磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白參與煙草提取物誘導(dǎo)的Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞凋亡
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【摘要】:目的研究磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PLTP)在煙草提取物對大鼠Ⅱ型肺泡上皮凋亡中的作用。方法體外培養(yǎng)大鼠肺泡上皮RLE-6TN細(xì)胞株24 h,分別加入0.5%,1.0%和2.0%煙草提取物共培養(yǎng)24 h或48 h;委托上海吉瑪公司合成siRNA-PLTP,并將siRNA-PLTP轉(zhuǎn)染入RLE-6TN中,下調(diào)PLTP的表達(dá)后,觀察煙草煙霧對RLE-6TN細(xì)胞凋亡的影響。Hochest染色后觀察細(xì)胞核的形態(tài)學(xué)改變;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率;蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測PLTP的表達(dá)量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性。結(jié)果經(jīng)不同濃度的(0.5%,1.0%,2.0%)煙草提取物作用后,細(xì)胞早期凋亡率由(1.68±0.098)%增加至(18.663±0.964)%(P0.001);Hoechst染色可見部分凋亡細(xì)胞,核發(fā)白、固縮、染色質(zhì)邊集等現(xiàn)象;PLTP的表達(dá)和caspase-3的活性增加;將PLTP敲降后,可部分逆轉(zhuǎn)煙草提取物誘導(dǎo)的RLE-6TN細(xì)胞中caspase-3的活性的增加(P0.05)。結(jié)論 PLTP參與煙草提取物誘導(dǎo)大鼠肺泡上皮細(xì)胞的凋亡。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸科;重慶醫(yī)科大學(xué)藥物高校工程研究中心;
【關(guān)鍵詞】: 煙草提取物 大鼠肺泡上皮細(xì)胞 凋亡 磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年基金(81200009) 重慶市衛(wèi)生局中醫(yī)藥研究課題(ZY20132165)~~
【分類號】:R563
【正文快照】: 煙草煙霧化學(xué)成分復(fù)雜,目前已發(fā)現(xiàn)煙草煙霧中含有7000余種化學(xué)成分[1],其中包括大量的自由基[2]。當(dāng)吸入煙草煙霧時(shí),大量的自由基可導(dǎo)致機(jī)體中氧化劑和抗氧化劑失衡,發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng),可直接損傷呼吸道和肺泡上皮細(xì)胞,在煙草煙霧導(dǎo)致的肺損傷中,如慢性阻塞性肺部,慢支炎,肺氣
【共引文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 趙師岳;;轉(zhuǎn)化生長因子β_1與高血壓關(guān)系研究進(jìn)展[J];中國醫(yī)藥科學(xué);2015年09期
中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條
1 史可云;IL31與特發(fā)性肺纖維化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究[D];江蘇大學(xué);2014年
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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條
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本文編號:692547
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