急性肺損傷（Acute lung injury,ALI）,及其重癥形式急性呼吸窘迫綜合征（Acute respiratory distress syndrome,ARDS）是一類死亡率高,難以治療的危重癥疾病。ALI/ARDS以肺泡彌漫性的損傷為病理特征,肺泡結(jié)構(gòu)損傷引起的氣血屏障的破壞會導(dǎo)致低氧血癥和肺水腫的發(fā)生。在ALI/ARDS病理過程中,中性粒細(xì)胞在肺泡微環(huán)境的炎癥和損傷過程中,起到了重要的促進(jìn)作用。由于肺泡處于哺乳動物呼吸道解剖學(xué)的最末端,相應(yīng)的體內(nèi)研究手段較為局限。本研究中,我們利用與肺具有相似性的斑馬魚魚鰾作為體內(nèi)實(shí)時模型,來研究ALI中性粒細(xì)胞的浸潤。我們發(fā)現(xiàn),魚鰾顯微注射脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）,聚肌胞苷酸（Polyinosinic-polycytidylic acid,Poly IC）以及納米硅顆粒（Nano-Si O₂）等外源物質(zhì),可以顯著地引起中性粒細(xì)胞向魚鰾浸潤,并且具有時間和劑量依賴性。中性粒細(xì)胞的動態(tài)追蹤顯示,LPS魚鰾注射后中性粒細(xì)胞通過鰾管周圍的毛細(xì)血管或者前腎管周邊進(jìn)入魚鰾腔。LPS注射后,炎癥因子... 

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

外源物質(zhì)刺激中性粒細(xì)胞遷移到斑馬魚魚鰾。中性粒細(xì)胞聚集到外源物質(zhì)[Poly IC(A),Nano-SiO2(B),IL8(1 ng)(C),MIP-2(2 ng)(D)]注射的5 dpf Tg(mpo:GFP)斑馬魚魚鰾(虛線指示)(綠色,中性粒細(xì)胞;比例尺:100μm)。

中性粒細(xì)胞遷移至LPS注射的斑馬魚魚鰾。A.LPS,Poly IC和Nano-SiO2注射5 dpf斑馬魚魚鰾后,所引起中性粒細(xì)胞遷移至魚鰾的劑量依賴效應(yīng)。B.50 ng LPS注射入5 dpf Tg(mpo:GFP)斑馬魚魚鰾5 h后,熒光共聚焦顯微鏡觀察中性粒細(xì)胞在魚鰾中的聚集情況。(綠色熒光代表中性粒細(xì)胞,比例尺60μm)C.不同濃度LPS注射入5 dpf斑馬魚魚鰾后,中性粒細(xì)胞在魚鰾(虛線表示)的浸潤情況。(綠色熒光代表中性粒細(xì)胞,比例尺100μm)D.斑馬魚全魚的中性粒細(xì)胞的分布。(綠色熒光代表中性粒細(xì)胞,比例尺100μm)E.LPS魚鰾注射后,斑馬魚(5 dpf)魚鰾的HE染色,比例尺20μm,40倍物鏡。

實(shí)時活體觀察魚鰾LPS注射后中性粒細(xì)胞的遷移。對Tg(mpo:GFP/flk1:mCherry)斑馬魚魚鰾注射50 ng LPS后,中性粒細(xì)胞浸潤到魚鰾中。(綠色熒光代表中性粒細(xì)胞;紅色熒光代表血管;白色箭頭指示遷移至魚鰾的中性粒細(xì)胞;時間h:m:s;LPS注射40 min后開始拍攝;比例尺70μm)。右上角為每張圖的放大圖。


本文編號：3681053