帕羅西汀作為選擇性五羥色胺重攝取抑制劑（SSRIs）的代表藥之一，可以顯著改善抑郁癥狀，被廣泛應用于重性抑郁障礙（MDD）的臨床治療中。然而，由于帕羅西汀最低有效濃度的尚不明確，臨床醫(yī)師在給予帕羅西汀治療時大多采用摸索式的經(jīng)驗療法；且臨床發(fā)現(xiàn)給予MDD患者同樣劑量的帕羅西汀，他們體內(nèi)帕羅西汀血藥濃度差異很大，臨床應答個體差異明顯。這兩個問題均會導致患者的病程遷延，造成明顯的個體療效差異。由于MDD是一種受遺傳因素和環(huán)境因素等多因素影響的疾病，帕羅西汀血藥濃度和相關基因的遺傳多態(tài)性是否影響抗抑郁療效有待進一步的探討。本實驗在繼承前人工作經(jīng)驗的基礎上，考慮到腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）、膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（GDNF）與神經(jīng)元細胞的萎縮、損壞的修復密切相關，且BDNF和GDNF均是SSRIs的下游信號因子，因此遴選出BDNF、GDNF的單核苷酸多態(tài)性（SNPs），探討它們與帕羅西汀療效的相關性，篩選出與藥物療效相關的等位基因，以更好地指導臨床個體化用藥。目的研究漢族人群帕羅西汀的血藥濃度和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子rs6265的基因多態(tài)性、膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的21個位點的基因多態(tài)性與帕羅西汀臨床療效的相關性。方法2010年10月至2011年9月期間，根據(jù)診斷與統(tǒng)計手冊第四版（DSM-IV）的標準，入組中國漢族MDD患者298名作為研究對象。給予患者鹽酸帕羅西汀片（賽樂特，葛蘭素史克）20mg/天，治療周期6周。用藥前及用藥6周后，對入組患者進行漢密爾頓抑郁17項量表（HAMD-17）評分。于用藥第六周末，計算HAMD減分率，進行療效評定。同時抽取患者外周靜脈血，首先采用高效液相-熒光色譜法（HPLC-FD）測定患者體內(nèi)帕羅西汀血藥濃度，剩余全血采用SequenomMassArray系統(tǒng)進行基因分型。結(jié)果根據(jù)298名MDD患者帕羅西汀血藥濃度數(shù)值，認為帕羅西汀血藥濃度在一定范圍內(nèi)與其療效顯著相關。統(tǒng)計分析得出帕羅西汀的最低有效濃度為50.31ng/ml。入組研究對象使用帕羅西汀治療6周后，根據(jù)HAMD減分率，將298名患者分為有效組219人，無效組79人。在排除血藥濃度對療效影響的條件下，BDNF單核苷酸突變位點rs6265的基因多態(tài)性與帕羅西汀抗抑郁療效顯著相關，其中無效組攜帶G等位基因的頻率要顯著高于有效組（p <0.001），且這種顯著性差異只存在于女性中（p=0.019）。在GDNF的21個單核苷酸突變位點中，發(fā)現(xiàn)2個位點（rs2973049, rs2216711）與帕羅西汀抗抑郁療效顯著相關，其中rs2973049中無效組攜帶A等位基因的頻率要顯著高于有效組（p=0.005），且這種區(qū)別并無性別差異；在rs2216711中無效組攜帶T等位基因的頻率要顯著高于有效組（p=0.006），且這種顯著性差異只存在于女性中（p <0.001）。結(jié)論1.帕羅西汀血藥濃度在一定范圍內(nèi)與其臨床療效顯著相關，其最低有效濃度值為50.31ng/ml。2. BDNF rs6265位點基因型多態(tài)性與帕羅西汀療效顯著相關，攜帶G等位基因的女性患者可能對帕羅西汀臨床應答較低，用藥療效較差。3. GDNF rs2973049位點基因型多態(tài)性與帕羅西汀療效顯著相關，攜帶A等位基因的患者可能對帕羅西汀臨床應答較低，用藥療效較差。4. GDNF rs2216711位點基因型多態(tài)性與帕羅西汀療效顯著相關，攜帶T等位基因的女性患者可能對帕羅西汀臨床應答較低，用藥療效較差。

 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

 

【文章頁數(shù)】：66 頁

 

【學位級別】：碩士

 

文章目錄

英文縮略詞表

摘要

Abstract

1 引言

2 材料與方法

    2.1 實驗試劑

        2.1.1 高效液相色譜試劑

        2.1.2 DNA 提取試劑

        2.1.3 DNA 電泳用試劑

        2.1.4 標準化 DNA 用試劑

        2.1.5 Sequenom MassArray 系統(tǒng)基因分型用試劑

    2.2 實驗儀器

        2.2.1 高效液相色譜器材

        2.2.2 DNA 提取器材

        2.2.3 DNA 電泳器材

        2.2.4 測 OD 值儀器

        2.2.5 Sequenom MassArray 基因分型儀器

    2.3 實驗方法

        2.3.1 研究對象

        2.3.2 帕羅西汀治療

        2.3.3 全血標本采集

        2.3.4 血藥濃度檢測

        2.3.5 基因組 DNA 提取

        2.3.6 基因組 DNA 電泳

        2.3.7 DNA 濃度標化

        2.3.8 Sequenom MassArray 系統(tǒng)基因分型

        2.3.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

3 實驗結(jié)果

    3.1 研究對象的一般臨床特點

    3.2 患者帕羅西汀血藥濃度的相關分析

    3.3 基因分型結(jié)果

    3.4 BDNF 基因型與帕羅西汀療效之間的相關分析

    3.5 GDNF 基因型與帕羅西汀療效之間的相關分析

4 討論

5 結(jié)論

參考文獻

附錄

致謝

綜述

    參考文獻

 

 

參考文獻

 

期刊論文

 

[1]重性抑郁癥首發(fā)未用藥患者的枕葉GABA波譜研究[J]. 宋哲,黃沛鈺,邱麗華,吳杞柱,龔啟勇,張必達,Heberlein Keith,謝鵬.  生物醫(yī)學工程學雜志. 2012(02)

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