目的觀察rhIL-33對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞增殖及其間充質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物的影響,探討IL-33/ST2L-TRAF信號(hào)通路在肺纖維化形成過程中的作用。方法培養(yǎng)HELF細(xì)胞,PCR檢測(cè)IL-33受體ST2L m RNA;不同濃度梯度的rh IL-33刺激細(xì)胞,MTT法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)（24、48、72 h）IL-33對(duì)HF細(xì)胞增殖的影響;Real-time PCR方法檢測(cè)IL-33刺激HELF后不同時(shí)間點(diǎn)（0、6、12、24、48、72 h）細(xì)胞標(biāo)志性基因α-SMA m RNA、Vimentin m RNA、collagn I m RNA及TRAF-6 m RNA的變化;Western blot法檢測(cè)細(xì)胞標(biāo)志性蛋白α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）、I型膠原（collagen I）及關(guān)鍵性信號(hào)分子TRAF-6與下游信號(hào)分子ERK1/2、JNK、NF-kappa B等的改變。結(jié)果 IL-33能促進(jìn)HELF的增殖,10 ng/ml的IL-33促增殖作用最強(qiáng),且72 h最為明顯;隨著IL-33刺激細(xì)胞時(shí)間的逐漸延長(zhǎng),在0~72 h內(nèi)α-SMA、Vimentin、collage... 

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RT-PCR檢測(cè)ST2L在HELF的表達(dá)情況

h不同質(zhì)量濃度IL-33對(duì)HELF細(xì)胞增殖的影響

IL-33處理后細(xì)胞不同時(shí)間點(diǎn)的基因表達(dá)水平Fig3ThemRNAexpressionsofHELFstimulatedby10ng/ml

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]IL-33參與促進(jìn)A549細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化及作用機(jī)制[J]. 吳立艷,鄭金旭,宋萍,許姣,劉繼柱,許清.  中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志. 2013(21)
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[3]肺纖維化中上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)型信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 梁冠男,胡永斌,周建華.  國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志. 2008(06)

博士論文
[1]芪丹化纖方對(duì)大鼠肺纖維化的干預(yù)作用及機(jī)制研究[D]. 費(fèi)雁.湖北中醫(yī)學(xué)院 2009



本文編號(hào)：3657006