本文關(guān)鍵詞：人博卡病毒HBoV1非結(jié)構(gòu)蛋白NP1對細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控

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【摘要】：研究人博卡病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NPl對細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控作用及對炎癥細(xì)胞因子TNF-α和IL-6表達(dá)的影響,從而為進(jìn)一步探究病毒非結(jié)構(gòu)蛋白在HBoV1引起機(jī)體炎癥反應(yīng)中的潛在作用及其可能分子機(jī)制提供依據(jù)。通過雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)分析NP1對轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控作用,通過ELISA和熒光定量PCR分別從蛋白質(zhì)和RNA水平檢測NP1是否影響TNF-α、IL-6的表達(dá),最后利用哺乳動物雙雜交系統(tǒng)分析NP1是否通過寡聚化發(fā)揮功能。在293T細(xì)胞中,NP1可分別提高AP-1、STAT3和GAS轉(zhuǎn)錄因子報告載體熒光素酶活性3.69倍、2.45倍和3.03倍,但對NF-κB轉(zhuǎn)錄因子報告載體熒光素酶活性無明顯影響(P0.05)。轉(zhuǎn)染24h和48h后,NP1表達(dá)細(xì)胞和對照細(xì)胞培養(yǎng)基中IL-6和TNF-α蛋白濃度沒有顯著性差異(P0.05),但TNF-αmRNA的表達(dá)水平上調(diào)。哺乳動物雙雜交實(shí)驗表明NP1蛋白自身沒有相互作用。NP1可以調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子AP-1、STAT3和STAT1的活性,但對NF-κB激活沒有影響;NP1對IL-6和TNF-α的細(xì)胞外分泌水平?jīng)]有明顯的影響,但在mRNA水平上對TNF-α的表達(dá)有一定的調(diào)節(jié)作用;NP1蛋白發(fā)揮其調(diào)節(jié)作用的功能不通過自身的二聚化來實(shí)現(xiàn)。
【作者單位】： 華中師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;武漢生物工程學(xué)院生物科學(xué)與技術(shù)系;
【關(guān)鍵詞】： 人博卡病毒 非結(jié)構(gòu)蛋白NP 轉(zhuǎn)錄因子 細(xì)胞因子
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(30670081)
【分類號】：R373
【正文快照】： 人博卡病毒(Human bocavirusl,HBoVl,意譯為“牛犬病毒”w)是通過隨機(jī)PCR擴(kuò)增結(jié)合生物信息學(xué)分析,從下呼吸道感染幼兒樣本中檢測到的一種新細(xì)小病毒[2]。它與細(xì)小病毒B19 M、par-vovirus 4[4]及parvovirus 5[5]是迄今為止發(fā)現(xiàn)與人類疾病有關(guān)的細(xì)小病毒成員。全基因序列分析表

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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