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CTLA4Ig修飾的樹突狀細(xì)胞對(duì)哮喘小鼠氣道炎癥及Th失衡的干預(yù)作用的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2025-03-19 01:22
  第一部分小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞的改良培養(yǎng) 目的:運(yùn)用改良方法,簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)地從小鼠骨髓誘導(dǎo)和擴(kuò)增得到大量高純度樹突狀細(xì)胞(DCs)。 方法:梯度密度離心法從小鼠骨髓分離得到單個(gè)核細(xì)胞,低密度接種骨髓單個(gè)核細(xì)胞于24孔板,加入含rmGM-CSF 10 ng/ml和rmIL-4 5 ng/ml的RPMI1640全培養(yǎng)基培養(yǎng)6~8 d,LPS刺激成熟。光鏡、掃描電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)、流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞特異性表面標(biāo)志、單向混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)鑒定細(xì)胞刺激同種異體淋巴細(xì)胞的能力、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-12釋放水平。 結(jié)果:每只小鼠骨髓約可得到2×10~7個(gè)DCs,細(xì)胞呈典型的樹突狀突起,高表達(dá)特異性表面標(biāo)志物CD11c(90.01 %),高表達(dá)MHCⅡ類分子、CD86、CD80、CD40及CCR7,具有較強(qiáng)的促進(jìn)T細(xì)胞增殖功能與釋放IL-12能力。 結(jié)論:方法改良后可簡(jiǎn)單從小鼠骨髓獲得高純度、具有功能的樹突狀細(xì)胞。 第二部分CTLA4Ig修飾的樹突狀細(xì)胞體外對(duì)Th亞群分化的影響 目的:探討細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4免疫...

【文章頁(yè)數(shù)】:131 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
符號(hào)說(shuō)明
中文摘要
英文摘要
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞的改良培養(yǎng)
    前言
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    5 參考文獻(xiàn)
第二部分 CTLA4Ig 修飾的樹突狀細(xì)胞體外對(duì) Th 亞群分 化的影響
    前言
     第一節(jié) pAdCTLA4 Ig 在 HEK293 細(xì)胞里的包裝與擴(kuò)增
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
    第二節(jié) DC-CTAL4Ig 制備及體外對(duì) Th 分化的影響
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
    討論
    小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三部分 激發(fā)階段回輸DC-CTAL4 Ig 對(duì)哮喘小鼠氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性及Th平衡的影響
    前言
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    5 參考文獻(xiàn)
第四部分 致敏階段回輸DC-CTAL4 Ig 對(duì)哮喘小鼠氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性及Th平衡的影響
    前言
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 小結(jié)
    5 參考文獻(xiàn)
全文小結(jié)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):4036475

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