本文關(guān)鍵詞：小鼠哮喘模型中IL-25和IL-33對氣道結(jié)構(gòu)和功能影響的差異性研究

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【摘要】：目的:白細(xì)胞介素-25(Interleukin-25,IL-25)和白細(xì)胞介素-33(Interleukin-33,IL-33)屬于不同的細(xì)胞因子家族,均能誘導(dǎo)和促進(jìn)Th2型氣道炎癥反應(yīng)。這兩種細(xì)胞因子在哮喘發(fā)生發(fā)展中都起到重要作用,但尚無直接證據(jù)證明兩者作用的差異性。本實(shí)驗(yàn)通過比較IL-25和IL-33誘導(dǎo)的小鼠哮喘樣氣道炎癥反應(yīng)、氣道重塑和氣道高反應(yīng)性等檢測指標(biāo)以明確兩者間的差異。方法:建立周期為70天的慢性哮喘小鼠模型,設(shè)立(1)生理鹽水組(陰性對照組);(2)OVA模型組(陽性對照組);(3)IL-25模型組(實(shí)驗(yàn)組);(4)IL-33模型組(實(shí)驗(yàn)組)。收集小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù);采用蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,過碘酸-希夫(periodic acid-schiff,PAS)染色等方法觀察氣道炎癥細(xì)胞浸潤,黏液分泌等指標(biāo)的變化。收集小鼠BALF上清,并制作肺組織勻漿,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測上述樣品中Ⅱ型輔助性T細(xì)胞(T helper cell type 2,Th2)細(xì)胞因子產(chǎn)生水平以及可溶性膠原纖維含量。免疫組化法觀察氣道平滑肌肥大、增生和新生血管形成情況,行激發(fā)試驗(yàn)評估小鼠氣道高反應(yīng)性。并且采用流式細(xì)胞術(shù)檢測肺組織、BALF、縱膈淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、脾臟、骨髓和胸腺中固有淋巴樣2型細(xì)胞(type 2 innate lymphoid cell,ILC2)的表達(dá)。結(jié)果:1.IL-25和IL-33模型組小鼠BALF中炎癥細(xì)胞總數(shù)和分類計(jì)數(shù):IL-25組小鼠BALF中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)在36 d達(dá)到高峰后,迅速降低;IL-33組小鼠BALF中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)在36 d達(dá)到高峰后,可持續(xù)至54 d,停止給藥后細(xì)胞數(shù)才緩慢降低。2.IL-25和IL-33模型組對小鼠肺組織病理學(xué)的改變:實(shí)驗(yàn)24~70 d,IL-33組小鼠肺泡壁、肺泡腔、支氣管壁及伴行血管周圍有大量炎性細(xì)胞特別是嗜酸性粒細(xì)胞浸潤;支氣管粘膜皺襞增多、延長,管腔內(nèi)存有大量黏液性痰栓;氣道粘液腺增生,粘蛋白染色成強(qiáng)陽性反應(yīng),其炎癥改變較IL-25組小鼠更加持久。3.IL-25和IL-33模型組細(xì)胞因子和Ig E的表達(dá):IL-25和IL-33單獨(dú)滴鼻給藥,均可引起小鼠肺組織勻漿中Th2型細(xì)胞因子及嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子含量增加,但I(xiàn)L-33的作用更加顯著及持久。同時(shí),IL-25和IL-33都不能增加小鼠血清中Ig E的表達(dá)水平。4.IL-25和IL-33在小鼠肺組織氣道重塑中的作用:實(shí)驗(yàn)第48~70 d,IL-25組和IL-33組小鼠肺組織膠原沉積明顯,氣道平滑肌肥大、增生顯著,氣道黏膜下新生血管形成明顯,較生理鹽水組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但是,在實(shí)驗(yàn)第70 d,IL-33組小鼠肺組織膠原沉積和血管形成程度都顯著高于IL-25組。5.IL-25和IL-33對小鼠氣道高反應(yīng)性的影響:IL-25組和IL-33組小鼠接受乙酰甲膽堿激發(fā)后,表現(xiàn)出顯著的氣道高反應(yīng)性。但是,與IL-25相比,IL-33誘導(dǎo)的小鼠氣道組織阻力的增加更加持久。6.IL-25和IL-33對小鼠不同組織器官中ILC2細(xì)胞的影響:IL-25直接滴鼻和IL-33直接滴鼻都可以誘導(dǎo)小鼠肺組織、BALF、縱膈淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)、脾臟、骨髓中ILC2細(xì)胞數(shù)目增加,但I(xiàn)L-33滴鼻還可以誘導(dǎo)胸腺組織中ILC2細(xì)胞數(shù)目的增加,且IL-33的作用更加明顯且持久。結(jié)論:IL-25和IL-33單獨(dú)滴鼻都可以引起過敏原非依賴的小鼠氣道炎癥、氣道重塑和氣道高反應(yīng)性以及多組織器官ILC2細(xì)胞的增多,但I(xiàn)L-33以低于IL-25 20倍的劑量即可引起相似的改變,且其作用更加明顯而持久。因此,深入研究IL-25和IL-33在哮喘發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制尤為重要,兩者作為哮喘干預(yù)治療靶標(biāo)的探索實(shí)驗(yàn)尚需進(jìn)一步開展。
【關(guān)鍵詞】：哮喘 IL-25 IL-33 氣道炎癥 氣道重塑
【學(xué)位授予單位】：首都醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R562.25;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-15
• 材料與方法15-33
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-63
• 討論63-69
• 結(jié)論69-70
• 參考文獻(xiàn)70-77
• 文獻(xiàn)綜述77-99
• 參考文獻(xiàn)90-99
• 附錄：英文縮寫詞表99-102
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況102-107
• 致謝107-109
• 個(gè)人簡歷109-110

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1 李勝梅;沈朝斌;陸磊;夏尤佳;謝匡成;;小鼠哮喘模型肺部白介素17和白介素6的表達(dá)[J];臨床兒科雜志;2011年09期

2 梁成結(jié),陳江華,劉金保,羅燦嶠;建立豚鼠哮喘模型的一種新方法[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2005年03期

3 李良昌;李宜丹;金東洙;;血管內(nèi)皮生長因子受體抑制劑對哮喘模型小鼠的抗肺部炎癥作用[J];延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào);2008年03期

4 王桂蘭;魯繼榮;;逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染對哮喘模型炎癥機(jī)制的抑制作用[J];中國科學(xué)(C輯:生命科學(xué));2009年03期

5 林敏娟;劉曉妍;馬洪明;劉升明;;小鼠哮喘模型頸靜脈-結(jié)狀神經(jīng)節(jié)內(nèi)參基因的篩選[J];中國臨床解剖學(xué)雜志;2012年04期

6 杜捷夫,崔德健,田東華,郭英江,呂國平;哮喘患者和哮喘模型血漿及肺組織中一氧化氮的研究[J];中華內(nèi)科雜志;1997年12期

7 杜云鵬;動物哮喘模型的DNA反義治療[J];國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊);1997年04期

8 金美玲,蔡映云,任濤,鄭玲潔;草分支桿菌疫苗治療哮喘模型小鼠的實(shí)驗(yàn)研究[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年06期

9 許淑云;徐永健;張珍祥;倪望;陳士新;;核因子κB在蛋白激酶C誘導(dǎo)哮喘模型大鼠氣道平滑肌細(xì)胞增殖中的作用[J];中國病理生理雜志;2007年11期

10 姜洪芳;白雪;王佳賀;;吸煙與戒煙對哮喘模型大鼠的影響[J];中國老年學(xué)雜志;2012年22期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃華瓊;王嬌莉;沈華浩;;不同致敏和激發(fā)時(shí)間對哮喘模型的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第11屆全國內(nèi)科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

2 黃華瓊;王嬌莉;沈華浩;;不同致敏和激發(fā)時(shí)間對哮喘模型的影響[A];華東地區(qū)第6屆中青年呼吸醫(yī)師論壇暨浙江省第29屆呼吸疾病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2007年

3 李靜;李玉琴;;哮喘模型嗜酸粒細(xì)胞趨化因子及受體的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

4 范欣生;童黃錦;王露;顧鵬程;許惠琴;;一種病毒性哮喘模型方法的建立及評價(jià)[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會中藥實(shí)驗(yàn)藥理分會第七屆學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2007年

5 張英蘭;吳銀根;;咳喘落對小鼠哮喘模型嗜酸細(xì)胞凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];第三屆海峽兩岸中西醫(yī)結(jié)合學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

6 蔣萍;鄭洪;戴嗣宏;;重組人血管內(nèi)皮抑制素對小鼠哮喘模型氣道重建的影響[A];第四屆中國中西醫(yī)結(jié)合變態(tài)反應(yīng)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

7 劉暢;劉先勝;徐永健;趙建平;楊丹蕾;熊維寧;謝敏;;ERK信號通道在慢性哮喘模型大鼠肺泡巨噬細(xì)胞凋亡中的調(diào)控作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第七屆全國哮喘學(xué)術(shù)會議暨中國哮喘聯(lián)盟第三次大會論文匯編[C];2010年

8 李文嘉;趙海金;董航明;宋甲富;;活性維生素D對甲苯二異氰酸酯哮喘模型氣道屏障功能的影響及機(jī)制探討[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

9 蘇斌哠;倪殿濤;;肺表面活性物質(zhì)對小鼠哮喘模型樹突細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國呼吸病學(xué)術(shù)會議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

10 鄧昱;劉恩梅;;IL-12+重組卡介苗新生期接種調(diào)節(jié)小鼠Th17/Th1平衡對實(shí)驗(yàn)性哮喘模型的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國兒科學(xué)術(shù)大會論文匯編（上冊）[C];2010年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 李艷;小鼠哮喘模型中IL-25和IL-33對氣道結(jié)構(gòu)和功能影響的差異性研究[D];首都醫(yī)科大學(xué);2016年

2 馬建新;1，25-二羥維生素D_3聯(lián)合特異性免疫療法對小鼠哮喘模型的作用及其機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 王桂蘭;IL-4RA基因轉(zhuǎn)染阻止了哮喘模型的炎癥發(fā)展[D];吉林大學(xué);2006年

4 李英;咳喘寧對病毒誘發(fā)哮喘模型大鼠STAT6蛋白及其mRNA表達(dá)的影響[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2012年

5 鄧昱;IL-12~+重組卡介苗新生期接種干預(yù)實(shí)驗(yàn)性哮喘模型的作用及其機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

6 胡作為;止哮平喘方對哮喘豚鼠T淋巴細(xì)胞免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2002年

7 楊君莉;口服Lal對正常新生鼠、成年鼠脾臟Th1/Th2平衡及誘導(dǎo)哮喘模型的影響[D];山東大學(xué);2011年

8 盧珊;Th17細(xì)胞及IL-17A在哮喘模型小鼠氣道血管重塑中的作用及其機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2015年

9 金華良;若干補(bǔ)腎與益氣中藥對大鼠哮喘模型的作用與機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

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1 張艷蕊;三拗湯對哮喘模型大鼠氣道重塑過程中TGF-β1及NGF指標(biāo)的影響[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2015年

2 魏s，

本文編號：812860