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氧合血常溫體外持續(xù)灌注對供肺保存效果的動物實驗研究

發(fā)布時間:2017-07-18 08:15

  本文關(guān)鍵詞:氧合血常溫體外持續(xù)灌注對供肺保存效果的動物實驗研究


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【摘要】:目的 研究不使用呼吸機、氧合血常溫經(jīng)肺動脈持續(xù)灌注對離體豬肺的保護作用,并探討肺缺血再灌注損傷與細胞凋亡的相關(guān)性。為臨床較長時間保存供肺并可長途運輸提供實驗依據(jù)。方法采用健康純種的廣西巴馬小香豬24只,隨機分為兩組,分別制備雙肺離體溫血灌注模型和冷缺血模型,即:實驗組(不使用呼吸機、氧合血常溫經(jīng)肺動脈持續(xù)灌注8h保存供肺,n=12)和對照組(Celsior液經(jīng)肺動脈灌注后于4℃深低溫保存供肺8h,n=12。供肺保存8h后行左肺移植手術(shù),術(shù)后機械通氣24h。檢測肺含水量、左下肺靜脈血氧分壓(LIPV-PCO2)、肺通氣阻力(LR)等指標評估肺功能;HE染色光鏡下觀察行肺組織水腫分‘級并計數(shù)肺泡細胞死亡率,評估肺組織損傷程度。通過TUNEL法結(jié)合透射電鏡觀察來闡述肺泡細胞凋亡水平、凋亡的肺泡細胞類型及凋亡趨勢;結(jié)果1.肺功能檢測:術(shù)后各時間點比較,實驗組肺含水量、LR顯著低于對照組,LIPV-PCO2顯著高于對照組(P0.05),實驗組肺功能顯著優(yōu)于對照組;實驗組術(shù)后24h肺含水量、LR反而顯著低于術(shù)后12h,LIPV-PCO2顯著高于術(shù)后12h(P0.05);2.HE染色觀察:實驗組各時間點肺組織損傷較對照組輕;對照組肺組織損傷術(shù)后24h最為嚴重,70%-80%肺泡腔出現(xiàn)不同程度水腫或出血,甚至大片間質(zhì)出血、壞死。實驗組于術(shù)后12h最為嚴重,20-30%肺泡腔出現(xiàn)水腫液,局部肺泡腔及肺間質(zhì)出血,且于12h后有好轉(zhuǎn)趨勢。肺泡細胞死亡率:實驗組各時間點顯著低于對照組(P0.05);對照組肺泡細胞死亡率逐漸增加,術(shù)后24h達32.7±4.6%;實驗組術(shù)后肺泡細胞死亡率于術(shù)后12h達最高15.8±2.1%。3. Tunel檢測:實驗組肺泡細胞凋亡率各時間點顯著低于對照組(P0.05),實驗組術(shù)后6h達最高為8.2±1.5%,術(shù)后24h肺泡細胞凋亡率顯著低于術(shù)后6h(P0.05);術(shù)后24h內(nèi)肺泡細胞凋亡率與肺含水量、LR呈正顯著相關(guān)(r分別為0.890、0.918,P0.05),與LIPV-PCO2呈負顯著相關(guān)(r為-0.784,P0.05);4.透射電鏡觀察:凋亡肺泡細胞以AECⅡ為主,約占80%。實驗組各時間肺泡細胞凋亡水平低于對照組,且凋亡上升趨勢更早得到控制。結(jié)論:1.氧合血常溫經(jīng)肺動脈持續(xù)灌注供肺保存方式能有效減輕LIRI,使豬肺移植術(shù)后肺功能得到改善,其供肺保存效果明顯優(yōu)于“低溫靜態(tài)保存”方式。2.肺移植術(shù)后早期(24h內(nèi)),肺泡細胞凋亡率與LIRI有著顯著的相關(guān)性,凋亡水平越高,LIRI損傷程度越嚴重。且凋亡主要肺泡細胞類型為AECⅡ。3.溫血灌注保存方式可能通過降低肺泡細胞凋亡水平,減少LIRI,起到供肺的保護作用。
【關(guān)鍵詞】:肺移植 供肺保護 氧合血 體外灌注 肺損傷 細胞凋亡
【學位授予單位】:廣西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R563
【目錄】:
  • 中英文縮略詞5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-11
  • 前言11-14
  • 研究對象和方法14-21
  • 技術(shù)路線14
  • 1.實驗動物及主要材料14-16
  • 2.實驗方法16-21
  • 實驗結(jié)果21-35
  • 1.移植后肺功能檢測21-23
  • 2.豬供肺組織HE染色觀察23-28
  • 3.Tunel染色結(jié)果28-30
  • 4.透射電鏡結(jié)果30-33
  • 5.肺泡細胞凋亡水平和肺功能相關(guān)性分析33-35
  • 討論35-42
  • 結(jié)論42-43
  • 參考文獻43-47
  • 附圖47-48
  • 綜述48-55
  • 綜述參考文獻52-55
  • 致謝55

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本文編號:556766

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