研究目的:阿爾茨海默癥(Alzheimer’s disease,AD),又稱老年癡呆,它是一種以認(rèn)知損害和學(xué)習(xí)記憶減退為主要表現(xiàn)的神經(jīng)退行性疾病。目前認(rèn)為,β-淀粉樣蛋白(β-amyloid,Aβ)是造成AD發(fā)病的主要致病因素之一,它的異常積聚能夠引起突觸功能受損,產(chǎn)生神經(jīng)毒性。到目前為止,還沒有相關(guān)的藥物可以達(dá)到治愈AD的效果。紫杉葉素(Taxifolin,TAX)是一種從天然植物中提取的黃酮類物質(zhì),主要有抗炎、抗氧化、清除自由基的作用。研究表明,TAX能夠減小寡聚體Aβ的積聚,然而TAX在Aβ介導(dǎo)的認(rèn)知功能損傷中的作用和機制尚不清楚。本研究結(jié)合分子技術(shù)、活細(xì)胞成像技術(shù)以及行為學(xué)方法來研究TAX在可溶性寡聚體Aβ介導(dǎo)的突觸損傷和認(rèn)知障礙中的作用和潛在機制.研究方法:(1)MTT方法檢測TAX和/或Aβ42處理的SH-SY5Y細(xì)胞的細(xì)胞活性,分析TAX的效果以及對Aβ42處理的神經(jīng)細(xì)胞是否有保護作用。(2)對培養(yǎng)第5天的海馬原代神經(jīng)元,GFP-actin和F-GFP共轉(zhuǎn)染標(biāo)記神經(jīng)元的形態(tài),在第7天,用活細(xì)胞成像的方法檢測樹突絲的數(shù)目和長度,分析可溶性寡聚體Aβ42對樹突絲的影響以及TA...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
1 實驗材料和方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 寡聚體Aβ42的制備
        1.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        1.1.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染相關(guān)試劑
        1.1.5 蛋白免疫印跡相關(guān)試劑
        1.1.6 實驗用試劑盒
        1.1.7 常用溶液的配方
        1.1.8 實驗儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞活性檢測
        1.2.2 小鼠神經(jīng)細(xì)胞的原代培養(yǎng)
        1.2.3 小鼠海馬神經(jīng)元轉(zhuǎn)染
        1.2.4 圖像獲取和分析
        1.2.5 海馬區(qū)埋管注射手術(shù)
        1.2.6 新物體識別實驗
        1.2.7 水迷宮實驗
        1.2.8 SO Aβ42和TAX處理
        1.2.9 蛋白免疫印記實驗
        1.2.10 cPLA2和PGE2的含量測定
        1.2.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
2 實驗結(jié)果
    2.1 TAX以劑量依賴的方式抑制寡聚體Aβ42引起的SH-SY5Y細(xì)胞死亡
    2.2 TAX抑制了由寡聚體Aβ42引起的海馬神經(jīng)元樹突絲的損傷
    2.3 TAX抑制了寡聚體Aβ42引起的海馬神經(jīng)元突觸丟失
    2.4 TAX改善了寡聚體Aβ42誘導(dǎo)的小鼠的認(rèn)知功能障礙
    2.5 TAX改善了寡聚體Aβ42引起的小鼠的空間記憶損傷
    2.6 TAX 抑制了寡聚體 Aβ42 引起的的小鼠海馬中PSD 95的表達(dá)水平的降低
    2.7 TAX 抑制了寡聚體 Aβ42 誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元和組織中cPLA2和PGE2水平的升高
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻
附錄A 文獻綜述
    參考文獻
在學(xué)研究成果
致謝
附件



本文編號：3812246