兩種脫細(xì)胞方法制備組織工程氣管基質(zhì)的比較
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【摘要】:背景:完整的新鮮氣管脫細(xì)胞處理后,能夠獲取與原生組織結(jié)構(gòu)和生物學(xué)性能相似的組織工程基質(zhì),尋找有效的脫細(xì)胞方法是目前組織工程研究的重點(diǎn)之一。目的:比較化學(xué)萃取法、去污劑聯(lián)合酶法制備兔組織工程氣管基質(zhì)的差異,遴選出較理想的脫細(xì)胞方法。方法:切取30只新西蘭兔氣管,隨機(jī)分3組處理,對照組不進(jìn)行任何處理,化學(xué)萃取法組采用2%Triton X-100聯(lián)合脫氧核糖核酸酶Ⅰ和核糖核酸酶進(jìn)行脫細(xì)胞處理,去污劑聯(lián)合酶法組采用脫氧膽酸鈉聯(lián)合脫氧核糖核酸酶Ⅰ進(jìn)行脫細(xì)胞處理。將3組樣本進(jìn)行蘇木精-伊紅染色、Masson三色染色、番紅O染色及DAPI染色及掃描電鏡觀察。結(jié)果與結(jié)論:1蘇木精-伊紅染色:與對照組相比,化學(xué)萃取法組、去污劑聯(lián)合酶法組氣管脫細(xì)胞處理后黏膜上皮細(xì)胞成分基本被除去,殘留部分軟骨細(xì)胞;2Masson三色染色:與對照組相比,化學(xué)萃取法組、去污劑聯(lián)合酶法組黏膜層核物質(zhì)被完全除去,僅在軟骨區(qū)殘留部分軟骨細(xì)胞;3番紅O染色:與對照組相比,化學(xué)萃取法組、去污劑聯(lián)合酶法組糖胺聚糖含量有輕微下降,化學(xué)萃取法組下降更為明顯;4DAPI染色:化學(xué)萃取法組、去污劑聯(lián)合酶法組僅在致密軟骨層及腔隙中殘留少量軟骨細(xì)胞;5掃描電鏡:去污劑聯(lián)合酶法組上皮細(xì)胞被完全去除,基底膜結(jié)構(gòu)相對較完整;化學(xué)萃取法組上皮細(xì)胞也被完全去除,但基底膜結(jié)構(gòu)相對不完整;6結(jié)果表明:去污劑聯(lián)合酶法脫細(xì)胞效果較佳,對基質(zhì)破壞小。
【作者單位】: 揚(yáng)州大學(xué)醫(yī)學(xué)院胸外科;
【關(guān)鍵詞】: 細(xì)胞外基質(zhì) 氣管 組織工程 組織構(gòu)建 脫細(xì)胞 兔 國家自然科學(xué)基金
【基金】:國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81170014,81370118) 江蘇省大學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃(201511117033Z) 揚(yáng)州大學(xué)“高端人才支持計(jì)劃”項(xiàng)目(201431)~~
【分類號】:R318.08;R56
【正文快照】: 0引言Introduction 氣管病變可以由一系列的因素引起,包括損傷、感染、創(chuàng)傷、腫瘤等[1]。切除病變氣管并進(jìn)行端端吻合是治療氣管損傷的經(jīng)典手術(shù)方式,然而當(dāng)氣管切除長度超過兒童1/3或成人的1/2時(shí),則無法進(jìn)行手術(shù)端端吻合,需行氣管替代治療[2-3]。理想的氣管替代物應(yīng)具有與天
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,本文編號:708810
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