目的:軍團(tuán)菌肺炎是社區(qū)環(huán)境中常見的三種重癥肺炎之一,發(fā)病率2-9%,病死率10%,血清1型嗜肺軍團(tuán)菌（Lp）對(duì)人類最有致病力,占軍團(tuán)菌感染的84%。免疫抑制狀態(tài)是軍團(tuán)菌感染的重要危險(xiǎn)因素,而且免疫抑制宿主相較正常免疫力宿主更易感染Lp,更易發(fā)展成重癥肺炎,病死率可達(dá)20-70%。重癥肺炎特征性病理生理改變?yōu)榉蚊?xì)血管通透性增加、肺水腫。目前免疫抑制宿主感染Lp多為臨床個(gè)案報(bào)道,缺乏與正常免疫力宿主感染Lp間病情嚴(yán)重程度差異的機(jī)制研究,同時(shí),軍團(tuán)菌肺炎患者易出現(xiàn)多器官系統(tǒng)損傷,如肝功能異常、腹瀉等等,多為臨床個(gè)案報(bào)道,尚無相關(guān)基礎(chǔ)研究。本研究建立免疫抑制合并Lp感染豚鼠模型,研究其平均肺動(dòng)脈壓變化、肺毛細(xì)血管通透性改變程度、腸道菌群失衡、腸道細(xì)菌易位及其導(dǎo)致的肝臟損傷等,以期解答部分臨床問題。研究方法:本研究分二部分,第一部分研究免疫抑制合并Lp感染豚鼠肺毛細(xì)血管通透性改變機(jī)制及平均肺動(dòng)脈在肺水腫形成過程中的作用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四組:對(duì)照組,Lp感染組,免疫抑制組及免疫抑制合并Lp感染組,三個(gè)實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)Lp感染24h、48h和72h。免疫抑制豚鼠通過注射曲安奈德及環(huán)磷酰胺獲得,隨后主氣道接... 

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:軍團(tuán)菌感染致免疫抑制豚鼠肺循環(huán)變化的研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑與實(shí)驗(yàn)儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2 研究對(duì)象和實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 免疫抑制豚鼠模型的制備和分組
            2.2.2 Lp菌株及培養(yǎng)
            2.2.3 血常規(guī)檢查
            2.2.4 外周血CD4~+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞檢測
            2.2.5 體溫、體重、肺重量及離體肺重量測量
            2.2.6 ELISA
            2.2.7 肺組織HE染色、免疫組化及免疫熒光檢查
            2.2.8 肺組織透射電子顯微鏡檢查
            2.2.9 數(shù)據(jù)分析
    3 結(jié)果
        3.1 外周血白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞變化
        3.2 體溫、體重、肺重量及離體肺重量變化
        3.3 血清VEGFA變化
        3.4 肺組織VEGFA、VEGFR2及VE-cadherin表達(dá)情況
        3.5 肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞連接超微結(jié)構(gòu)改變
        3.6 肺組織HE染色及超微結(jié)構(gòu)損傷情況
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分:軍團(tuán)菌感染致免疫抑制豚鼠腸道細(xì)菌易位的研究
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 主要試劑與實(shí)驗(yàn)儀器
            7.1.1 主要試劑
            7.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        7.2 研究對(duì)象和實(shí)驗(yàn)方法
            7.2.1 免疫抑制豚鼠模型的制備和分組
            7.2.2 Lp菌株及培養(yǎng)
            7.2.3 樣本收集、DNA提取及檢測
            7.2.4 DNA文庫構(gòu)建及測序
            7.2.5 肺、肝臟組織革蘭氏染色
            7.2.6 肺、肝臟組織BP-FISH檢查
            7.2.6 肝臟大體情況
            7.2.7 肝臟HE染色
            7.2.8 肝臟TUNEL檢查
            7.2.9 肝臟組織免疫組化檢查
            7.2.10 數(shù)據(jù)分析
    8 結(jié)果
        8.1 細(xì)菌16S rDNA提取結(jié)果
        8.2 小腸內(nèi)容物樣本目、種水平細(xì)菌構(gòu)成
        8.3 肺、肝臟及血液樣本種水平細(xì)菌構(gòu)成
        8.4 肺、肝臟組織革蘭氏染色結(jié)果
        8.5 肺、肝臟組織BP-FISH結(jié)果
        8.6 肝臟大體表現(xiàn)
        8.7 肝臟HE染色結(jié)果
        8.8 肝臟TUNEL結(jié)果
        8.9 肝臟細(xì)胞程序性死亡相關(guān)蛋白表達(dá)情況
    9 討論
    10 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Update and actual trends on bacterial infections following liver transplantation[J]. Jose Luis del Pozo.  World Journal of Gastroenterology. 2008(32)
[2]吉曼尼茲（Gimenez）染色法快速篩選阿米巴滋養(yǎng)體內(nèi)嗜肺軍團(tuán)菌[J]. 沈潔,姜慶五,李勤學(xué),陳洪友,李子華.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2005(04)



本文編號(hào)：3660122