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肺癆康對(duì)耐異煙胼肺結(jié)核小鼠TLR2、TLR4、IL2及miRNA-155表達(dá)的影響及作用機(jī)制初探

發(fā)布時(shí)間:2017-08-18 21:30

  本文關(guān)鍵詞:肺癆康對(duì)耐異煙胼肺結(jié)核小鼠TLR2、TLR4、IL2及miRNA-155表達(dá)的影響及作用機(jī)制初探


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【摘要】:目的:考察中藥肺癆康對(duì)耐異煙肼肺結(jié)核小鼠受體蛋白、細(xì)胞因子及miRNA表達(dá)的影響,初步探討肺癆康治療耐異煙肼肺結(jié)核的免疫-炎癥機(jī)制。方法:本研究采用小鼠尾靜脈注射法建立耐異煙肼肺結(jié)核動(dòng)物模型,隨機(jī)分為耐異煙肼組(模型組)、異煙肼組、肺癆康組及異煙肼聯(lián)合肺癆康組,分別給予生理鹽水、異煙肼、肺癆康、異煙肼聯(lián)合肺癆康灌胃治療56天;另設(shè)空白對(duì)照組,給予生理鹽水灌胃。①比較小鼠一般體征及體重變化,造模4周后取小鼠肺臟組織進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng);治療結(jié)束后肉眼及光鏡下觀察小鼠肺、肝、脾三臟組織病理變化。②免疫組化方法,檢測各組小鼠肺組織中TLR2、TLR4、IL2的含量。③ 實(shí)時(shí)定量PCR檢測法,測定各組小鼠肺組織中miRNA-155的表達(dá)水平。結(jié)果:①與空白組比較,模型組小鼠體重變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),肺臟細(xì)菌培養(yǎng)可見明顯菌落生長;與模型組比較,肺癆康及異煙肼聯(lián)合肺癆康治療可改善感染結(jié)核小鼠的皮毛、精神狀況及進(jìn)食等一般狀態(tài),使小鼠的體重正常增長(P0.05),使小鼠肺、肝、脾臟炎癥顯著減輕(P0.05)。②與空白組比較,模型組TLR2、TLR4含量明顯升高(P0.05),IL2明顯降低(P0.05);與模型組比較,肺癆康及異煙肼聯(lián)合肺癆康治療對(duì)TLR2、TLR4的高表達(dá)有顯著下調(diào)作用(P0.05),且能顯著升高IL2的含量(P0.05)。③與空白組比較,模型組miRNA-155的表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05);與模型組比較,肺癆康及異煙肼聯(lián)合肺癆康治療可明顯抑制高表達(dá)的miRNA-155 (P<0.05)。結(jié)論:①從造模后動(dòng)物的一般體征、客觀指標(biāo)及模型的穩(wěn)定性等方面進(jìn)行判斷分析,采用小鼠尾靜脈注射法建立肺結(jié)核小鼠模型是成功的。②肺癆康治療耐異煙肼肺結(jié)核模型小鼠,能顯著改善小鼠的一般體征及組織病變,減輕肺、肝、脾臟炎癥反應(yīng),抑制TLR2、TLR4蛋白及miRNA-155基因的高表達(dá),同時(shí)顯著升高細(xì)胞因子IL-2的表達(dá)。③耐異煙肼結(jié)核分枝桿菌感染動(dòng)物后可引起TLR2、TLR4及miRNA-155表達(dá)的顯著上調(diào),肺癆康對(duì)耐異煙肼肺結(jié)核的治療作用機(jī)制可能是通過抑制TLR2、TLR4及 miRNA-155的高表達(dá),阻斷相關(guān)炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活及相關(guān)炎癥基因的表達(dá),減弱了由它們介導(dǎo)的炎性因子的釋放,同時(shí)促進(jìn)T細(xì)胞生長因子IL-2的分泌,增強(qiáng)機(jī)體免疫力,從而抑制炎癥反應(yīng),減輕組織病理損傷,起到免疫抗感染的作用。
【關(guān)鍵詞】:肺癆康 耐異煙肼肺結(jié)核 炎癥反應(yīng) 免疫力
【學(xué)位授予單位】:成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R521
【目錄】:
  • 中文摘要2-4
  • 英文摘要4-6
  • 英文縮略詞表6-11
  • 引言11-14
  • 實(shí)驗(yàn)研究14-31
  • 一 肺結(jié)核小鼠模型的建立14-20
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料14-15
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物14
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)菌株14
  • 1.3 主要試劑14
  • 1.4 主要儀器與設(shè)備14
  • 1.5 實(shí)驗(yàn)場地14-15
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法15
  • 2.1 造模菌株的制備15
  • 2.2 造模方法15
  • 3 檢測指標(biāo)15-17
  • 3.1 模型小鼠一般體征15
  • 3.2 模型小鼠肺、肝、脾臟形態(tài)改變15-16
  • 3.2.1 肉眼下小鼠肺、肝、脾形態(tài)的觀察15
  • 3.2.2 光鏡下小鼠肺、肝、脾形態(tài)的觀察15-16
  • 3.3 肺臟結(jié)核菌培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)16-17
  • 3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法17
  • 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-19
  • 4.1 模型小鼠體征的改變17-18
  • 4.1.1 一般狀態(tài)的改變17
  • 4.1.2 體重的變化17-18
  • 4.2 模型小鼠肺、肝、脾臟形態(tài)改變18-19
  • 4.2.1 肉眼下小鼠肺、肝、脾形態(tài)的觀察18
  • 4.2.2 光鏡下小鼠肺、肝、脾形態(tài)的觀察18-19
  • 4.3 肺臟菌落計(jì)數(shù)結(jié)果19
  • 5 小結(jié)19-20
  • 二 肺癆康對(duì)耐異煙肼肺結(jié)核模型小鼠TRL2、TRL4、IL2及miRNA-155表達(dá)的影響及作用機(jī)制初探20-31
  • 1 實(shí)驗(yàn)材料20-21
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物20
  • 1.2 主要藥材與試劑20-21
  • 1.2.1 治療用藥20
  • 1.2.2 主要試劑20-21
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備21
  • 1.4 實(shí)驗(yàn)場地21
  • 2 實(shí)驗(yàn)方法21-22
  • 2.1 肺結(jié)核小鼠模型制備及分組21-22
  • 2.2 藥物治療22
  • 3 檢測指標(biāo)及方法22-26
  • 3.1 模型小鼠一般體征22
  • 3.2 模型小鼠肺、肝、脾的形態(tài)觀察22
  • 3.2.1 肉眼下小鼠肺、肝、脾形態(tài)的觀察22
  • 3.2.2 光鏡下肺、肝、脾病理形態(tài)的觀察22
  • 3.3 模型小鼠肺組織TLR2、TLR4、IL2的測定22-24
  • 3.3.1 標(biāo)本準(zhǔn)備22
  • 3.3.2 標(biāo)本檢測22-23
  • 3.3.3 結(jié)果判定23-24
  • 3.4 模型小鼠肺組織miRNA-155的測定24-26
  • 3.4.1 標(biāo)本準(zhǔn)備24
  • 3.4.2 標(biāo)本檢測24-26
  • 3.5 統(tǒng)計(jì)分析26
  • 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-31
  • 4.1 模型小鼠體征的改變26-28
  • 4.1.1 一般狀態(tài)的改變26-27
  • 4.1.2 體重的變化27-28
  • 4.2 模型小鼠肺、肝、脾臟形態(tài)改變28-29
  • 4.2.1 肉眼下小鼠肺、肝、脾形態(tài)的觀察28
  • 4.2.2 光鏡下小鼠肺、肝、脾形態(tài)的觀察28-29
  • 4.3 模型小鼠肺組織TLR2、TLR4、IL2的變化29-30
  • 4.4 模型小鼠肺組織miRNA-155的變化30-31
  • 討論31-46
  • 1 耐藥肺結(jié)核研究及治療概要31-36
  • 1.1 西醫(yī)對(duì)耐藥肺結(jié)核的研究與治療31-33
  • 1.1.1 西醫(yī)對(duì)肺結(jié)核病因及發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)31-32
  • 1.1.2 西醫(yī)對(duì)耐藥肺結(jié)核的認(rèn)識(shí)32-33
  • 1.1.2.1 耐藥結(jié)核病產(chǎn)生的原因32
  • 1.1.2.2 耐異煙肼結(jié)核產(chǎn)生的機(jī)制32-33
  • 1.1.3 西醫(yī)對(duì)耐藥肺結(jié)核的治療33
  • 1.2 中醫(yī)對(duì)肺結(jié)核的研究與治療33-36
  • 1.2.1 中醫(yī)對(duì)肺結(jié)核病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)33-34
  • 1.2.2 中醫(yī)對(duì)肺結(jié)核的治療34-36
  • 2 肺癆康的來源、組方結(jié)構(gòu)及立方依據(jù)36-39
  • 2.1 肺癆康的來源及組成36
  • 2.2 肺癆康的立方依據(jù)及配伍意義36-39
  • 2.2.1 肺癆康用藥分析36-38
  • 2.2.2 肺癆康立方依據(jù)及配伍意義38-39
  • 3 肺結(jié)核小鼠模型評(píng)價(jià)及肺癆康對(duì)耐異煙肼肺結(jié)核小鼠的治療作用39
  • 3.1 肺結(jié)核小鼠動(dòng)物模型的評(píng)價(jià)39
  • 3.2 肺癆康對(duì)耐異煙肼肺結(jié)核模型小鼠的治療作用39
  • 4 肺癆康治療耐異煙肼肺結(jié)核的作用機(jī)制初探39-45
  • 4.1 肺癆康對(duì)模型小鼠肺組織TLR2、TLR4、IL2的影響42-44
  • 4.2 肺癆康對(duì)模型小鼠肺組織miRNA-155的影響44-45
  • 5 肺癆康對(duì)耐異煙肼肺結(jié)核小鼠抗炎作用機(jī)制初探小結(jié)45-46
  • 結(jié)論46-47
  • 問題與展望47-48
  • 致謝48-49
  • 參考文獻(xiàn)49-54
  • 附件1:附圖54-59
  • 附件2:文獻(xiàn)綜述59-64
  • 參考文獻(xiàn)62-64
  • 附件3:在讀期間公開發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專著及科研成果64-65

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳曦,馬s,

本文編號(hào):696910


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