目的探究TNF-α對大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(alveolar typeⅡepithelial cells,AEC-Ⅱ)增殖及凋亡的影響。方法體外培養(yǎng)大鼠AEC-Ⅱ,透射電鏡鑒定大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞后,將細(xì)胞分為對照組和TNF-α組(5、10、20、40 ng/mL),分別干預(yù)24、48、72 h。MTT比色法檢測各組細(xì)胞增殖抑制率,AnnexinⅤ/PI雙染色聯(lián)合流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞的早期凋亡率,ELISA法檢測各組細(xì)胞上清液中IL-6的含量。結(jié)果透射電鏡下可見細(xì)胞內(nèi)含有大量的特征性板層小體。MTT法示TNF-α組ACE-Ⅱ的增殖抑制率均高于對照組(均P<0.05),且隨著劑量的增大,作用時間延長,細(xì)胞的增殖抑制率越高。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果可見TNF-α組細(xì)胞凋亡率明顯高于對照組(均P<0.05),且呈劑量-時間依賴關(guān)系。ELISA結(jié)果示40 ng/mL TNF-α組細(xì)胞上清液中IL-6含量高于對照組及5 ng/mL TNF-α組(P<0.05),而各作用時點(diǎn)組間兩兩比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。結(jié)論 TNF-α通過誘導(dǎo)AEC-Ⅱ的凋亡導(dǎo)致肺損傷,并...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 AEC-Ⅱ的復(fù)蘇與傳代培養(yǎng)
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組與處理
        1.2.3 透射電鏡鑒定及觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)
        1.2.4 MTT法測定細(xì)胞增殖情況
        1.2.5 流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞凋亡率
        1.2.6 夾心ELISA法測定細(xì)胞上清液中IL-6的含量
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 電子顯微鏡下大鼠AEC-Ⅱ的超微結(jié)構(gòu)
    2.2 TNF-α對AEC-Ⅱ增殖的影響
    2.3 TNF-α對AEC-Ⅱ凋亡的影響
    2.4 TNF-α對AEC-Ⅱ細(xì)胞上清液中IL-6含量的影響
3 討論



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