HIV-1CN54膜抗原Gp145去糖基化修飾對其免疫效果的影響
本文關鍵詞:HIV-1CN54膜抗原Gp145去糖基化修飾對其免疫效果的影響
【摘要】:目的構建表達Ⅰ型艾滋病病毒(human immunodeficiency virus-1type,HIV-1)CN54膜蛋白Gp145去糖基化突變體的DNA疫苗和重組痘病毒疫苗,并對其進行抗原改造和免疫原性測試。方法采用分子生物學方法構建了表達HIV-1CN54膜蛋白Gp145或其突變體(Gp145dG,去除了V1/V2區(qū)的6個糖基化位點)的DNA疫苗(SV145、SV145dG)和重組痘病毒疫苗(rTTV145、rTTV145dG)。運用DNA初免-重組痘病毒疫苗加強的方式接種雌性BALB/c小鼠,免疫結束后,分別采用IFN-γ酶聯(lián)免疫斑點技術(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)和酶聯(lián)免疫吸附測定技術(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)對Gp145特異性細胞免疫反應和抗體反應進行檢測。結果 SV145初免-rTTV145加強所活化的特異性T細胞反應強度為(1 949±1 307)斑點形成細胞數(shù)(spotforming cells,SFCs)/106個脾淋巴細胞,對數(shù)抗體滴度為(4.020±0.346);SV145dG初免-rTTV145dG加強所活化的特異性T細胞反應強度為(1 192±540)SFCs/106個脾淋巴細胞,對數(shù)抗體滴度為(3.300±0.298)。結論表達HIV-1CN54膜蛋白Gp145的DNA疫苗和重組痘病毒疫苗具有良好的免疫原性,去除V1/V2區(qū)的糖基化位點無助于提高其免疫原性。
【作者單位】: 中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心;上海市(復旦大學附屬)公共衛(wèi)生臨床中心;
【關鍵詞】: HIV- 病毒包膜蛋白質類 疫苗 DNA
【基金】:“十二五”國家重大科技專項(2012ZX10001008,2012ZX10004501-001-006) 國家自然科學基金(81020108030,31100126) 傳染病預防控制國家重點實驗室課題(2012SKLID103,2011SKLID207) 上海市自然科學基金(11ZR1430600)
【分類號】:R392
【正文快照】: 絕大多數(shù)既往成功的疫苗均能誘導有效的保護性抗體反應[1],因而在艾滋病(acquired immune defi-ciency syndrome,AIDS)疫苗研制的初期,焦點首先落在以激發(fā)中和抗體為主的疫苗研究上。在經歷一系列挫折和失敗后[2,3],重點開始逐漸轉向以活化細胞免疫反應為主的T細胞疫苗策略的
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本文編號:877874
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