本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞共培養(yǎng)法誘導(dǎo)兔脂肪來(lái)源干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 脂肪來(lái)源干細(xì)胞 軟骨細(xì)胞 共培養(yǎng) 誘導(dǎo)分化 兔

【摘要】：目的利用軟骨細(xì)胞與脂肪來(lái)源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)共培養(yǎng),觀察ADSCs是否能向軟骨細(xì)胞定向分化。方法 4月齡健康新西蘭大白兔8只,雌雄不限,體重2.2～2.7 kg,分離、培養(yǎng)兔軟骨細(xì)胞和ADSCs,取第2代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。將實(shí)驗(yàn)分為兩組,實(shí)驗(yàn)組各取將1 mL細(xì)胞密度為2×104個(gè)/mL的軟骨細(xì)胞和ADSCs分別接種至Transwell小室6孔板上、下層共同培養(yǎng),對(duì)照組單獨(dú)培養(yǎng)ADSCs。倒置相差顯微鏡觀察兩組ADSCs形態(tài)變化;培養(yǎng)14 d后行甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)兩組ADSCsⅡ型膠原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA表達(dá)。結(jié)果倒置相差顯微鏡觀察示,隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組ADSCs逐漸變?yōu)檐浌菢蛹?xì)胞形態(tài),呈圓形;對(duì)照組ADSCs仍以梭形為主,呈束狀或漩渦狀生長(zhǎng)。培養(yǎng)14 d,實(shí)驗(yàn)組甲苯胺藍(lán)染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色均為陽(yáng)性;對(duì)照組均為陰性;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)示,實(shí)驗(yàn)組Ⅱ型膠原、蛋白聚糖、SOX9 mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為1.43±0.07、2.13±0.08、1.08±0.08,顯著高于對(duì)照組(0.04±0.03、0.13±0.04、0.10±0.02),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論通過(guò)與軟骨細(xì)胞共同培養(yǎng),ADSCs可定向分化為軟骨細(xì)胞。
【作者單位】： 天津醫(yī)院脊柱外科;天津醫(yī)院骨科研究所細(xì)胞工程室;天津理工大學(xué)機(jī)械工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪來(lái)源干細(xì)胞 軟骨細(xì)胞 共培養(yǎng) 誘導(dǎo)分化 兔
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31000432、11172208) 天津市衛(wèi)生局科技基金重點(diǎn)資助項(xiàng)目(2010KR08) 中國(guó)博士后科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2011M500530、2012T50235)~~
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 軟骨損傷是臨床常見(jiàn)疾病之一,由于軟骨是一種無(wú)神經(jīng)和血管營(yíng)養(yǎng)的組織,自身修復(fù)能力很差[1]。目前常用的修復(fù)方法有微骨折術(shù)、自體或同種異體組織移植等,但存在諸多問(wèn)題,效果不理想[2]。軟骨組織工程為解決這一難題提供了新方法,由于脂肪來(lái)源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells，

本文編號(hào)：885870