本文關(guān)鍵詞：HJB-1對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化及小鼠急性肺損傷的抗炎保護(hù)機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： HJB-1 LPS 巨噬細(xì)胞 細(xì)胞因子 信號通路 炎癥 急性肺損傷

【摘要】：炎癥是機(jī)體抵抗有害刺激而作出的保護(hù)性應(yīng)答和修復(fù)損傷組織的過程。適當(dāng)?shù)难装Y應(yīng)答對于機(jī)體抵御病原微生物的入侵和修復(fù)損傷是有利的，但是當(dāng)炎癥應(yīng)答過于強(qiáng)烈時則會導(dǎo)致組織損傷和疾病。巨噬細(xì)胞釋放促炎或具有細(xì)胞毒性的細(xì)胞因子、生物活性脂類、生長因子、水解酶等來調(diào)節(jié)細(xì)胞做出相關(guān)應(yīng)答。脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌外壁的重要的組成部分，在與細(xì)胞表面的CD-14分子和Toll樣受體4以及MD-2等分子相互作用下，活化單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞。進(jìn)而導(dǎo)致第二信使和相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路啟動。其中包括NF-κB信號通路和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路。 狼毒，在中醫(yī)中被用于治療癌癥、水腫、腹水病已有相當(dāng)長的歷史。植物化學(xué)的研究已經(jīng)證明，狼毒包含二萜類化合物、三萜類化合物等。其中包括三種二萜類化合物JA、JB和17-OH-JB（HJB）。近期研究顯示，JA、JB和HJB具有良好的抗腫瘤活性，對多種腫瘤細(xì)胞系都有良好的抗腫瘤活性，比如惡性間葉腫瘤180（Sarcoma180）、小鼠艾麗西腹水癌（Ehrlich ascites carcinoma in mice）。一些體外研究進(jìn)一步的顯示JB和HJB誘導(dǎo)人類白細(xì)胞系HL-60（Humanpromyelocytic leukemia cell line）、K562（Human breast carcinoma cell line）、MCF-7（Michigan Cancer Foundation-7）凋亡。Uto等人發(fā)現(xiàn)JB、HJB及HJA具有一定抗炎作用，HJB抗炎活性較另外兩者強(qiáng)，通過化學(xué)結(jié)構(gòu)差異分析，發(fā)現(xiàn)JB類化合物中17位碳原子的羥基基團(tuán)能顯著增強(qiáng)抗炎作用，說明對化合物進(jìn)行化學(xué)修飾有可以增強(qiáng)其抗炎作用。 本研究旨在探究HJB的衍生物HJB-1在LPS刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞和LPS誘發(fā)的ALI的抗炎作用。 在本研究中，通過化學(xué)修飾HJB17位碳原子中的羥基得到HJB的兩個衍生物HJB-1和HJB-2。在LPS誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞炎癥模型中，HJB-1能更有效的抑制LPS誘導(dǎo)的TNF-α的釋放。同樣HJB-1能以濃度依賴的方式減少LPS誘導(dǎo)的TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2及iNOS的mRNA表達(dá)，，但不改變具有抗炎作用的IL-10的mRNA的水平。此外還能抑制LPS誘導(dǎo)的NF-κB和MAPK激酶的活化。 急性肺損傷（ALI）是一種具有很高致死率的烈性炎癥性肺部疾病。ALI的典型特征為肺組織強(qiáng)烈的炎癥應(yīng)答，包括彌漫性肺泡損傷、上皮屏障破壞、肺泡壁組織損傷、肺水腫以及中性粒細(xì)胞浸潤，進(jìn)而導(dǎo)致大量促炎細(xì)胞因子的釋放，包括腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）。目前對ALI的治療策略主要是包括防護(hù)肺部換氣和保守療法。盡管針對ALI的發(fā)病機(jī)制及治療手段已經(jīng)進(jìn)行了大量研究，但ALI的死亡率仍居高不下。因此迫切需要探索創(chuàng)新療法和有效藥物。 用LPS鼻腔滴注的方法建立雄性C57BL小鼠ALI模型。在滴注LPS前1小時給予劑量為10mg/kg和2mg/kg體重的HJB-1，之后采集肺泡灌洗液和肺組織樣本。HJB-1預(yù)處理組肺濕干重比下降，顯示HJB-1能減輕LPS誘發(fā)的肺水腫。同時HJB-1顯著減少ALI小鼠肺泡灌洗液中的白細(xì)胞總量和總蛋白量，并且HJB-1還明顯抑制LPS引起的ALI小鼠肺組織樣本髓過氧化物酶（MPO）活性增加。HJB-1能抑制LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞等天然免疫細(xì)胞分泌大量細(xì)胞因子，包括TNF-α、 IL-1β和IL-6。肺組織切片結(jié)果顯示，HJB-1抑制LPS誘導(dǎo)的肺泡壁變薄、肺出血和白細(xì)胞浸潤。此外，肺組織研磨液的Western blot結(jié)果顯示HJB-1能有效地阻斷肺組織中由LPS誘導(dǎo)的MAPKs和NF-κB信號通路的活化。以上結(jié)果表明HJB-1能通過抑制NF-κB活化和MAPK的磷酸化起到抗炎效果，同時提示修改HJB的17碳原子上的羥基可以增強(qiáng)HJB系列化合物的抗炎作用。此外HJB-1能抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠ALI中的MAPK和NF-κB信號通路，從而減少組織損傷和控制炎癥發(fā)展，有望從傳統(tǒng)中草藥中開發(fā)一種新的治療ALI的藥物。
【關(guān)鍵詞】：HJB-1 LPS 巨噬細(xì)胞 細(xì)胞因子 信號通路 炎癥 急性肺損傷
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R563
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 縮略詞表9-12
• 引言12-13
• 第一篇綜述13-27
• 第1章 炎癥相關(guān)信號通路的研究進(jìn)展13-17
• 1.1 炎癥簡介13
• 1.2 模式識別受體13-14
• 1.3 MAPK 信號通路14-15
• 1.4 NF-κB 信號通路15
• 1.5 JAK-STAT 信號通路15-17
• 第2章 抗炎藥物的開發(fā)17-22
• 2.1 傳統(tǒng)抗炎藥物作用機(jī)制與不足17-18
• 2.2 激酶抑制劑類抗炎藥物的開發(fā)進(jìn)展18-22
• 第3章 急性肺損傷的研究進(jìn)展22-27
• 3.1 急性肺損傷簡介22
• 3.2 巨噬細(xì)胞在 ALI 中的作用22-23
• 3.3 中性粒細(xì)胞在 ALI 中的作用23-24
• 3.4 血小板在 ALI 中的作用24-25
• 3.5 氣體分子在 ALI 中的作用25
• 3.6 ALI 中的炎癥調(diào)節(jié)因子和信號通路25-27
• 第二篇 研究內(nèi)容27-60
• 第1章 HJB-1 抑制 LPS 誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞炎癥27-44
• 1 材料27-29
• 2 方法29-35
• 3 結(jié)果35-41
• 4 討論41-42
• 5 小結(jié)42-44
• 第2章 HJB-1 抗 LPS 誘導(dǎo)的小鼠 ALI 損傷的研究44-60
• 1 材料44
• 2 方法44-47
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-57
• 4 討論57-59
• 5 小結(jié)59-60
• 結(jié)論60-61
• 參考文獻(xiàn)61-70
• 導(dǎo)師簡介70-71
• 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果71-72
• 致謝72

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王學(xué)勤,陳華,王磊;非甾體類抗炎藥的重要進(jìn)展——2型環(huán)氧酶選擇性抑制劑[J];國外醫(yī)藥(抗生素分冊);2002年01期

本文編號：716271