目的:篩選Collapsin反應調節(jié)蛋白2(CRMP2)真核表達質粒轉染大鼠腦皮質的適宜注射部位。方法:成年雄性SD大鼠150只隨機分為空白質粒(VP)組、側腦室(LV)組、海馬(H)組、皮質(C)組及嗅球(OB)組。選定質粒注射部位后,20只大鼠隨機分為假手術(sham)組、缺血再灌注(MCAO)組、缺血再灌注+空白質粒(MCAO+GFP)組、缺血再灌注+CRMP2真核質粒干預(MCAO+CRMP2/GFP)組。大鼠腦缺血/再灌注模型成功后,分別于相應4個部位立體定向注射CRMP2真核表達質粒/空白質粒,轉染后24 h和48 h,采用Western blot及RT-PCR檢測缺血區(qū)皮質CRMP2蛋白及m RNA的表達;激光共聚焦檢測GFP的表達。TTC檢測腦梗死體積,同時行神經(jīng)功能評估。結果:不同部位注射CRMP2真核表達質粒后,皮質CRMP2的表達均有增高,其中LV組及H組的轉染效率明顯高于C組及OB組(P<0.05),LV組與H組之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。與MCAO及(MCAO+GFP)組相比,CRMP2真核質粒干預之后能縮小腦梗死體積,促進神經(jīng)功能恢復(...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2主要試劑與儀器
    1.2 方法
        1.2.1 動物分組
        1.2.2 大鼠大腦中動脈缺血/再灌注模型制備
        1.2.3 腦立體定位注射
        1.2.4 激光共聚焦檢測GFP
        1.2.5 Western blot檢測
        1.2.6 RT-PCR檢測
        1.2.7 腦梗死體積檢測及神經(jīng)功能評估
    1.3 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 質粒轉染效率的觀察
        2.1.1 不同部位注射空白質粒之后CRMP2的表達
        2.1.2 CRMP2真核表達質粒轉染后腦組織中GFP的表達
        2.1.3 缺血側皮質CRMP2的表達對比
    2.2 過表達CRMP2對大鼠腦缺血再灌注后保護作用的觀察
3 討論



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