本文關(guān)鍵詞：Real-time PCR評價(jià)乙型肝炎病毒污染硅橡膠印模消毒效果的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《昆明醫(yī)科大學(xué)》 2015年

Real-time PCR評價(jià)乙型肝炎病毒污染硅橡膠印模消毒效果的實(shí)驗(yàn)研究

錢小亞  

【摘要】：[目的]本文通過Real-time PCR檢測兩種加成型硅橡膠印模消毒前和浸泡消毒后3個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)乙型肝炎病毒拷貝數(shù)的變化,來評價(jià)三種化學(xué)消毒劑對攜帶乙型肝炎病毒人工唾液污染硅膠印模的消毒效果。遴選出臨床上合適的印模消毒劑和消毒時(shí)間。為臨床開展硅橡膠印模消毒提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。[方法]1.配制2%強(qiáng)化戊二醛；1%優(yōu)氯凈；cavicide消毒劑的中和劑；按化學(xué)消毒劑中和劑鑒定原則,對三種化學(xué)消毒劑的中和劑進(jìn)行鑒定,篩選出3種化學(xué)消毒劑針對攜帶乙型肝炎病毒人工唾液污染硅橡膠印模消毒實(shí)驗(yàn)有效的中和劑。2.應(yīng)用Real-time PCR評價(jià)化學(xué)消毒劑對兩種硅橡膠印模消毒效果,選擇臨床上消毒效果肯定的二種化學(xué)消毒劑(2%強(qiáng)化戊二醛；1%優(yōu)氯凈)和一種新型化學(xué)消毒劑(Cavicide消毒液)對兩種攜帶有乙型肝炎病毒人工唾液污染的硅橡膠印模(3M加成型硅橡膠；GC加成型硅橡膠)進(jìn)行消毒。設(shè)置三個(gè)不同的消毒時(shí)間點(diǎn),達(dá)到預(yù)設(shè)時(shí)間點(diǎn)后,向消毒劑中加入該消毒劑的中和劑,終止消毒反應(yīng)。提取硅橡膠上殘留的HBV-DNA,應(yīng)用Real-time PCR對HBV-DNA進(jìn)行擴(kuò)增,通過比較HBV-DNA消毒前后拷貝數(shù)的變化,得出消毒劑不同時(shí)間點(diǎn)的消毒效率。定量評價(jià)不同消毒劑在不同時(shí)間點(diǎn)對乙肝病毒的滅活效果。[結(jié)果]1.通過化學(xué)消毒劑中和劑鑒定實(shí)驗(yàn),得到Real-time PC R評價(jià)中和劑鑒定表。2.Real-time PCR在評價(jià)3種消毒劑消毒效率后,Cavicide消毒液能在6分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.9%；1%優(yōu)氯凈10分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.4%；2%強(qiáng)化戊二醛35分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.6%。新型消毒劑Cavicide浸泡消毒6分鐘能有效殺滅乙型肝炎病毒,2%強(qiáng)化戊二醛殺滅乙肝病毒的有效時(shí)間為35分鐘,1%優(yōu)氯凈殺滅乙型肝炎病毒的有效時(shí)間為10分鐘。[結(jié)論]1.在乙型肝炎病毒污染硅橡膠印模消毒實(shí)驗(yàn)中,通過中和劑的鑒定試驗(yàn)。選擇0.5%甘氨酸+1%卵磷脂+1%吐溫80PBS為2%強(qiáng)化戊二醛的中和劑,0.5%硫代硫酸鈉為1%優(yōu)氯凈的中和劑,65克/升的吐溫-80+10克/升卵磷脂+10克/升甘氨酸組成的PBS緩沖液作為Cavicide的中和劑。2.Real-time PCR在評價(jià)三種消毒劑消毒前后HBV-DNA拷貝數(shù)發(fā)現(xiàn),Cavicide消毒液能在6分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.9%；1%優(yōu)氯凈10分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.4%；2%強(qiáng)化戊二醛35分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.6%。其中新型消毒劑Cavicide能在6分鐘滅活病毒99.9%以上。消毒時(shí)間短,故新型消毒劑Cavicide是臨床上較理想的印模消毒劑。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R512.62;R783.2
【目錄】：

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本文編號：199247