發(fā)布時間：2016-11-24 05:00

  本文關(guān)鍵詞：孤獨(dú)癥與精神分裂癥DRD2基因的突變檢測，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《濟(jì)南大學(xué)》 2014年

孤獨(dú)癥與精神分裂癥DRD2基因的突變檢測

劉苗  

【摘要】：孤獨(dú)癥（autism）是一種始發(fā)于嬰幼兒期（通常在3歲以內(nèi)）的廣泛性發(fā)育障礙，以社交、言語障礙及刻板重復(fù)行為為主要特征。近年來孤獨(dú)癥的發(fā)病呈上升趨勢，國外報道兒童孤獨(dú)癥的患病率為0．6%。孤獨(dú)癥的病因涉及遺傳、圍產(chǎn)期危險因素、腦器質(zhì)性疾病、神經(jīng)生化等，一般認(rèn)為是遺傳與環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。遺傳因素在病因中占主要方面，孤獨(dú)癥是多基因遺傳病。迄今，許多基因被發(fā)現(xiàn)與孤獨(dú)癥關(guān)聯(lián)。 精神分裂癥（Schizophrenia，）是一種重型精神疾病，主要表現(xiàn)為思維、情感、行為異常，精神活動與環(huán)境不協(xié)調(diào)，多發(fā)病于青壯年。兒童青少年精神分裂癥臨床表現(xiàn)更為嚴(yán)重，并且預(yù)后不良。世界范圍內(nèi)的終生患病率約為1％，發(fā)病受遺傳和環(huán)境因素的共同影響。家系調(diào)查、寄養(yǎng)子和雙生子研究均顯示遺傳是導(dǎo)致該疾病的重要因素，遺傳度約為80%。通過連鎖和關(guān)聯(lián)分析，已經(jīng)篩選出許多與精神分裂癥病因相關(guān)的基因和染色體區(qū)域。目前的熱點(diǎn)候選基因有DRD2、ZNF804A、DISC1、MTHFR等。 DRD2(dopamine receptor D2)基因被認(rèn)為是引起孤獨(dú)癥與精神分裂癥的易感基因，定位于11q23.1，包含9個外顯子，數(shù)個內(nèi)含子及短核苷酸重復(fù)序列(STR)。DRD2為多巴胺受體的一個亞型，屬于G蛋白偶聯(lián)受體，抑制腺苷酸環(huán)化酶的活性，，使cAMP的水平降低。由于DRD2基因調(diào)控失調(diào)，引起多巴胺D2受體表達(dá)異常，從而使大腦中某些區(qū)域的多巴胺功能紊亂，導(dǎo)致精神疾病的發(fā)生。 目的 對孤獨(dú)癥以及兒童青少年精神分裂癥患者的DRD2基因的全部外顯子進(jìn)行突變篩查，以求發(fā)現(xiàn)突變。 方法 階段一:孤獨(dú)癥DRD2基因外顯子突變篩查 選擇了2000年—2002年在山東省精神衛(wèi)生中心就診的孤獨(dú)癥患者(以下簡稱患者)38例；其中男性36例，女性2例，男女之比為18:1，年齡范圍2-10歲，平均年齡（5.10±1.61）歲，患者間均無血緣關(guān)系。正常對照者1095例，（以下簡稱對照者），分為95例與1000例兩組，均取自山東省血液中心獻(xiàn)血者。95例對照者中，男性48例，女性47例，男女之比為1.02：1，年齡范圍18—55歲，平均年齡26.03±6.84歲；1000例對照者中，男性569例，女性431例，男女之比為1.32：1，年齡范圍17—55歲，平均年齡23.08±5.67歲。對DRD2基因的9個外顯子合成15對引物。將患者組與對照組的每個個體取20ng/μl濃度的DNA溶液10μl進(jìn)行混合，制成DNA混合池，將38例孤獨(dú)癥患者的DNA構(gòu)建了1個DNA混合池樣本；將正常對照者的DNA分別構(gòu)建了2個DNA混合池樣本（95例與1000例）。首先將上述3個DNA混合池分別進(jìn)行PCR，然后再將稀釋后的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行COLD-PCR，最后用高分辨率熔解曲線(HRM）分析方法對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行突變檢測。 階段二：兒童青少年精神分裂癥DRD2基因外顯子突變篩查 選擇了山東省精神衛(wèi)生中心2005年—2008年住院的兒童青少年精神分裂癥患者89例；其中男性45例，女性44例，男女之比為1:0.98，平均年齡（16.14±2.77）歲，平均發(fā)病年齡（15.15±2.80）歲，患者間均無血緣關(guān)系。正常對照者1095例，分為95例與1000例兩組，均取自山東省血液中心獻(xiàn)血者。95例對照者中，男性48例，女性47例，男女之比為1.02：1，年齡范圍18—55歲，平均年齡26.03±6.84歲；1000例對照者中，男性569例，女性431例，男女之比為1.32：1，年齡范圍17—55歲，平均年齡23.08±5.67歲。對DRD2基因的9個外顯子合成15對引物。將患者組與對照組的每個個體取20ng/μl濃度的DNA溶液10μl進(jìn)行混合，制成DNA混合池，將89例兒童青少年精神分裂癥患者的DNA構(gòu)建了1個DNA混合池樣本；將正常對照者的DNA分別構(gòu)建了2個DNA混合池樣本（95例與1000例）。首先將上述3個DNA混合池分別進(jìn)行PCR，然后再將稀釋后的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行COLD-PCR，最后用高分辨率熔解曲線(HRM）分析方法對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行突變檢測。 結(jié)果 1.用HRM方法對38例孤獨(dú)癥患者和95例及1000例正常對照者的DRD2基因外顯子擴(kuò)增產(chǎn)物的熔解曲線進(jìn)行分析，未發(fā)現(xiàn)兩者的熔解曲線存在差別。 2.用HRM方法對89例兒童青少年精神分裂癥患者和95例及1000例正常對照者的DRD2基因外顯子擴(kuò)增產(chǎn)物的熔解曲線進(jìn)行分析，未發(fā)現(xiàn)兩者的熔解曲線存在差別。 結(jié)論 本實(shí)驗(yàn)對孤獨(dú)癥以及精神分裂癥患者DRD2基因外顯子的突變篩查沒有發(fā)現(xiàn)突變。因此得出結(jié)論：DRD2基因外顯子突變可能與山東省孤獨(dú)癥及精神分裂癥患者的病因無關(guān)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.94;R749.3
【目錄】：

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 劉亞蘭;中國人群兒童孤獨(dú)癥的NRXN1基因關(guān)聯(lián)研究和兩種疾病相關(guān)拷貝數(shù)變異的鑒定[D];中南大學(xué);2012年

2 郗春艷;MeCP2基因及BDNF基因與兒童孤獨(dú)癥的相關(guān)性研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

3 郭輝;兒童孤獨(dú)癥的全基因組關(guān)聯(lián)研究[D];中南大學(xué);2013年

4 劉巖巖;HIV感染易感基因的關(guān)聯(lián)分析和孤獨(dú)癥易感基因的突變篩查及CNV檢測[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 王維霞;小清蛋白在孤獨(dú)癥模型大鼠情緒與認(rèn)知相關(guān)腦區(qū)的表達(dá)及其發(fā)育研究[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

2 徐理;小清蛋白在孤獨(dú)癥模型大鼠上丘的表達(dá)及相關(guān)神經(jīng)元形態(tài)的年齡變化[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

3 何艷琴;藥物依賴易感基因的關(guān)聯(lián)分析和孤獨(dú)癥易感基因的突變篩查[D];陜西師范大學(xué);2012年

4 羅三川;孤獨(dú)癥易感基因NRXN1突變體蛋白的生物學(xué)功能研究[D];中南大學(xué);2013年

5 陳明軍;信號蛋白β-catenin和GSK-3β在孤獨(dú)癥模型大鼠腦內(nèi)的表達(dá)及相關(guān)神經(jīng)元的形態(tài)變化[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

6 楊耀;基于基因芯片方法的孤獨(dú)癥和SNP相關(guān)性分析[D];東南大學(xué);2006年

7 鄧文林;34對孤獨(dú)癥譜系障礙雙生子遺傳及影響因素研究[D];中山大學(xué);2012年

8 胡藝俏;孤獨(dú)癥全基因組CNV分析與一例攜帶15q11.2-q13微重復(fù)患者的研究[D];中南大學(xué);2009年

9 劉苗;孤獨(dú)癥與精神分裂癥DRD2基因的突變檢測[D];濟(jì)南大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：孤獨(dú)癥與精神分裂癥DRD2基因的突變檢測，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：189866