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基于膠原/Matrigel的肺臟組織工程實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時間:2023-04-20 01:45
  目前,慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘以及肺纖維化(PF)都已成為高死亡率的肺臟疾病。伴隨著氣候和環(huán)境的改變,人類現(xiàn)在面臨的肺臟疾病呈明顯增長的趨勢。近半個世紀(jì)以來,隨著人們對于肺臟的基礎(chǔ)理論研究的不斷深入,以及針對一些肺臟疾病發(fā)病機(jī)理研究所取得的積極進(jìn)展,氧氣療法、手術(shù)治療和肺臟疾病康復(fù)療法等治療手段有了長足進(jìn)步。盡管如此,肺臟移植仍是肺臟疾病晚期的主要治療手段。然而,由于缺少肺臟器官來源,目前很多患者根本無法得到有效治療。尋找新的治療方法和手段業(yè)已成為肺臟疾病治療的當(dāng)務(wù)之急。組織工程技術(shù)的不斷發(fā)展已為肺臟疾病的治療帶來新的希望。 組織工程是融合了生命科學(xué)、材料科學(xué)以及工程科學(xué)的原理和方法,旨在再造人體組織器官的新興交叉學(xué)科。近年來,組織工程研究先后在皮膚、軟骨、神經(jīng)、血管及心肌組織再造中取得了突破性進(jìn)展,并有部分組織工程產(chǎn)品進(jìn)入臨床應(yīng)用。 肺臟具有通氣和換氣功能,肺實(shí)質(zhì)為肺內(nèi)支氣管的各級分支和其末端的肺泡。近年來肺臟組織工程研究進(jìn)展迅速,先后有研究人員成功在體外再造了組織工程化肺泡和支氣管粘膜。盡管如此,針對肺臟體外再造,仍存在如何優(yōu)選細(xì)胞支架材料,如何優(yōu)化細(xì)胞-支架復(fù)合體體外培...

【文章頁數(shù)】:68 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
縮略詞表
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 制備海藻酸鈉微囊及其物理與生物學(xué)性能的評價
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 儀器設(shè)備
        1.3 主要試劑
        1.4 主要試劑的配制
    2 方法
        2.1 海藻酸鈉微囊的制備
        2.2 倒置顯微鏡下觀察海藻酸鈉空微囊
        2.3 海藻酸鈉微囊機(jī)械強(qiáng)度的檢測
        2.4 海藻酸鈉微囊滲透壓強(qiáng)度的檢測
        2.5 海藻酸鈉微囊通透性的檢測
        2.6 海藻酸鈉微囊生物相容性的檢測
    3 結(jié)果
        3.1 倒置顯微鏡下觀察海藻酸鈉空微囊
        3.2 微囊機(jī)械強(qiáng)度的測定
        3.3 微囊滲透壓強(qiáng)度的測定
        3.4 微囊通透性的測定
        3.5 空微囊植入SD 大鼠腹腔不同時間后的變化
    4 討論
第二部分 以膠原/Matrigel-海藻酸鈉微囊為支架材料體外構(gòu)建組織工程化肺泡樣結(jié)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)研究
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 儀器設(shè)備
        1.3 主要試劑
        1.4 主要試劑的配制
    2 方法
        2.1 FPCs 的分離、培養(yǎng)和鑒定
        2.2 Ⅰ型液態(tài)鼠尾膠原的制備
        2.3 海藻酸鈉(APA)微囊的制備
        2.4 施加靜態(tài)拉伸力作用的組織工程化肺臟片層的構(gòu)建及檢測
    3 結(jié)果
        3.1 FPCs 的分離、培養(yǎng)和鑒定
        3.2 組織工程化肺臟片層的大體觀察
        3.3 組織工程化肺臟片層的相差顯微鏡觀察
        3.4 組織工程化肺臟片層的組織學(xué)檢測
        3.5 透射電子顯微鏡觀察組織工程化肺臟片層
        3.6 掃描電子顯微鏡觀察組織工程化肺臟片層
    4 討論
第三部分 以膠原/Matrigel 為支架材料體外構(gòu)建組織工程化支氣管粘膜的實(shí)驗(yàn)研究
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.2 儀器設(shè)備
        1.3 主要試劑
        1.4 主要試劑配制方法
    2 方法
        2.1 種子細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2 Ⅰ型液態(tài)鼠尾膠原的制備
        2.3 以膠原/Matrigel 為支架材料的組織工程化支氣管粘膜的構(gòu)建及檢測
    3 結(jié)果
        3.1 種子細(xì)胞的培養(yǎng)
        3.2 倒置相差顯微鏡觀察組織工程化支氣管粘膜
        3.3 組織工程化支氣管粘膜的組織學(xué)檢測
        3.4 組織工程化支氣管粘膜的免疫組織化學(xué)染色檢測
        3.5 掃描電子顯微鏡觀察組織工程化支氣管粘膜
    4 討論
結(jié)論
    一、在海藻酸鈉(APA)微囊研制方面
    二、在組織工程化肺泡構(gòu)建方面
    三、在支氣管粘膜再造方面
參考文獻(xiàn)
綜述:肺組織工程研究進(jìn)展
個人簡歷
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致謝



本文編號:3794633

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