前言:肺纖維化是一組由多種病因引起的肺破壞性疾病,肺纖維化過(guò)程包括肺組織的炎癥損傷、組織結(jié)構(gòu)破壞以及隨后伴有的肺間質(zhì)細(xì)胞積聚的組織修復(fù)過(guò)程。在此過(guò)程中,肺泡巨噬細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞、肺成纖維細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞通過(guò)分泌細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)等生物活性物質(zhì),發(fā)揮直接或間接的作用,從而使這些參與肺纖維化的多種細(xì)胞共同構(gòu)成了一個(gè)復(fù)雜的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò),彼此間相互影響,共同促進(jìn)了病變發(fā)展。但目前對(duì)該疾病發(fā)生發(fā)展起關(guān)鍵作用的細(xì)胞分子機(jī)制尚不清楚,迄今為止仍未找到有效的防治措施。目前肺纖維化的動(dòng)物研究模型大多數(shù)僅限于在病變?cè)缙?尚未形成典型的肺纖維化病變,因此也不能分析肺纖維化病變與其他疾病的關(guān)系。目前認(rèn)為慢性阻塞性肺疾病、間質(zhì)性肺病(石棉肺、硅肺、特發(fā)性間質(zhì)性肺纖維化等)均為肺癌的危險(xiǎn)因素,間質(zhì)性肺纖維化引發(fā)肺癌的機(jī)制目前尚不清楚,大多數(shù)觀點(diǎn)認(rèn)為,間質(zhì)性肺纖維化由于炎癥損傷和修復(fù)的相互作用可導(dǎo)致局部上皮反復(fù)的細(xì)胞及基因損傷,通過(guò)連續(xù)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變?nèi)缁?異常增生,非典型增生而最終導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。故加深對(duì)肺纖維化發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí),并在此基礎(chǔ)上發(fā)展新的治療策略已成為更加迫切的需要。 目的:本研究擬通過(guò)建立大鼠慢性硅肺纖維...

【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
英文縮寫(xiě)注解
第一章 建立大鼠硅肺纖維化動(dòng)物模型
    1.1 前言
    1.2 材料與方法
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 X線(xiàn)胸片結(jié)果
        1.3.2 肺組織病理學(xué)改變
    1.4 討論
第二章 大鼠硅肺纖維化/正常肺組織差異表達(dá)基因的克隆
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 組織標(biāo)本
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 肺組織總RNA的提取和鑒定
        2.3.2 mRNA的純化與濃縮
        2.3.3 總RNA和mRNA的凝膠電泳分析
        2.3.4 抑制消減雜交
        2.3.5 PCR產(chǎn)物的濃縮
        2.3.6 硅肺纖維化肺組織差異表達(dá)基因消減cDNA文庫(kù)的構(gòu)建:
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 硅肺纖維化肺組織和正常肺組織總RNA,mRNA的分離結(jié)果
        2.4.2 雙鏈cDNA的合成及酶切結(jié)果:
        2.4.3 dscDNA接頭的連接效率分析:
        2.4.4 消減雜交效率分析
        2.4.5 兩輪PCR對(duì)消減雜交產(chǎn)物的特異性擴(kuò)增結(jié)果
        2.4.6 硅肺纖維化/正常肺組織差異表達(dá)基因消減cDNA文庫(kù)構(gòu)建結(jié)果
    2.5 討論
第三章 硅肺纖維化/正常肺組織差異表達(dá)基因的測(cè)序分析及初步鑒定
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.2.1.1 大鼠硅肺纖維化/正常肺組織差異表達(dá)cDNA文庫(kù):
            3.2.1.2 主要試劑:
            3.2.1.3 主要儀器:
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            3.2.2.1 菌液PCR初步篩選陽(yáng)性克隆
            3.2.2.2 插入片段測(cè)序
            3.2.2.3 同源性檢索和分析
            3.2.2.4 半定量RT-PCR分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 插入片段的PCR擴(kuò)增
        3.3.2 測(cè)序結(jié)果
        3.3.3 陽(yáng)性克隆DNA序列生物信息學(xué)分析
        3.3.4 RT-PCR結(jié)果分析
    3.4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述一
    肺纖維化與肺癌的關(guān)系及其研究進(jìn)展
綜述二
    Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路及在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的進(jìn)展
致謝
攻讀學(xué)位期間主要研究成果



本文編號(hào)：3813731