赤蘚糖醇對(duì)嗜酸乳桿菌在配方奶中生長代謝及黏附能力影響的分析
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《福建醫(yī)科大學(xué)》 2015年
赤蘚糖醇對(duì)嗜酸乳桿菌在配方奶中生長代謝及黏附能力影響的分析
張琰君
【摘要】:目的:赤蘚糖醇(erythritol)是一種新型的糖醇類甜味劑,近年來研究發(fā)現(xiàn)其還有防齲及抑制細(xì)菌的作用。但主要集中于赤蘚糖醇對(duì)鏈球菌屬及牙齦卟啉單胞菌影響的研究上,對(duì)口腔中主要致齲菌之一的乳桿菌的生長、產(chǎn)酸是否有影響還未見報(bào)道。配方奶粉是可供給嬰兒生長與發(fā)育所需營養(yǎng)的一種人工輔食,用作母乳的替代品。然而,根據(jù)2005年第三次全國口腔健康流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示:5歲以下兒童乳牙患齲率為66.00%,致齲原因多為奶瓶喂養(yǎng)所致。本實(shí)驗(yàn)在配方奶中添加赤蘚糖醇,希望既滿足兒童對(duì)甜味的喜愛及生長發(fā)育的營養(yǎng)要求,又能夠在一定程度上減少齲病的發(fā)生。將嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus,La)作為研究對(duì)象,進(jìn)一步探討赤蘚糖醇用于齲病預(yù)防的可行性及機(jī)理。方法:1.赤蘚糖醇對(duì)La在配方奶中產(chǎn)酸和乳酸代謝量影響的分析:將La接種于赤蘚糖醇濃度為1%、2%、4%、6%、8%的赤蘚糖醇-配方奶混合液(實(shí)驗(yàn)組)、及不含赤蘚糖醇的配方奶溶液(對(duì)照組)中37℃厭氧(80%N2、10%CO2、10%H2)培養(yǎng)。于4、8、12、16、20及24 h各時(shí)間點(diǎn)取各培養(yǎng)液,處理后使用高效液相色譜儀(high performance liquid chromatography,HPLC)分析計(jì)算。同時(shí)于培養(yǎng)0、4、8、12、16、20、24h各時(shí)間點(diǎn)測定各管溶液的p H值。2.赤蘚糖醇對(duì)La在配方奶中增殖的影響:將對(duì)照組和各實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)18h的La菌液通過稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)算菌落形成單位(Colony Forming Units,CFU),來觀察赤蘚糖醇對(duì)嗜酸乳桿菌生長的影響。3.赤蘚糖醇對(duì)La菌斑生物膜在配方奶中黏附牙本質(zhì)的影響:將處理好的牙本質(zhì)塊置于各組溶液中,加入La菌液厭氧培養(yǎng)18h,運(yùn)用激光共聚焦掃描顯微鏡(Confocal Laser Scanning Microscop,CLSM)和環(huán)境掃描電子顯微鏡(Environmental Scanning Electron Microscope,ESEM)觀察La生物膜在牙本質(zhì)上黏附情況,探討赤蘚糖醇對(duì)La黏附作用的影響。結(jié)果:1.各組乳酸濃度均隨培養(yǎng)時(shí)間延長而持續(xù)增高,即各時(shí)間點(diǎn)之間乳酸濃度的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);Dunnett-t檢驗(yàn)各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組M相比,乳酸代謝濃度均顯著低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);Tukey HDS檢驗(yàn)進(jìn)行各組間兩兩比較(不考慮時(shí)間點(diǎn)),其中4%E-M、6%E-M、8%E-M三組間兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。從各組p H變化的曲線圖可看出,4h前變化不明顯曲線較平緩,自8h時(shí)各組曲線均呈下降趨勢(shì),且4%E-M、6%E-M、8%E-M組下降幅度較其余組小,對(duì)照組M下降幅度最大。Tukey HDS檢驗(yàn)進(jìn)行各組間兩兩比較(不考慮時(shí)間點(diǎn)),各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組M差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);1%E-M與2%E-M間差異不顯著,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05);6%E-M組與4%E-M、8%E-M比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05)。2.各實(shí)驗(yàn)組CFU值均小于對(duì)照組M,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01);各組間兩兩比較,其中4%E-M、6%E-M、8%E-M三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹥0.05),低濃度組(1%E-M、2%E-M)CFU值大于高濃度組(4%E-M、6%E-M、8%E-M),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.01)。3.CLSM觀察到MRS、6%E-M、8%E-M組綠色熒光面積較M、1%E-M、2%E-M組少,且統(tǒng)計(jì)學(xué)比較各組中相對(duì)層的活菌百分比,6%E-M、8%E-M組顯著小于M組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05);ESEM觀察到的2%E-M、4%E-M、6%E-M、8%E-M的胞外聚合物和菌體數(shù)均少于M、1%E-M組,且牙本質(zhì)結(jié)構(gòu)較清晰。結(jié)論:赤蘚糖醇對(duì)La在配方奶中生長和產(chǎn)酸有抑制作用,高濃度的赤蘚糖醇組(4%、6%、8%)抑制效果優(yōu)于低濃度赤蘚糖醇組(1%、2%),且6%、8%濃度的赤蘚糖醇抑制La在配方奶中黏附牙本質(zhì)的效果顯著。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:TS252.1;R788.1
【目錄】:
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