本文關(guān)鍵詞：NLRP3炎癥復(fù)合體在呼吸機(jī)相關(guān)性肺損傷中的作用機(jī)制研究

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【摘要】：目的：探討NLRP3炎癥復(fù)合體在呼吸機(jī)相關(guān)性肺損傷中的作用及其機(jī)制。方法：36只清潔級雄性SD大鼠分為3組,每組12只：對照組A組、正常潮氣量組N組、大潮氣量組H組,分組采用隨機(jī)數(shù)字表法。所有大鼠均行氣管切開插管術(shù),A組大鼠保持自主呼吸,N、H兩組分別行潮氣量為8mL/kg和40 mL/kg的機(jī)械通氣。4h后行頸動脈放血處死大鼠,收集BALF、血清和肺組織標(biāo)本。測定三組大鼠肺組織濕/干比重；分別使用光學(xué)顯微鏡和透射電鏡觀察肺組織的病理學(xué)改變和肺泡巨噬細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變；使用ELISA測定BALF中總蛋白含量、BALF和血清中IL-1β、IL-18含量；分別使用RT-PCR和Western Blot檢測大鼠肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、caspase-1和NF-κ B的mRNA及蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：鏡下觀察結(jié)果顯示,A組和N組肺組織及肺泡巨噬細(xì)胞的結(jié)構(gòu)基本正常,而H組有明顯的炎癥性改變。與A組和N組比較,H組肺組織W/D比值明顯升高(9.20±0.69比5.32±0.82、5.70±0.94,均P0.05),BALF中總蛋白、IL-1 β、IL-18的含量明顯升高[總蛋白(g/L)：2.53±0.38比1.92±0.23、1.98±0.24,IL-1 β(ng/L)：135.96±5.40比80.88±2.77、83.14±5.09,IL-18(μg/L)：4.68±0.45比2.95±0.54、3.51±0.46,均P0.05),血清中IL-1β、IL-18含量也明顯升高[IL-1β(ng/L)：107.10±9.06比67.33±8.08、74.36±12.02,IL-18(μg/L)：2.29±0.93比1.32±0.25、1.45±0.18,均P0.05)。H組肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、caspase-1和NF-κ B的mRNA及蛋白表達(dá)水平較對照組A組和N組均明顯升高,H組上述指標(biāo)的mRNA表達(dá)分別是對照組A組的(13.35±2.30)、(9.04±1.92)、(8.43±2.18)、(9.65±1.88)倍,蛋白表達(dá)分別是對照組A組的(1.37±0.71)、(1.25±0.08)、(1.35±0.16)、(1.66±0.19)倍,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；而N組各指標(biāo)與對照組A組比較均輕微升高,但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：NLRP3炎癥復(fù)合體參與了大潮氣量機(jī)械通氣所致的大鼠急性肺損傷。
【關(guān)鍵詞】：呼吸機(jī)相關(guān)性肺損傷 肺泡巨噬細(xì)胞 NLRP3炎癥復(fù)合體 炎癥細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R563
【目錄】：

• 個人簡歷3-7
• 主要英文及縮略詞表7-8
• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-16
• 一、實(shí)驗(yàn)材料16-18
• 1、動物來源16
• 2、主要試劑16-17
• 3、主要儀器17-18
• 二、實(shí)驗(yàn)方法18-43
• 1、實(shí)驗(yàn)分組及動物模型建立18
• 2、納入實(shí)驗(yàn)大鼠標(biāo)準(zhǔn)18-19
• 3、標(biāo)本采集和處理19-20
• 4、大鼠肺泡巨噬細(xì)胞分離提取及鑒定20-22
• 5、肺組織濕干比重(W/D)檢測22
• 6、HE染色觀察肺組織大體形態(tài)22-24
• 7、透射電鏡觀察肺泡超微結(jié)構(gòu)24-25
• 8、血清和BALF中總蛋白含量的檢測25-26
• 9、血清和BALF中IL-1β和IL-18的檢測26-31
• 10、肺泡巨噬細(xì)胞中總RNA的提取31-32
• 11、肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、caspase-1和NF-κB mRNA的檢測32-38
• 12、肺泡巨噬細(xì)胞總蛋白的提取和濃度檢測38
• 13、肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、caspase-1和NF-κB蛋白檢測38-42
• 14、統(tǒng)計學(xué)處理42-43
• 三、結(jié)果43-51
• 1、各組肺組織濕干比重的比較43-44
• 2、各組肺組織的大體形態(tài)44
• 3、電鏡下肺泡巨噬細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)44
• 4、肺泡巨噬細(xì)胞檢測44-47
• 5、血清和BALF中總蛋白濃度47
• 6、血清和BALF中IL-1β和IL-18的表達(dá)47-48
• 7、肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、caspase-1和NF-κB mRNA的表達(dá)48-49
• 8、肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、caspase-1和NF-κB蛋白的表達(dá)49-51
• 四、討論51-55
• 五、結(jié)論55
• 參考文獻(xiàn)55-65
• 綜述65-77
• 參考文獻(xiàn)70-77
• 致謝77-79
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文79

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