目的:急性肺損傷(acute lung injury,ALI)是一種發(fā)病率和死亡率較高的疾病,其特征之一是嚴(yán)重的肺水腫,位于肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(alveolar typeⅡepithelial cells,ATⅡ)頂膜側(cè)的上皮鈉通道(epithelail sodium channels,ENaC)對(duì)完成肺泡腔內(nèi)鈉水轉(zhuǎn)運(yùn)和水腫液清除至關(guān)重要。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有調(diào)節(jié)組織損傷的免疫反應(yīng)并促進(jìn)體內(nèi)修復(fù)的能力,并已被建議作用于多種肺疾病(其中包括ALI),MSCs能夠釋放多種細(xì)胞因子和生長因子,外泌體和微小RNA(microRNAs,miRNAs)等。MiRNAs在生物過程中發(fā)揮重要調(diào)控作用,此外,它們還與一些肺部疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。我們推測(cè)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可能通過miRNAs影響ATⅡ中ENaC的功能,從而對(duì)ALI發(fā)揮治療作用。本實(shí)驗(yàn)旨在探討miRNAs與ENaC之間的關(guān)系,明確其是否影響Na+的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)并探討其可能的分子機(jī)制。研究方法:1、通過CCK-...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 動(dòng)物和細(xì)胞
        2.1.2 試劑
        2.1.3 儀器和材料
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 小鼠BMSCs的分離與培養(yǎng)
        2.2.2 胎鼠ATⅡ的分離與培養(yǎng)
        2.2.3 H441細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.4 CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 Western Blot分析
        2.2.6 qRT-PCR分析
        2.2.7 尤斯灌流實(shí)驗(yàn)
        2.2.8 qRT-PCR測(cè)定轉(zhuǎn)染效率
        2.2.9 MiRNAs轉(zhuǎn)染ATⅡ
        2.2.10 MiRNAs轉(zhuǎn)染BMSCs及 BMSCs與 ATⅡ細(xì)胞共培養(yǎng)
        2.2.11 siRNA特異性敲減PTEN
        2.2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 BMSCs對(duì) H441 細(xì)胞生存能力的影響
    3.2 BMSCs對(duì) ATⅡ細(xì)胞中ENaC和 PTEN蛋白表達(dá)水平的影響
    3.3 BMSCs對(duì) ATⅡ細(xì)胞中ENaC mRNA表達(dá)水平的影響
    3.4 BMSCs對(duì) H441 單層細(xì)胞短路電流的影響
    3.5 BMSCs對(duì) ATⅡ細(xì)胞中miR-130b表達(dá)水平的影響
    3.6 MiR-130b的轉(zhuǎn)染效率
    3.7 MiR-130b對(duì) ATⅡ中PTEN和 ENaC蛋白表達(dá)的影響
    3.8 BMSCs通過miR-130b對(duì) ATⅡ中PTEN和 ENa C蛋白表達(dá)的影響
    3.9 敲減PTEN的表達(dá)對(duì)ENa C蛋白表達(dá)的影響
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3979271