目的建立“大腸腑實(shí)證”由腸及肺動(dòng)物模型并探索大鼠腸淋巴液引流的操作技術(shù)；分別觀察模型組大鼠與假手術(shù)組大鼠腸淋巴液成分的差別；探討腸-淋巴途徑在大腸腑實(shí)證大鼠急性肺損傷(acute lung injury, ALI)中的作用及其可能的分子機(jī)制Toll樣受體4(toll like receptor-4, TLR-4)信號(hào)通路。 方法建立并熟練掌握大鼠腸淋巴液引流的方法。選用Wistar大鼠20只,隨機(jī)分為模型組和假手術(shù)組；取大鼠肺組織與末端回腸組織,行病理學(xué)觀察,并于電鏡下觀察肺組織Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞及腸組織上皮細(xì)胞緊密連接結(jié)構(gòu)。采用原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling, TUNEL)檢測(cè)肺組織與末端回腸組織細(xì)胞凋亡程度。同時(shí)分別引流各組大鼠的腸系膜淋巴液,進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類；檢測(cè)淋巴液中內(nèi)毒素水平,堿性磷酸酶(alkline phosphatase, AKP)、乳酸脫氫酶(1actate dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶(creatine kinase, CK)、谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶(Glutathione S Tra...

【文章頁(yè)數(shù)】：114 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
目錄
符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、大腸腑實(shí)證”由腸及肺動(dòng)物模型的建立
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.3 方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 一般情況觀察
        1.2.2 基礎(chǔ)指標(biāo)檢測(cè)
        1.2.3 大鼠肺、回腸組織的形態(tài)學(xué)觀察
        1.2.4 腸粘膜上皮細(xì)胞與肺組織細(xì)胞凋亡
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、大鼠腸系膜淋巴管引流技術(shù)及腸系膜淋巴液成分分析
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 腸系膜淋巴管淋巴液引流的成功率
        2.2.2 淋巴液細(xì)胞成分及白細(xì)胞比例檢測(cè)
        2.2.3 淋巴液中內(nèi)毒素水平
        2.2.4 淋巴液中酶類指標(biāo)
        2.2.5 淋巴液中蛋白含量及細(xì)胞因子水平變化
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、腸淋巴途徑在大腸腑實(shí)證早期所致肺損傷中的作用
    (一) 腸系膜淋巴管引流對(duì)大腸腑實(shí)證大鼠肺損傷的影響
        3.1 對(duì)象和方法
            3.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            3.1.2 模型制備和分組
            3.1.3 血、肺泡灌洗液(BALF)及組織取材
            3.1.4 回腸末端MPO與DAO活性測(cè)定
            3.1.5 肺血管通透性檢測(cè)
            3.1.6 肺組織MPO活性
            3.1.7 BALF中白細(xì)胞比例
            3.1.8 血漿中及肺泡灌洗液中內(nèi)毒素檢測(cè)
            3.1.9 蛋白含量及細(xì)胞因子檢測(cè)
            3.1.10 肺組織與回腸組織HE染色
            3.1.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
        3.2 結(jié)果
            3.2.1 腸淋巴管引流對(duì)大鼠末端回腸組織DAO及MPO活性的影響
            3.2.2 肺血管通透性變化及肺組織MPO活性改變
            3.2.3 BALF中白細(xì)胞比例變化
            3.2.4 血漿及肺泡灌洗液中內(nèi)毒素水平
            3.2.5 蛋白含量及細(xì)胞因子濃度
            3.2.6 病理學(xué)改變
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
    (二) 靜脈回輸大腸腑實(shí)證大鼠腸淋巴液引起肺損傷
        3.5 對(duì)象和方法
            3.5.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.5.2 實(shí)驗(yàn)方法
            3.5.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        3.6 結(jié)果
            3.6.1 肺組織W/D的測(cè)定
            3.6.2 髓過(guò)氧化物酶(MPO)測(cè)定
            3.6.3 肺組織勻漿中TNF-a及IL-6水平
            3.6.4 肺組織病理學(xué)變化
        3.7 討論
        3.8 小結(jié)
四、TLR-4信號(hào)通路在大腸腑實(shí)證大鼠腸淋巴途徑中的作用機(jī)制研究
    4.1 對(duì)象和方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 試劑及藥品
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型制備
        4.1.5 Western-blot方法檢測(cè)TLR-4、IRAK-4、NF-κB蛋白表達(dá)
        4.1.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 腸組織TLR-4、NF-κB、IRAK-4蛋白的表達(dá)動(dòng)態(tài)變化
        4.2.2 肺組織TLR-4、NF-κB、IRAK-4蛋白的表達(dá)動(dòng)態(tài)變化
        4.2.3 模型組肺組織與回腸組織TLR-4蛋白表達(dá)水平與淋巴液中內(nèi)毒素水平變化相關(guān)性分析
        4.2.4 模型組肺組織與回腸組織TLR-4蛋白表達(dá)水平與淋巴液中內(nèi)毒素水平變化相關(guān)性分析
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述
    綜述一 腸淋巴系統(tǒng)：導(dǎo)致器官損傷的因素
        參考文獻(xiàn)
    綜述二 重癥腹部外科感染與肺損傷
        參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：4025135