目的:以細(xì)胞形態(tài)改變和tau蛋白過度磷酸化為反映AD(Alzheimer’s Disease)發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵指標(biāo),初步探明實(shí)驗(yàn)性AD誘導(dǎo)產(chǎn)生過程中的PTEN變化狀況及其與tau蛋白過度磷酸化的關(guān)系,以深化理解AD的發(fā)病機(jī)制。 方法:①采用岡田酸(Okadaic acid,OA)誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞和NG108-15細(xì)胞,以細(xì)胞形態(tài)改變和tau蛋白過度磷酸化為觀察指標(biāo),建立用于AD研究的細(xì)胞模型。②倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)的變化。③Western blot法測定SH-SY5Y細(xì)胞和NG108-15細(xì)胞Ser396位點(diǎn)磷酸化tau蛋白水平和PTEN蛋白水平。④RT-PCR方法觀測SH-SY5Y細(xì)胞PTEN mRNA水平。 結(jié)果:1.岡田酸誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞AD樣發(fā)生發(fā)展中PTEN的變化:①OA孵育SH-SY5Y細(xì)胞可顯著改變細(xì)胞的形態(tài),隨OA孵育時(shí)間的延長,6 h后細(xì)胞開始變圓,突觸縮回,18 h后細(xì)胞大部分變圓,突觸消失,48 h后細(xì)胞漂浮生長,部分細(xì)胞呈死亡狀態(tài);40 nmol/L OA作用于細(xì)胞,Ser396位點(diǎn)磷酸化tau蛋白水平在OA孵育后12 h顯著升高, 18 h、24 ...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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前言
第一部分 岡田酸誘導(dǎo) SH-SY5Y 細(xì)胞 AD 樣發(fā)生發(fā)展中 PTEN 的變化
    材料和方法
    結(jié)果
        1 OA 對 SH-SY5Y 細(xì)胞形態(tài)的影響
        2 OA 對 SH-SY5Y 細(xì)胞tau 蛋白磷酸化水平的影響
        3 OA 誘導(dǎo) SH-SY5Y 細(xì)胞tau 蛋白過度磷酸化中 PTEN 蛋白水平的變化
        4 OA 誘導(dǎo) SH-SY5Y 細(xì)胞產(chǎn)生 AD 樣過程中 PTEN mRNA 水平的變化
    討論
    小結(jié)
第二部分 岡田酸誘導(dǎo) NG108-15 細(xì)胞 AD 樣發(fā)生發(fā)展中 PTEN 的變化
    材料與方法
    結(jié)果
        1 OA 對 NG108-15 細(xì)胞形態(tài)的影響
        2 OA 對 NG108-15 細(xì)胞tau 蛋白磷酸化水平的影響
        3 OA 誘導(dǎo) NG108-15 細(xì)胞tau 蛋白過度磷酸化中 PTEN 蛋白水平的變化
    討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述



本文編號(hào)：3821124