time PCR評價乙型肝炎病毒污染硅橡膠印模消毒效果的實驗研究
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《昆明醫(yī)科大學(xué)》 2015年
Real-time PCR評價乙型肝炎病毒污染硅橡膠印模消毒效果的實驗研究
錢小亞
【摘要】:[目的]本文通過Real-time PCR檢測兩種加成型硅橡膠印模消毒前和浸泡消毒后3個不同時間點乙型肝炎病毒拷貝數(shù)的變化,來評價三種化學(xué)消毒劑對攜帶乙型肝炎病毒人工唾液污染硅膠印模的消毒效果。遴選出臨床上合適的印模消毒劑和消毒時間。為臨床開展硅橡膠印模消毒提供實驗基礎(chǔ)。[方法]1.配制2%強化戊二醛;1%優(yōu)氯凈;cavicide消毒劑的中和劑;按化學(xué)消毒劑中和劑鑒定原則,對三種化學(xué)消毒劑的中和劑進行鑒定,篩選出3種化學(xué)消毒劑針對攜帶乙型肝炎病毒人工唾液污染硅橡膠印模消毒實驗有效的中和劑。2.應(yīng)用Real-time PCR評價化學(xué)消毒劑對兩種硅橡膠印模消毒效果,選擇臨床上消毒效果肯定的二種化學(xué)消毒劑(2%強化戊二醛;1%優(yōu)氯凈)和一種新型化學(xué)消毒劑(Cavicide消毒液)對兩種攜帶有乙型肝炎病毒人工唾液污染的硅橡膠印模(3M加成型硅橡膠;GC加成型硅橡膠)進行消毒。設(shè)置三個不同的消毒時間點,達到預(yù)設(shè)時間點后,向消毒劑中加入該消毒劑的中和劑,終止消毒反應(yīng)。提取硅橡膠上殘留的HBV-DNA,應(yīng)用Real-time PCR對HBV-DNA進行擴增,通過比較HBV-DNA消毒前后拷貝數(shù)的變化,得出消毒劑不同時間點的消毒效率。定量評價不同消毒劑在不同時間點對乙肝病毒的滅活效果。[結(jié)果]1.通過化學(xué)消毒劑中和劑鑒定實驗,得到Real-time PC R評價中和劑鑒定表。2.Real-time PCR在評價3種消毒劑消毒效率后,Cavicide消毒液能在6分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.9%;1%優(yōu)氯凈10分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.4%;2%強化戊二醛35分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.6%。新型消毒劑Cavicide浸泡消毒6分鐘能有效殺滅乙型肝炎病毒,2%強化戊二醛殺滅乙肝病毒的有效時間為35分鐘,1%優(yōu)氯凈殺滅乙型肝炎病毒的有效時間為10分鐘。[結(jié)論]1.在乙型肝炎病毒污染硅橡膠印模消毒實驗中,通過中和劑的鑒定試驗。選擇0.5%甘氨酸+1%卵磷脂+1%吐溫80PBS為2%強化戊二醛的中和劑,0.5%硫代硫酸鈉為1%優(yōu)氯凈的中和劑,65克/升的吐溫-80+10克/升卵磷脂+10克/升甘氨酸組成的PBS緩沖液作為Cavicide的中和劑。2.Real-time PCR在評價三種消毒劑消毒前后HBV-DNA拷貝數(shù)發(fā)現(xiàn),Cavicide消毒液能在6分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.9%;1%優(yōu)氯凈10分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.4%;2%強化戊二醛35分鐘滅活硅橡膠印模表面乙型肝炎病毒99.6%。其中新型消毒劑Cavicide能在6分鐘滅活病毒99.9%以上。消毒時間短,故新型消毒劑Cavicide是臨床上較理想的印模消毒劑。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R512.62;R783.2
【目錄】:
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