紅霉素對慢性阻塞性肺疾病大鼠MMP-9水平的影響
發(fā)布時間:2023-03-12 08:11
目的:本實驗通過COPD大鼠模型并予以紅霉素干預觀察大鼠肺內MMP-9表達水平的變化。通過本實驗認識和探討體內實驗紅霉素對COPD大鼠肺內MMP-9表達的影響,進一步認識紅霉素的抗炎作用,開拓紅霉素在COPD的應用價值。 方法:健康雄性Wistar大鼠36只(中南大學實驗動物學部提供),雄性,白色,SPF級,體重220±20 g。在安靜、室溫、避強光的環(huán)境中自由進食和飲水一周。36只Wister大鼠隨機分為3組,每組12只:COPD模型組,第1、14天注射脂多糖(LPS)200ug/100ul,第2~13天、15~30天每日上午在72升(30cm×40cm×60cm)自制有機玻璃箱內被動吸煙,每天上午1次,每次12支,每次持續(xù)0.5h。紅霉素干預組,造模方法同COPD組,每天熏煙前用紅霉素灌胃治療(劑量100mg/kg,配制成1.25%紅霉素口服液),從第17天開始進行,經氣管內注入LPS的條件、煙熏條件以及持續(xù)時間均同COPD組,給藥2周;正常對照組,標準飼養(yǎng)30天,不做任何干預,第1、14天氣管內注入生理鹽水100ul。大鼠肺功能測定由湘雅醫(yī)學院病理生理研究所完成,經微機處理計算出...
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
縮略詞表
第一章 前言
第二章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑及來源
2.1.3 引物
2.1.4 主要儀器及設備
2.2 方法
2.2.1 動物分組及處理
2.2.1.1 分組及COPD模型建立
2.2.1.2 大鼠肺功能測定
2.2.1.3 取材方法
2.2.2 指標檢測
2.2.2.1 用免疫組化方法檢測各組大鼠肺組織MMP-9的表達
2.2.2.2 用顯微圖像分析系統(tǒng)測定各組大鼠肺組織MMP-9的陽性系數(shù)及灰度值
2.2.2.3 逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)測定各組大鼠肺組織MMP-9 mRNA表達水平
2.2.2.3.1 肺組織總RNA的提取步驟
2.2.2.3.2 RT-PCR
2.2.3 統(tǒng)計學處理
第三章 結果
3.1 一般情況觀察
3.2 肺功能測定
3.3 光鏡下大鼠肺及支氣管組織的病理學觀察
3.4 大鼠肺組織中MMP-9蛋白的表達
3.5 大鼠肺組織中MMP-9 mRNA的表達
第四章 討論
第五章 結論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
攻讀學位期間研究成果
本文編號:3761285
【文章頁數(shù)】:49 頁
【學位級別】:碩士
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第一章 前言
第二章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑及來源
2.1.3 引物
2.1.4 主要儀器及設備
2.2 方法
2.2.1 動物分組及處理
2.2.1.1 分組及COPD模型建立
2.2.1.2 大鼠肺功能測定
2.2.1.3 取材方法
2.2.2 指標檢測
2.2.2.1 用免疫組化方法檢測各組大鼠肺組織MMP-9的表達
2.2.2.2 用顯微圖像分析系統(tǒng)測定各組大鼠肺組織MMP-9的陽性系數(shù)及灰度值
2.2.2.3 逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)測定各組大鼠肺組織MMP-9 mRNA表達水平
2.2.2.3.1 肺組織總RNA的提取步驟
2.2.2.3.2 RT-PCR
2.2.3 統(tǒng)計學處理
第三章 結果
3.1 一般情況觀察
3.2 肺功能測定
3.3 光鏡下大鼠肺及支氣管組織的病理學觀察
3.4 大鼠肺組織中MMP-9蛋白的表達
3.5 大鼠肺組織中MMP-9 mRNA的表達
第四章 討論
第五章 結論
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綜述
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