目的:香煙煙霧是引起慢性阻塞性肺疾病發(fā)生發(fā)展的一個(gè)非常重要的危險(xiǎn)因素。近二十年來(lái)慢性阻塞性肺疾病的發(fā)生率明顯增高,并且缺乏持續(xù)有效的治療方法。香煙煙霧引起肺部急性和慢性炎癥反應(yīng)的分子機(jī)制仍不清楚。鈣蛋白酶及其抑制劑calpeptin在與香煙煙霧相關(guān)的炎癥性呼吸道疾病中的作用尚未見(jiàn)報(bào)道。本課題擬探討鈣蛋白酶μ-calpain、m-calpain在香煙煙霧暴露小鼠肺部及人支氣管上皮BEAS-2B細(xì)胞中的表達(dá)及其調(diào)控機(jī)制,并研究鈣蛋白酶抑制劑calpeptin對(duì)香煙煙霧引起呼吸道炎癥反應(yīng)的影響及分子機(jī)制的變化。方法:體內(nèi)實(shí)驗(yàn)是將雄性BALB/c小鼠置于煙熏箱的上格,在煙熏箱下格每次點(diǎn)燃一支香煙,燃燒完全,間隔10分鐘后再點(diǎn)燃下一支香煙,每日小鼠被動(dòng)吸煙1支或5支香煙,每周5日,持續(xù)30日或90日,設(shè)置每日1支煙,持續(xù)90日組(CSI-3)、每日5支煙,持續(xù)30日組(CS5-1)、每日5支煙,持續(xù)90日組(CS5-3),構(gòu)建小鼠全身暴露的香煙煙霧模型。calpeptin干預(yù)香煙煙霧暴露小鼠組的實(shí)施方法是:小鼠被動(dòng)吸煙為每次1支、每日5支,每周5日,持續(xù)30日后,同時(shí)被動(dòng)吸煙及接受腹腔注射0.2...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２?ＨＥ染色觀察：香煙煙霧引起被動(dòng)吸煙小鼠出現(xiàn)肺部炎癥

??圖１．１透射電鏡觀察：香煙煙霧導(dǎo)致被動(dòng)吸煙小鼠的肺部炎癥。ＥＰＩ：?Ｉ型肺泡??上皮細(xì)胞；ＥＰｎ：?ＩＩ型肺泡上皮細(xì)胞；ＥＣ：肺血管內(nèi)皮細(xì)胞；Ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ：肺間??質(zhì)；Ｍｉｔ：線粒體（ｘｌ２００倍）。??ＮＣ?組?ＣＳ１－３?組?ＣＳ５－１?組??ｆ＇；ｉ?Ｈ?；....

圖１．４?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)：ｍ－ｃａｌｐａｉｎ在被動(dòng)吸煙小鼠肺組織中的表達(dá)水平升高

?ｉ？??Ｉ?＾?ｃ？ｓ?＆?＾??圖１．５?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)：｜ｉ－ｃａｌｐａｉｎ和ＩｋＢｏｃ在被動(dòng)吸煙小鼠肺組織中的表達(dá)??水平升高。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，Ｐ－Ａｃｔｉｎ為內(nèi)參照。與正常對(duì)照組比??較，＊＊Ｐ＜?０．０１；?＊＊＊Ｐ＜?０．００１。??４討....

圖１．５?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)：｜ｉ－ｃａｌｐａｉｎ和ＩｋＢｏｃ在被動(dòng)吸煙小鼠肺組織中的表達(dá)??水平升高

！?Ｊ?瞧＊?圍?＿??｜?＋，??ｍ－ｃａｌｐａｉｎ?／ｐ?－Ａｃｔｉｎ?ｒａｔｉｏ??圖１．４?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)：ｍ－ｃａｌｐａｉｎ在被動(dòng)吸煙小鼠肺組織中的表達(dá)水平升高。??實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，Ｐ－Ａｃｔｉｎ為內(nèi)參照。與正常對(duì)照組比較，＊＊Ｐ＜??０．０....

圖２．１不同濃度的ＣＳＥ抑制ＢＥＡＳ－２Ｂ細(xì)胞的增殖，該作用呈劑量依賴性

用呈劑量依賴性。半數(shù)抑制ＢＥＡＳ－２Ｂ細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)的ＣＳＥ濃度（ＩＣ５０）是１８．０２％，??ＢＥＡＳ－２Ｂ細(xì)胞被１８．０２％ＣＳＥ處理２４小時(shí)后，貼壁的細(xì)胞數(shù)量減少，漂浮細(xì)胞??的數(shù)量増多（圖２．１）。??３．２?ｍ－ｃａｌｐａｉｎ蛋白在１８．０２％ＣＳＥ處理的ＢＥＡＳ－２Ｂ細(xì)胞....

本文編號(hào)：3893756