阿爾茨海默病(Alzheimer disease, AD)是以智能衰退為主要表現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。AD的主要病理特征為腦內(nèi)分布有由大量的β-淀粉樣蛋白(β-amyloid, Aβ)沉積形成的老年斑(senile plaque, SP)、神經(jīng)元內(nèi)高度磷酸化tau蛋白聚集形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)(neurofibrillary tangle)、神經(jīng)元營(yíng)養(yǎng)障礙、神經(jīng)元的大量丟失、突觸的損害和丟失。目前AD的病因尚不清楚,但Aβ神經(jīng)毒性被認(rèn)為是各種因素引起AD的共同通路。本實(shí)驗(yàn)分別在AD轉(zhuǎn)基因鼠和在腦內(nèi)注入Aβ的SD大鼠動(dòng)物模型上探討Aβ對(duì)c-Fos和小泛素相關(guān)修飾物(small ubiquitin-related modifer, sumo-1)在海馬內(nèi)表達(dá)的影響。主要研究結(jié)果如下： 第一部分：Aβ誘導(dǎo)c-Fos的表達(dá)： 1.免疫組織化學(xué)檢測(cè)顯示12月齡APPswe/PS1ΔE9 AD轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)有大量的β-淀粉樣蛋白沉積形成的斑塊。同12月齡野生型小鼠相比,Fos蛋白表達(dá)顯著增加,Fos免疫陽性染色主要分布在海馬CA1-4區(qū)的錐體細(xì)胞層、齒狀回、丘腦、下丘腦等部位的神經(jīng)元胞核內(nèi)。 2.SD...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
    材料
        1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.主要藥品及試劑
        3.主要儀器
        4.有關(guān)溶液的配制
    方法
        1.動(dòng)物冷水應(yīng)激模型制備
        2.大鼠海馬注入不同肽段的Aβ
        3.大鼠側(cè)腦室內(nèi)注入Aβ1-40

        4.冰凍腦組織切片制備
        5.免疫組織化學(xué)染色
        6.腦組織切片免疫熒光染色
        7.鼠腦組織SUMO-1蛋白的提取
        8.考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量
        9.Western Blot免疫印跡
        10.Aβ_1-40異聚體的制備
        11.Aβ_1-40與腦組織勻漿孵育制備淀粉樣蛋白的異聚體吸光度測(cè)定
        12.積分光密度分析
        13.統(tǒng)計(jì)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    第一部分:SD大鼠腦內(nèi)注入Aβ片段后,Fos蛋白的表達(dá)
        一) APPswe/PS1ΔE9轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Fos蛋白表達(dá)增加
            1.1 APPswe/PS1ΔE9轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Aβ及老年斑的表達(dá)明顯增多
            1.2 在APPswe/PS1ΔE9轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Fos表達(dá)明顯高于對(duì)照的野生型鼠
        二) SD大鼠海馬內(nèi)注入Aβ片段后,Fos蛋白表達(dá)改變情況
            2.1 SD大鼠海馬內(nèi)注入Aβ_1-40片斷不同時(shí)程后Fos表達(dá)改變情況
            2.2 SD大鼠海馬內(nèi)注入不同濃度的Aβ_1-40后Fos表達(dá)改變情況
            2.3 SD大鼠海馬內(nèi)注入不同肽段長(zhǎng)度的Aβ后,Fos表達(dá)改變情況
            2.4 SD大鼠側(cè)腦室內(nèi)注入Aβ_1-40后Fos表達(dá)改變情況
            2.5 Fos表達(dá)陽性的神經(jīng)元定性研究
    第二部分 Aβ對(duì)SUMO-1表達(dá)影響的研究
        一) 轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)SUMO-1的分布表達(dá)情況
            1.1 APPswe/PS1ΔE9轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)SUMO-1蛋白的表達(dá)
            1.2 APPswe/PS1ΔE9轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)SUMO-1與Aβ的定位
        二) SD大鼠海馬內(nèi)注入Aβ肽段后SUMO-1表達(dá)情況
            2.1 SD大鼠海馬內(nèi)注入單體Aβ_1-40后SUMO-1的表達(dá)
            2.2 SD大鼠海馬內(nèi)注入纖維狀A(yù)β_1-40后SUMO-1的表達(dá)
        三) 昆明鼠冷水應(yīng)激后SUMO-1的表達(dá)
討論
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
綜述
英文縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3861903

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