和色譜法研究五種中藥活性成分與固定化人血清白蛋白的相互作用[D]. 劉麗婷.西北大學(xué) 2009
[10]不同齲敏感者變異鏈球菌臨床分離株兩種生存狀態(tài)蛋白表達(dá)研究[D]. 邱明.福建醫(yī)科大學(xué) 2009



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