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基于實時無標記細胞分析系統(tǒng)的氣道平滑肌細胞收縮舒張效應(yīng)檢測方法的建立

發(fā)布時間:2022-10-05 15:39
  該研究利用實時無標記細胞分析系統(tǒng)(xCELLigence real-time cell analysis system,RTCA)建立氣道平滑肌細胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)收縮舒張效應(yīng)檢測方法。篩選適宜細胞接種密度,接種于RTCA檢測板中監(jiān)測細胞動態(tài)生長曲線;利用組胺刺激細胞收縮,并計算組胺半數(shù)抑制濃度(IC50);在適宜組胺刺激濃度的基礎(chǔ)上,利用特布他林模擬細胞舒張效應(yīng),并計算半數(shù)有效濃度(EC50)。結(jié)果顯示,ASMCs為4 000個/孔接種密度培養(yǎng)于(16±4) h區(qū)間內(nèi),符合后續(xù)實驗需求;組胺作用ASMCs 2 h后的IC50為8.07 mmol/L,故選擇8 mmol/L組胺刺激ASMCs可見較為明顯的收縮效應(yīng);特布他林作用ASMCs 2 h后的EC50為8.08×10–8 mol/L,故濃度為10 μmol/L和20 μmol/L的特布他林可檢測到明顯舒張效應(yīng)(P<0.05)。利用RTCA可以穩(wěn)定、有效、可靠地檢測ASMC... 

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細胞來源
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 實驗儀器
    1.2 實驗方法
        1.2.1 大鼠ASMCs的培養(yǎng)
        1.2.2 基于RTCA篩選大鼠ASMCs接種密度
        1.2.3 監(jiān)測不同濃度組胺對大鼠ASMCs收縮程度的影響
        1.2.4 監(jiān)測不同濃度特布他林舒張大鼠ASMCs程度
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠ASMCs最適接種密度
    2.2 利用組胺進行大鼠ASMCs收縮效應(yīng)檢測
    2.3 利用特布他林進行大鼠ASMCs舒張效應(yīng)檢測
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]實時無標記腫瘤細胞凋亡篩選技術(shù)體系的建立[J]. 李艷偉,宋興輝,王佳佳,劉麗,黃瑩瑩,郭春.  生物技術(shù)通報. 2019(10)
[2]利用實時細胞分析系統(tǒng)檢測人和大鼠氣道平滑肌細胞倍增時間的研究[J]. 王文倩,王宇,徐玉東,楊永清,尹磊淼.  現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志. 2015 (03)
[3]運用實時細胞分析系統(tǒng)監(jiān)測原代乳鼠心肌細胞的生長及搏動評價抗心律失常藥物[J]. 王淑顏,汪溪潔,靳康,惠濤濤,馬璟.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2014(06)
[4]一氧化氮對被動致敏人氣道平滑肌細胞鉀通道的作用[J]. 葉濤,徐永健,張珍祥,劉先勝,楊朝,曹勇,李亞清.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2006(04)



本文編號:3686048

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