本文關(guān)鍵詞：沙眼衣原體質(zhì)粒在呼吸道感染中的作用及其機(jī)制初步研究

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【摘要】：第一部分沙眼衣原體質(zhì)粒缺陷菌株感染人呼吸道上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)特性分析目的:分析沙眼衣原體質(zhì)粒缺陷菌株感染人呼吸道上皮細(xì)胞的形態(tài)及生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)。方法:用流行的人生殖道沙眼衣原體血清型D野生菌株(wild type,WT)及其相應(yīng)的質(zhì)粒缺陷菌株(plasmid-free,PF)建立人肺支氣管上皮BEAS-2B細(xì)胞感染模型,分別測(cè)定各衣原體菌株具有感染性的子代原體的動(dòng)態(tài)變化、繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn),用間接免疫熒光觀(guān)察不同感染時(shí)間點(diǎn)包涵體形態(tài)。結(jié)果:間接免疫熒光結(jié)果顯示,有質(zhì)粒株較無(wú)質(zhì)粒株的包涵體形態(tài)更大。生長(zhǎng)曲線(xiàn)結(jié)果顯示不同菌株的生長(zhǎng)趨勢(shì)一致,但有質(zhì)粒菌株產(chǎn)生和釋放衣原體子代感染性顆粒更多。結(jié)論:有無(wú)質(zhì)粒衣原體菌株在呼吸道上皮的生長(zhǎng)狀況不同,提示衣原體質(zhì)粒直接介導(dǎo)宿主細(xì)胞-沙眼衣原體相互作用,對(duì)衣原體子代感染性顆粒的釋放和感染傳播有作用。第二部分沙眼衣原體質(zhì)粒在新生鼠肺炎中的作用目的:模擬垂直傳播導(dǎo)致的呼吸道感染,構(gòu)建沙眼衣原體新生鼠肺炎模型并探討衣原體質(zhì)粒對(duì)致病力的影響。方法:將出生24h內(nèi)的48只BALB/c新生鼠隨機(jī)分成4組,每組12只,WT組感染有質(zhì)粒的沙眼衣原體血清型D野生菌株,PF組感染同型無(wú)質(zhì)粒菌株,磷酸鹽緩沖液(PBS)組予相同劑量PBS處理,正常組無(wú)處理。于4、7、11d各處死4只取標(biāo)本,逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)肺組織內(nèi)omp A基因m RNA水平;肺組織蘇木素-伊紅(HE)染色及病理評(píng)分;髓過(guò)氧化物酶(MPO)免疫組化染色分析肺中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)情況;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)TNF-α及IFN-γ。報(bào)告基因分泌型胚胎堿性磷酸酶(SEAP)實(shí)驗(yàn)體外檢測(cè)TLR2、NF-κB激活。結(jié)果:感染后肺組織衣原體培養(yǎng)陰性,而omp A基因m RNA檢測(cè)及MPO免疫組化染色陽(yáng)性,證實(shí)WT及PF菌株皆可感染新生鼠肺,引起間質(zhì)性改變伴中性粒細(xì)胞浸潤(rùn),PF組的肺組織病理評(píng)分(1.10±0.19)及PMN計(jì)數(shù)(21.06±10.92)均低于WT組(分別為1.44±0.17和43.90±17.17),P值分別為0.048和0.005;ELISA示W(wǎng)T組新生鼠肺內(nèi)TNF-α(623.35±37.23)和IFN-γ(2206.83±854.22)水平較對(duì)照組(分別為470.93±20.83和737.97±79.89)升高(P值分別為0.000和0.038),而PF組(分別為531.59±34.14和1099.86±427.39)與對(duì)照組比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P值均0.05);SEAP實(shí)驗(yàn)顯示,PF株可激活TLR2信號(hào)(F=483.199,P=0.000),但程度較WT組有下降(P=0.000),激活NF-κB的能力明顯受限(F=229.884,P=1.000),與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:沙眼衣原體質(zhì)粒缺乏使其感染肺部的致病力減弱,可能與衣原體質(zhì)粒潛在的致病因子影響TLR2及NF-κB的活化有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：沙眼衣原體 隱匿質(zhì)粒 上皮細(xì)胞 沙眼衣原體 肺炎 隱匿質(zhì)粒 新生鼠
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R56
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照4-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-16
• 參考文獻(xiàn)14-16
• 第一部分 沙眼衣原體質(zhì)粒缺陷菌株感染人呼吸道上皮細(xì)胞的特性分析16-27
• 前言16-17
• 1 材料與方法17-19
• 2 結(jié)果19-22
• 3 討論22-24
• 參考文獻(xiàn)24-27
• 第二部分 沙眼衣原體質(zhì)粒在新生鼠肺炎中作用的初步研究27-41
• 前言27-28
• 1 材料和方法28-33
• 2 結(jié)果33-37
• 3 討論37-39
• 參考文獻(xiàn)39-41
• 全文總結(jié)41-42
• 文獻(xiàn)綜述42-49
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 致謝49-50
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄50

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本文編號(hào)：678304