目的:本實驗通過COPD大鼠模型并予以紅霉素干預(yù)觀察大鼠肺內(nèi)MMP-9表達(dá)水平的變化。通過本實驗認(rèn)識和探討體內(nèi)實驗紅霉素對COPD大鼠肺內(nèi)MMP-9表達(dá)的影響,進(jìn)一步認(rèn)識紅霉素的抗炎作用,開拓紅霉素在COPD的應(yīng)用價值。 方法:健康雄性Wistar大鼠36只(中南大學(xué)實驗動物學(xué)部提供),雄性,白色,SPF級,體重220±20 g。在安靜、室溫、避強(qiáng)光的環(huán)境中自由進(jìn)食和飲水一周。36只Wister大鼠隨機(jī)分為3組,每組12只:COPD模型組,第1、14天注射脂多糖(LPS)200ug/100ul,第2～13天、15～30天每日上午在72升(30cm×40cm×60cm)自制有機(jī)玻璃箱內(nèi)被動吸煙,每天上午1次,每次12支,每次持續(xù)0.5h。紅霉素干預(yù)組,造模方法同COPD組,每天熏煙前用紅霉素灌胃治療(劑量100mg/kg,配制成1.25%紅霉素口服液),從第17天開始進(jìn)行,經(jīng)氣管內(nèi)注入LPS的條件、煙熏條件以及持續(xù)時間均同COPD組,給藥2周;正常對照組,標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)30天,不做任何干預(yù),第1、14天氣管內(nèi)注入生理鹽水100ul。大鼠肺功能測定由湘雅醫(yī)學(xué)院病理生理研究所完成,經(jīng)微機(jī)處理計算出...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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縮略詞表
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑及來源
        2.1.3 引物
        2.1.4 主要儀器及設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 動物分組及處理
            2.2.1.1 分組及COPD模型建立
            2.2.1.2 大鼠肺功能測定
            2.2.1.3 取材方法
        2.2.2 指標(biāo)檢測
            2.2.2.1 用免疫組化方法檢測各組大鼠肺組織MMP-9的表達(dá)
            2.2.2.2 用顯微圖像分析系統(tǒng)測定各組大鼠肺組織MMP-9的陽性系數(shù)及灰度值
            2.2.2.3 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測定各組大鼠肺組織MMP-9 mRNA表達(dá)水平
                2.2.2.3.1 肺組織總RNA的提取步驟
                2.2.2.3.2 RT-PCR
        2.2.3 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 結(jié)果
    3.1 一般情況觀察
    3.2 肺功能測定
    3.3 光鏡下大鼠肺及支氣管組織的病理學(xué)觀察
    3.4 大鼠肺組織中MMP-9蛋白的表達(dá)
    3.5 大鼠肺組織中MMP-9 mRNA的表達(dá)
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間研究成果



本文編號：3761285