本文關(guān)鍵詞：淀粉樣前體蛋白的突變在Aβ形成過程中作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《北京理工大學(xué)》 2015年

淀粉樣前體蛋白的突變在Aβ形成過程中作用研究

張歡歡  

【摘要】：阿爾茨海默癥是當(dāng)今威脅老年人身體健康的主要疾病之一,目前還沒有很好的治療方法和藥物。Aβ是阿爾茨海默癥患者腦內(nèi)神經(jīng)炎性老年斑的主要成分。Aβ短肽的產(chǎn)生是淀粉樣前體蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)依次被β-分泌酶和γ-分泌酶水解而形成的,據(jù)研究Aβ(1-40,1-38)和Aβ(1-42,3-40)較其他形式Aβ更具有淀粉樣蛋白毒性。研究表明,APP基因突變是家族性阿爾茨海默癥的遺傳因素之一,對APP基因突變的深入將有助于加深對阿爾茨海默癥致病相關(guān)通路的認識。本課題選取5個APP單核苷酸突變類型:A673T、A673V、E682K、E693G、E693Q,采用重疊延伸PCR的方法獲得5個APP突變基因,雙酶切后將突變基因與pcDNA4質(zhì)粒連接,構(gòu)建重組真核表達質(zhì)粒。以pcDNA4為對照組,分別將pcDNA4/APP WT-mycHis或pcDNA4/APP-mycHis突變質(zhì)粒與pcDNA4/BACE1-mycHis瞬時轉(zhuǎn)染入HEK293細胞,進行突變基因的表達。采用Western Blot的方法檢測轉(zhuǎn)染APP突變質(zhì)粒后APP水解切割過程相關(guān)蛋白水平,包括APP蛋白、C99片段等,采用LC-MS/MS檢測Aβ產(chǎn)生過程中生成的三肽、四肽。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與APP野生型相比,A673V、E682K、E693Q三種突變均使APP蛋白水解量增多;雖然相比于APP野生型,E682K、E693G兩種突變均使C99片段的生成量提高,但A673T突變能使C99與C83片段生成量的比率明顯降低。ELISA結(jié)果顯示A673T組Aβ42水平明顯低于APP野生型,其他4個突變組Aβ42水平均高于APP野生型;而A673T組Aβ40水平與APP野生型相比卻無明顯差異,其他4個突變組Aβ40水平均低于APP野生型;Aβ42/Aβ40比率顯示,A673T組Aβ42/Aβ40較APP野生型明顯降低,而其他四個突變組Aβ42/Aβ40比率均明顯高于APP野生型。LC-MS/MS質(zhì)譜結(jié)果顯示A673T組Aβ40和Aβ42水平均降低;A673V和E693Q兩組Aβ40水平降低,Aβ42水平升高;E682K組Aβ40和Aβ42水平均升高;E693G組Aβ40水平升高,Aβ42水平降低。綜合研究結(jié)果,A673T突變能通過調(diào)控毒性Aβ生成量減少,從而對阿爾茨海默癥起到一定保護作用。其他4種突變均能夠促進APP蛋白水解產(chǎn)生Aβ42,這對理解阿爾茨海默癥病理發(fā)生APP機制增加了實驗數(shù)據(jù)支持。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：北京理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R749.16
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳希;孫鳳艷;黃芳;;阿爾茨海默病的“血管假說”:巧遇還是同謀?[J];復(fù)旦學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2011年05期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 黃德弘;劉孟淵;;阿爾茨海默病和血管性癡呆患者血脂、血糖及尿酸水平的變化[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年04期

2 楊南竹;贠相華;;尿酸代謝異常與阿爾茨海默病關(guān)系的研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2015年14期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高文明;;淀粉樣前體蛋白研究進展[J];濟寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2010年02期

2 王少文;β-淀粉樣前體蛋白分子生物學(xué)研究進展[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊);1996年03期

3 馬國詔;信號轉(zhuǎn)導(dǎo)在淀粉樣前體蛋白代謝中的研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊;2004年01期

4 安麗榮,金連弘,張際緋,趙育楨,傅松濱;淀粉樣前體蛋白過度表達細胞模型的建立及對細胞增殖和凋亡的影響[J];中國臨床康復(fù);2005年17期

5 楊紅旗;陳生弟;巴茂文;任汝靜;張宇紅;馬建芳;陸國強;;蛋白激酶C激動劑對可溶性淀粉樣前體蛋白分泌的影響[J];上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2006年07期

6 任汝靜;王剛;潘靜;楊紅旗;陸國強;陳生弟;;尼古丁對Aβ_(25～35)細胞毒性的拮抗作用及與β-淀粉樣前體蛋白代謝的關(guān)系[J];中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志;2007年03期

7 李曉晴;張?zhí)K明;楊華靜;張智紅;;多光子激光掃描成像技術(shù)對活細胞內(nèi)淀粉樣前體蛋白裂解和β-淀粉樣蛋白生成的觀察(英文)[J];Neuroscience Bulletin;2007年05期

8 蔡志友;晏寧;晏勇;張駿;王鳳英;王詠龍;吳芳;張建剛;;淀粉樣前體蛋白酶與β-淀粉樣蛋白在衰老癡呆大鼠腦組織中的表達[J];中國老年學(xué)雜志;2009年13期

9 肖飛;羅煥敏;;淀粉樣前體蛋白結(jié)構(gòu)和功能的研究進展[J];中國老年學(xué)雜志;2009年23期

10 別曼;;淀粉樣前體蛋白5'端啟動子非翻譯區(qū)域的核因子結(jié)合區(qū)可調(diào)控基因表達[J];中國病理生理雜志;2010年07期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張癸榮;殷明;;興奮性神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸對于可溶性淀粉樣前體蛋白生成的影響[A];第九屆中國神經(jīng)藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2000年

2 陳生弟;楊紅旗;巴茂文;任汝靜;張宇紅;馬建芳;陸國強;;蛋白激酶C激動劑促進可溶性淀粉樣前體蛋白的分泌[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

3 樊彩妮;丁健青;陳生弟;湯薈冬;;β淀粉樣前體蛋白羧基端肽對小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞的毒性作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

4 王抒;孫蘭;杜冠華;;人淀粉樣前體蛋白高表達抑制SH-SY5Y細胞M膽堿受體結(jié)合[A];第十一屆全國神經(jīng)藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2004年

5 樊彩妮;湯薈冬;陳生弟;;β淀粉樣前體蛋白羧基端肽對小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞的毒性作用及機制[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第九屆全國學(xué)術(shù)會議暨第五次會員代表大會論文摘要集[C];2011年

6 李瑞林;袁寶莉;郭亞樂;;腦白質(zhì)損害新生大鼠腦內(nèi)β淀粉樣前體蛋白表達及意義[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會首屆兒童康復(fù)學(xué)術(shù)會議暨中國殘疾人康復(fù)協(xié)會第八屆小兒腦癱學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

7 楊紅旗;陳生弟;巴茂文;任汝靜;張宇紅;譚玉燕;;Deprenyl對淀粉樣前體蛋白代謝的影響[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

8 邱瑜;吳興軍;榮征星;周冠懷;陳紅專;;M受體對大鼠海馬和大腦皮層的淀粉樣前體蛋白代謝調(diào)節(jié)作用[A];中國藥理學(xué)會第八次全國代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

9 楊紅旗;陳生弟;巴茂文;陸國強;梁梁;徐潔懿;;絲裂原活化的蛋白激酶在TPPB促進可溶性淀粉樣前體蛋白釋放中的作用[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

10 韓恩吉;姚俊英;崔行;曾季平;夏文;;海風(fēng)藤對淀粉樣前體蛋白表達的抑制作用[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 麥迪信;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 高素琴;干預(yù)β-淀粉樣前體蛋白裂解酶基因減少神經(jīng)細胞β淀粉樣蛋白的產(chǎn)生[D];山東大學(xué);2009年

2 張華;胰島素樣生長因子-1對PC12細胞APP代謝和BACE-1表達的影響及其機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

3 張鵬;淀粉樣前體蛋白可溶性α片段與睡眠的相關(guān)性及潛在的認知保護作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

4 鄭瑋;DMT1參與β-淀粉樣前體蛋白表達和Aβ分泌的機制研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

5 李旻;NGF對表達突變型APP的PC12細胞作用機理的實驗研究[D];中南大學(xué);2006年

6 劉偉;SAMP8小鼠海馬異常表達miRNA的鑒定和初步功能研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張歡歡;淀粉樣前體蛋白的突變在Aβ形成過程中作用研究[D];北京理工大學(xué);2015年

2 沈穎華;淀粉樣前體蛋白和煙堿型乙酰膽堿受體α7亞型穩(wěn)定共表達細胞模型的建立[D];上海交通大學(xué);2007年

3 管姝軼;大鼠反復(fù)前腦缺血再灌注后β淀粉樣前體蛋白表達變化的研究[D];吉林大學(xué);2005年

4 劉靖;穩(wěn)定表達人淀粉樣前體蛋白HEK293細胞系的建立及鑒定[D];大連醫(yī)科大學(xué);2008年

5 王忠弢;髓鞘堿性蛋白、β淀粉樣前體蛋白和腦啡肽在間歇低氧大鼠腦內(nèi)的表達及還原型谷胱甘肽的保護作用[D];蘭州大學(xué);2014年

6 范靚豐;Caspr與β-淀粉樣前體蛋白在體外相互作用減少了β-淀粉樣蛋白的產(chǎn)生[D];蘇州大學(xué);2013年

7 侯亮;糖基化終末產(chǎn)物通過誘導(dǎo)海馬CTGF表達對APP、Aβ代謝的作用及其機制研究[D];山東大學(xué);2010年

8 王靜;TDP-43與β-淀粉樣前體蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相互作用并誘導(dǎo)P53依賴的細胞凋亡[D];蘇州大學(xué);2014年

9 代政偉;外源性硫化氫對PC12細胞APP/Aβ代謝途徑及BACE1表達的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

10 甘炘靈;硫化氫與阿爾茲海默癥的研究進展[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：淀粉樣前體蛋白的突變在Aβ形成過程中作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：217282