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pRNA納米基因載體構(gòu)建及其對(duì)哮喘STAT5b基因的沉默作用研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-23 09:20
  目的構(gòu)建出攜帶小干擾RNA(siRNA)和RNA適配體(aptamer)的包裝RNA (packaging RNA, pRNA)納米基因載體,研究其對(duì)哮喘小鼠脾淋巴細(xì)胞STAT5b基因的沉默作用。方法使用PCR和體外轉(zhuǎn)錄的方法構(gòu)建靶向沉默STAT5b基因的pRNA/siRNA單體、靶向結(jié)合CD4分子的pRNA/aptamer(8)單體及pRNA/aptamer(14)單體,進(jìn)而構(gòu)建出pRNA/siRNA-pRNA/aptamer(8)二聚體和pRNA/siRNA-pRNA/aptamer(14)二聚體。用卵清蛋白(OVA)致敏、激發(fā)的方法建立哮喘小鼠模型,用淋巴細(xì)胞分離液分離出脾淋巴細(xì)胞,再用已構(gòu)建的pRNA單體、pRNA二聚體進(jìn)行淋巴細(xì)胞體外干預(yù),RT-PCR法檢測(cè)在有/無(wú)轉(zhuǎn)染試劑條件下pRNA單體和pRNA二聚體的干預(yù)效果,CCK—8法檢測(cè)pRNA/siRNA單體和pRNA/aptamer(8)單體的毒性作用。結(jié)果(1)臨床表現(xiàn)、肺組織病理檢查和肺泡灌洗液白細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)結(jié)果顯示,哮喘小鼠模型制備成功。(2)測(cè)序及二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)結(jié)果顯示,pRNA/siRNA、pRNA/aptamer(... 

【文章來(lái)源】:暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

pRNA納米基因載體構(gòu)建及其對(duì)哮喘STAT5b基因的沉默作用研究


ThZ淋巴細(xì)胞在哮喘中的作用[l4]

二級(jí)結(jié)構(gòu),單體,示蹤分子


大學(xué)學(xué)位論文聚體。在pRNA的雙鏈螺旋區(qū)上添加siRNA、RNAaptamer、RNA酶或化學(xué)基團(tuán)等功建出帶有相應(yīng)功能的pRN刀siRNA、pRN刀aptamer、pRN刀核酶和pRNA/葉再通過(guò)左右環(huán)堿基互補(bǔ)的相互作用形成pRNA多聚體〔2’]。理論上,pRNA能能分子的pRNA六聚體,同時(shí)攜帶治療分子、靶向分子、示蹤分子等多個(gè)功安全高效、靶向性強(qiáng)的基因治療,故pRNA是非常有前景的納米基因載體。

三級(jí)結(jié)構(gòu),單體,示蹤分子,納米基


分子的pRNA六聚體,同時(shí)攜帶治療分子、靶向分子、示蹤分子等多個(gè)功全高效、靶向性強(qiáng)的基因治療,故pRNA是非常有前景的納米基因載體。一一,毓毓,,1!!!.1}!!1·}毅}{}二}.:落}}};;;“‘“腳U產(chǎn)劃護(hù)C了乒以石林~弘叮叮圖2pRNA單體二級(jí)結(jié)構(gòu)陣]

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3604057

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