目的：本實驗旨在研究細菌內毒素(LPS)介導的肺巨噬細胞核轉錄因子NF-κB激活及其在細胞凋亡中的作用和機制，探討蛋白激酶C(PKC)在內毒素激活NF-κB中的作用及地位。 方法：分離、純化及培養(yǎng)大鼠肺巨噬細胞；以不同濃度的LPS(0μg/ml，0.01μg/ml，0.1μg/ml，1μg/ml，10μg/ml)和不同作用時間(0min，5min，15min，30min，60min，120min)分別刺激小室培養(yǎng)的細胞單層，觀察NF-κB的核內濃度及NO合成量的動態(tài)變化，選擇LPS的最佳用量和作用時間；然后分成四組實驗，設正常對照組，LPS處理組，特異性PKC抑制劑(Cal C)阻斷組，NF-κB抑制劑(PDTC)阻斷組；收集培養(yǎng)的單層細胞及培養(yǎng)液；采用夾心ELISA法定量測定細胞核提取物中的NF-κB水平；免疫組化法檢測NF-κB的核內移位變化；硝酸還原酶法測定細胞培養(yǎng)液中NO含量；吖啶橙染色觀察凋亡細胞的形態(tài)學變化，凋亡電泳實驗檢測細胞凋亡后基因組DNA的斷裂情況。 結果： 1. 隨著LPS用量的增加及作用時間的延長，細胞核內的NF-κB水平和培養(yǎng)液中NO含量逐漸增高。NF-κB核...

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【學位級別】：碩士

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中文摘要
論文正文NF-κB、PKC在內毒素誘導肺巨噬細胞活化及凋亡中的作用和機制的實驗研究
    前言
    材料與方法
    結果
    討論
    結論
    致謝
    圖片
    參考文獻
文獻綜述LPS激活靶細胞NF-κB的機制與途徑的研究進展
    參考文獻
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本文編號：3782196