本文關(guān)鍵詞：維生素D、LL-37和細(xì)胞因子在糖尿病合并肺結(jié)核患者的水平研究

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【摘要】：研究背景 中國是一個肺結(jié)核高負(fù)擔(dān)的國家,肺結(jié)核發(fā)病率在世界排名第二,僅次于印度。肺結(jié)核具有傳染性,當(dāng)人吸入含有結(jié)核分枝桿菌的微滴就可能感染結(jié)核菌。糖尿病患者免疫力低下,更容易感染結(jié)核菌。糖尿病的發(fā)病率逐年升高,2011年中日友好醫(yī)院楊文英教授的流行病學(xué)調(diào)查指出糖尿病的患病率是9.7%,糖尿病前期的患病率為15.5%。糖尿病增加肺結(jié)核的防控難度,糖尿病中肺結(jié)核的患病率約占10%-15%,較正常人群高3-6倍,糖尿病合并肺結(jié)核需要引起重視。目前糖尿病和肺結(jié)核的雙向篩查還沒有相關(guān)結(jié)果發(fā)布。糖尿病和肺結(jié)核這兩種共存的疾病都和免疫系統(tǒng)相關(guān),闡明糖尿病合并肺結(jié)核患者的免疫狀況非常必要。 維生素D是一種調(diào)節(jié)鈣磷代謝的激素前體,現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)活性維生素D具有免疫調(diào)節(jié)作用。活性維生素D通過與免疫細(xì)胞的受體結(jié)合改變免疫細(xì)胞的表型和功能,抑制過激的免疫反應(yīng)�；钚跃S生素D與其受體結(jié)合后還可以產(chǎn)生LL-37(人內(nèi)源性抗菌肽),LL-37具有清除結(jié)核菌的能力。目前沒有關(guān)于糖尿病合并肺結(jié)核患者體內(nèi)維生素D和LL-37水平的研究,闡明此問題將對維生素D在糖尿病合并肺結(jié)核患者的輔助治療提供理論依據(jù)。 T細(xì)胞免疫在肺結(jié)核的發(fā)病機(jī)制中占有重要的地位,T細(xì)胞包括多個T細(xì)胞亞群,產(chǎn)生多種細(xì)胞因子,組成復(fù)雜而功能強(qiáng)大的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。細(xì)胞因子的免疫調(diào)控對于預(yù)防和治療結(jié)核病具有重要意義。它們在糖尿病合并肺結(jié)核患者中以何種水平存在,如何相互影響,尚不清楚。闡明細(xì)胞因子在這一特殊感染人群的水平將對糖尿病合并肺結(jié)核患者的免疫治療提供理論基礎(chǔ)。 本研究采用準(zhǔn)確先進(jìn)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定血清25羥維生素D3的水平,反映體內(nèi)維生素D的狀態(tài)；應(yīng)用固相酶聯(lián)免疫吸附法測定血漿LL-37的水平；通過流式細(xì)胞儀測定一系列細(xì)胞因子的水平,旨在明確糖尿病合并肺結(jié)核患者這一特殊人群維生素D,LL-37和細(xì)胞因子的水平,闡明上述因素對糖尿病合并肺結(jié)核疾病的影響和相互關(guān)系,為將來糖尿病合并肺結(jié)核的防治提供理論依據(jù)。 第一部分 維生素D、LL-37在糖尿病合并肺結(jié)核患者的水平研究 目的 1.明確糖尿病合并肺結(jié)核患者體內(nèi)維生素D和LL-37的水平。 2.闡明糖尿病合并肺結(jié)核患者的臨床特點(diǎn)。 3.討論維生素D和LL-37對糖尿病合并肺結(jié)核疾病的影響。 方法 1.研究對象選自山東省胸科醫(yī)院的住院患者和院內(nèi)健康的工作人員,分為三組：正常對照組(normal control, NC),肺結(jié)核組(pulmonary tuberculosis, PTB)和糖尿病合并肺結(jié)核組(diabetes mellitus with pulmonary tuberculosis, DMPTB)。NC組：健康的院內(nèi)工作人員30例；PTB組：初治肺結(jié)核患者30例；DMPTB組：初治糖尿病合并肺結(jié)核患者30例。 2.采集研究對象的血清和血漿標(biāo)本,應(yīng)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定血清25羥維生素D3水平；應(yīng)用固相酶聯(lián)免疫吸附法測定血漿LL-37的水平；同時(shí)進(jìn)行空腹血糖(FBG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血常規(guī)、免疫功能、PPD試驗(yàn)、痰抗酸桿菌涂片,痰結(jié)核菌培養(yǎng)和胸部CT等檢查。數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS14.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析：采用方差分析進(jìn)行組間比較,Pearson相關(guān)分析進(jìn)行相關(guān)性分析。 結(jié)果 1.研究對象血清25羥維生素D3和血漿LL-37的水平 1)血清25羥維生素D3:DMPTB組(11.36±4.85ng/ml)及PTB組(12.04±6.08ng/ml)明顯低于NC組(17.49±7.50ng/ml)(P0.01)。DMPTB組和PTB組兩者之間差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2)血漿LL-37:DMPTB組(57.52±34.17ng/ml)和PTB組(44.53±16.88ng/ml)明顯高于NC組(32.20±10.14ng/ml)(P0.01)。DMPTB組和PTB組兩者之間差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2.研究對象的臨床特點(diǎn) 1)空腹血糖、HbAlc和中性粒細(xì)胞的水平 DMPTB組的FBG、HbA1c(%).中性粒細(xì)胞(11.05±3.62mmol/L;8.63±2.35;5.48±2.60*109/L)明顯高于PTB組(4.80±0.54mmol/L;5.25±0.27;4.77±2.52*109/L)和NC組(4.73±0.55mmol/L;5.28±0.29；4.06±0.99*109/L)(P0.05)。PTB組和NC組的FBG、HbA1c和中性粒細(xì)胞的水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P0.05)。 2)PPD試驗(yàn)直徑、免疫功能CD4+T細(xì)胞的水平 NC組PPD試驗(yàn)直徑(11.17±5.78cm)明顯低于PTB組(17.98±5.98cm)和DMPTB組(16.33±4.76cm)(P0.05)。CD4+T細(xì)胞比例(%)在PTB組(35.86±8.07)和DMPTB組(35.16±8.85)兩組的水平明顯低于NC組(48.55±1.61)(P0.05)。PTB組和DMPTB組兩組之間的PPD試驗(yàn)直徑、CD4+T細(xì)胞比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P0.05)。 3.PTB組和DMPTB組痰和影像學(xué)結(jié)果 DMPTB組的痰抗酸桿菌涂片陽性率(15/30,50%),痰結(jié)核菌培養(yǎng)陽性率(18/30,60%),胸部CT空洞的發(fā)生率(19/30,63.3%)明顯高于PTB組(7/30,23.3%；9/30,30%；6/30,20%)(P0.05)。 4.相關(guān)分析 FBG與HbA1c(r=0.84,P=0.000),與LL-37(r=0.304,P=0.004)呈正相關(guān)關(guān)系。 CD4+T細(xì)胞比例與25羥維生素D3呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.246,P=0.020)；與HbA1c, LL-37呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.229, P=0.030;r=-0.495, P=0.000)。PPD試驗(yàn)直徑與LL-37具有正相關(guān)關(guān)系(r=0.262,P=0.013)。 結(jié)論 1.糖尿病合并肺結(jié)核患者具有較高的中性粒細(xì)胞和LL-37水平,較低的CD4+T細(xì)胞比例,容易排菌和產(chǎn)生空洞。 2.糖尿病合并肺結(jié)核患者存在維生素D缺乏,提示補(bǔ)充維生素D可能有益。 3.LL-37可作為結(jié)核病的生物標(biāo)記物。 第二部分 細(xì)胞因子在糖尿病合并肺結(jié)核患者的水平研究 目的 1.闡明糖尿病合并肺結(jié)核患者一系列T細(xì)胞因子的水平。 2.分析多個細(xì)胞因子對糖尿病合并肺結(jié)核疾病的影響。 方法 研究對象、標(biāo)本采集和統(tǒng)計(jì)分析同第一部分,應(yīng)用流式細(xì)胞儀測定血清中一系列T細(xì)胞因子的水平。 結(jié)果 1.Th1細(xì)胞因子(IFN-γ, IL-2和IL-12)水平 1) DMPTB組和PTB組的血清IFN-γ水平(17.43±29.90pg/ml;12.23±11.18pg/ml)明顯高于NC組(2.09±4.66pg/ml)(P0.05)。DMPTB組和PTB組的血清IFN-y水平差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2) DMPTB組的血清IL-2水平(62.18±52.15pg/ml)明顯高于PTB組(36.81±35.56pg/ml)和NC組(27.07±32.52pg/ml)(P0.05), PTB;組和NC組的血清IL-2水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P0.05)。 3)NC組、PTB組和DMPTB組三組之間的血清IL-12p70水平(4.09±5.99pg/ml;6.67±8.61pg/ml;8.29±13.41pg/ml)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 2.Th2細(xì)胞因子(IL-4, IL-5, IL-10和IL-13)水平 1)血清IL-4, IL-10和IL-13水平在DMPTB組(58.18±58.96pg/ml;11.39±11.53pg/ml;49.56±63.31pg/ml)及PTB組(38.37±28.98pg/ml;9.03±6.36pg/ml;31.49±22.45pg/ml)明顯高于NC組(14.72±18.86pg/ml;5.05±5.77pg/ml;15.77±19.21pg/ml)(P0.05)。DMPTB組和PTB組兩組之間的IL-4, IL-10和IL-13的水平?jīng)]有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P0.05)。 2)NC組,PTB組和DMPTB三組之間的血清IL-5水平(5.47±6.86pg/ml;9.96±10.19pg/ml;9.57±12.67pg/ml)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 3. Th9,Th17和Th22(IL-9, IL-17A和IL-22)細(xì)胞因子水平 1)血清IL-9和IL-17A水平在DMPTB組(12.42±24.00pg/ml;42.24±67.70pg/ml)及PTB組(6.30±11.03pg/ml;31.56±19.07pg/ml)明顯高于NC組(0.68±0.64pg/ml;9.33±8.15pg/ml)(P0.05)。DMPTB組和PTB組兩組之間的IL-9, IL-17A水平差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2)NC組血清IL-22的水平(677.01±538.24pg/ml)明顯高于PTB組(391.33±264.66pg/ml)及DMPTB組(407.23±345.98pg/ml)(P0.01)。PTB和DMPTB兩組之間的血清IL-22的水平差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.前炎癥細(xì)胞因子(IL-1β,IL-6和TNF-α)水平 1)血清TNF-α的水平在DMPTB組(13.49±20.28pg/ml)及PTB組(11.51±10.95pg/ml)明顯高于NC組(1.69±3.12pg/ml)(P0.05)。DMPTB組和PTB組兩組之間TNF-a水平差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2) DMPTB組的血清IL-6水平最高(53.12±98.50pg/ml), PTB組其次(5.16±4.03pg/ml), NC組最低(1.36±2.33pg/ml),兩兩比較差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3)NC組,PTB組和DMPTB組三組之間的血清IL-1p水平(3.75±7.23pg/ml;11.07±11.45pg/ml;28.81±85.96pg/ml)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 5.相關(guān)分析 1)臨床特征與細(xì)胞因子的相關(guān)關(guān)系 正相關(guān)關(guān)系 CD4+T細(xì)胞比例與IL-22呈正相關(guān)(r=0.217,P=0.040)。 HbAlc與IL-4,IL-6,IL-13,IL-17A,IFN-γ呈正相關(guān)(r=0.398,P=0.040；r=0.237,P=0.024;r=0.320,P=0.002;r=0.274,P=0.009;r=0.311,P=0.003)。 PPD與IL-4,IL-10和IL-17A呈正相關(guān)(]=0.222,P=0.036;r=0.213,P=0.044;r=0.210,P=0.047)。 負(fù)相關(guān)關(guān)系 25羥維生素D3與IL-13呈負(fù)相關(guān)(r=-0.234,P=0.027)。 2)細(xì)胞因子之間的相關(guān)關(guān)系 IFN-y與IL-4,IL-9和IL-17A呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.641,P=0.000；r=0.301,P=0.004；r=0.796,P=0.000)。 IL-4與IL-9.IL-17A呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.246,P=0.019;r=0.608, P=0.000)。 IL-9與IL-6呈正相關(guān)(r=0.215,P=0.042)。 IL-10與IL-2,IL-13,TNF-a呈正相關(guān)(r=0.248,P=0.018;r=0.238,P=0.024;r=0.420,P=0.000)。 結(jié)論 1. Th1、Th2、Th9、Th17、Th22細(xì)胞因子和前炎癥細(xì)胞因子參與肺結(jié)核的發(fā)生和發(fā)展。 2.IL-9和IL-17可作為結(jié)核病診斷新的血清學(xué)標(biāo)志物。 3.IL-2和IL-6是鑒別糖尿病肺結(jié)核和非糖尿病肺結(jié)核的重要細(xì)胞因子。 4.糖尿病合并肺結(jié)核后Thl與Th2細(xì)胞因子增強(qiáng),Th1細(xì)胞因子的代償不足以阻止肺結(jié)核的發(fā)生。 5.維生素D缺乏和血糖控制不佳導(dǎo)致Th2細(xì)胞因子增強(qiáng),CD4+T細(xì)胞比例降低,保護(hù)性細(xì)胞因子IL-22水平下降。 6.IL-22將來可能成為一個新的抗結(jié)核輔助治療方式。 課題的創(chuàng)新性及意義 1.在國內(nèi)外首次觀察糖尿病合并肺結(jié)核患者維生素D、LL-37的水平。 2.糖尿病肺結(jié)核患者的維生素D測定采用準(zhǔn)確先進(jìn)的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法。 3.在國內(nèi)外首次應(yīng)用流式細(xì)胞儀闡明糖尿病合并肺結(jié)核患者一系列T輔助細(xì)胞因子的水平。 4.在國內(nèi)外首次研究糖尿病合并肺結(jié)核患者維生素D、LL-37與T細(xì)胞因子免疫的關(guān)系,為維生素D將來應(yīng)用于糖尿病合并肺結(jié)核患者這一特殊人群的輔助治療提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病 肺結(jié)核 維生素D 抗菌肽 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R587.1;R521
【目錄】：

• 中文摘要6-12
• 課題的創(chuàng)新性及意義12-13
• ABSTRACT13-20
• 符號說明20-22
• 第一部分 維生素D、LL-37在糖尿病合并肺結(jié)核患者的水平研究22-42
• 前言22-23
• 材料與方法23-29
• 結(jié)果29-35
• 討論35-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 第二部分 細(xì)胞因子在糖尿病合并肺結(jié)核患者的水平研究42-66
• 前言42-43
• 材料與方法43-46
• 結(jié)果46-54
• 討論54-59
• 參考文獻(xiàn)59-66
• 綜述66-76
• 參考文獻(xiàn)70-76
• 致謝76-77
• 攻讀博士期間發(fā)表論文77-78
• 英文論文178-92
• 英文論文292-106
• 學(xué)位論文評閱及答辯情況表106

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 石一寧;增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變中炎前細(xì)胞因子的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1998年

2 牛忠英;三種細(xì)胞因子對牙周膜纖維細(xì)胞功能和基因調(diào)節(jié)作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1991年

3 羊繼平;腎移植供受者細(xì)胞因子及細(xì)胞因子受體基因多態(tài)性對近期移植效果的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年

4 陳剛;人TH2細(xì)胞因子對異種血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

5 夏紅天;細(xì)胞因子與肝癌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長的臨床研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

6 陳力航;IL-18,IL-33對Th1,Th2細(xì)胞因子的表達(dá)調(diào)控在原發(fā)免疫性血小板減少癥發(fā)病中的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

7 楊紀(jì)華;SCLC外周血免疫相關(guān)細(xì)胞因子與療效和預(yù)后的關(guān)系[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

8 楊艷;廣西地區(qū)人群細(xì)胞因子基因多態(tài)性分析及其與肝細(xì)胞癌易感性的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

9 汪健;手術(shù)創(chuàng)傷后炎性細(xì)胞因子和細(xì)胞反應(yīng)的臨床和基礎(chǔ)研究[D];蘇州大學(xué);2001年

10 郭濤;幽門螺桿菌及其相關(guān)細(xì)胞因子對胃上皮細(xì)胞增殖/凋亡和離體壁細(xì)胞酸分泌的調(diào)節(jié)及機(jī)制初探[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2004年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蔡文博;Th1和Th2型細(xì)胞因子在不同MHC-B單倍型雞群中的表達(dá)分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

2 徐軍;神經(jīng)節(jié)苷脂致敏兔后其抗體及細(xì)胞因子的動態(tài)變化[D];青島大學(xué);2005年

3 陳勇華;Th1型細(xì)胞因子TNF-α/Th2型細(xì)胞因子IL-10與妊高征相關(guān)性的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2002年

4 申萬永;特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化的臨床診治狀況回顧及相關(guān)細(xì)胞因子分子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2004年

5 楊欣;肺癌患者外周血Th1、Th2細(xì)胞因子及NKG2D表達(dá)的臨床意義[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

6 楊占軍;溫腎補(bǔ)陽法對鼻鼽Th1/Th2細(xì)胞因子調(diào)控機(jī)理的臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2005年

7 劉婷;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外擴(kuò)增研究及其分泌細(xì)胞因子的高通量篩查[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2012年

8 曹利佳;輔助性T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子在兒童急性免疫性血小板減少性紫癜中的變化及意義[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2013年

9 夏紅飛;妊娠過程中IL-表達(dá)的變化及Th1型細(xì)胞因子對其表達(dá)的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

10 曹蕾;助孕3號方對自然流產(chǎn)Th1/Th2型細(xì)胞因子、P、NO干預(yù)的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2007年

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本文編號：682128