本文關鍵詞：烏魯木齊地區(qū)維、漢哮喘患者外周血 IL-2、IL-4、IFN-γ 基因表達及甲基化水平差異性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:檢測新疆維、漢人群哮喘患者及健康人群外周血CD4+T淋巴細胞中白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-4(IL-4)、γ-干擾素(IFN-γ)mRNA的表達及血漿中IL-2、IL-4、IFN-γ的蛋白表達水平,并檢測IL-4、IFN-γ的甲基化程度,比較基因表達與甲基化水平的相關性。方法:(1)研究對象為150例哮喘急性發(fā)作期的患者(哮喘組),其中包括維吾爾族30例,漢族120例。107例健康人群(對照組),其中包括維吾爾族35例,漢族72例。哮喘組在新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院和新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院確診為哮喘急性發(fā)作期的患者。對照組選擇同期在新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院健康體檢者。(2)采用SYBR Green I實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測IFN-γ、IL-2和IL-4mRNA基因的表達水平。(3)應用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法檢測IFN-γ、IL-2和IL-4的蛋白表達水平。(4)采用SNaPshot分型技術對哮喘組107個樣本及對照組105例樣本進行IL-4、IFN-γ基因中的5個緊鄰CpG位點進行單堿基延伸的甲基化定量分析。結果:(1)哮喘組IL-2mRNA及蛋白表達水平均低于對照組,但差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),其中mRNA及蛋白表達在維吾爾族哮喘患者與漢族哮喘患者均無明顯差異(P0.05)。IL-4、IFN-γmRNA及蛋白表達水平在哮喘組均高于對照組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),其中IFN-γmRNA及蛋白表達水平在維吾爾族哮喘患者與漢族哮喘患者差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),IL-4mRNA表達在維吾爾族哮喘與漢族哮喘有差異(P0.05),IL-4蛋白表達在維吾爾族哮喘與漢族哮喘無差異(P0.05)。(2)IFN-γ1SF、IFN-γ2SR、IL-42SR、IL-44SF位點甲基化程度在哮喘組與對照組差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。IL4-1SF位點甲基化程度在哮喘組與對照組差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。IFN-γ1SF、IFN-γ2SR、IL-41SF、IL-42SR、IL-44SR位點甲基化程度在維吾爾族哮喘及漢族哮喘之間均無明顯差異(P0.05)。IL4-1SF位點甲基化程度在漢族哮喘組高于漢族對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(3)哮喘組IFN-γ、IL-4mRNA表達水平與IFN-γ1SF、IFN-γ2SR、IL4-1SF、IL4-2SR、IL4-4SR甲基化程度均無相關性(P0.05)。結論:IL-4、IFN-γ在哮喘組與對照組mRNA表達及蛋白表達差異均有統(tǒng)計學意義。IL-4mRNA表達在維吾爾族哮喘與漢族哮喘差異有統(tǒng)計學意義,IL-4蛋白表達在維吾爾族哮喘與漢族哮喘無差異,IL-4可能是引起維吾爾族哮喘與漢族哮喘患病率不同的原因。IL-2mRNA及蛋白表達水平在哮喘組與對照組差異均無統(tǒng)計學意義,其中mRNA及蛋白表達在維吾爾族哮喘患者與漢族哮喘患者無明顯差異。IFN-γmRNA表達及蛋白表達在維吾爾族哮喘及漢族哮喘差異均有統(tǒng)計學意義,IFN-γ可能是引起維吾爾族哮喘與漢族哮喘患病率不同的原因。IL4-1SF位點在哮喘組和對照組有差異,IL-41SF位點高甲基化可以作為研究哮喘的途徑。IL4-1SF位點甲基化程度在漢族哮喘組與漢族對照組之間差異有統(tǒng)計學意義,在維吾爾族哮喘組與維吾爾族對照組之間無差異,提示漢族人群這一位點更容易發(fā)生高甲基化。哮喘患者IL-4、IFN-γ的啟動子區(qū)的甲基化水平對各自基因mRNA水平的表達不起調(diào)控作用。IL-4、IFN-γ五個位點在維吾爾族哮喘與漢族哮喘甲基化程度均無差異,IL-4、IFN-γDNA甲基化可能不是引起維吾爾族哮喘與漢族哮喘患病率不同的原因。
【關鍵詞】：哮喘 白細胞介素-2 白細胞介素-4 干擾素-γ 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應 DNA甲基化 單堿基延伸法
【學位授予單位】：新疆醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R562.25
【目錄】：

• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-14
• 內(nèi)容與方法14-29
• 1.研究對象14-15
• 2.研究方法15-27
• 2.1.RT-PCR檢測IL-2、IL-4、IFN-γ 基因表達15-20
• 2.2.ELISA檢測IL-2、IL-4、IFN-γ 蛋白表達20-22
• 2.3.SNaPshot檢測IL-4、IFN-γ 甲基化程度22-27
• 3.質(zhì)量控制27
• 4.統(tǒng)計方法27-28
• 5.技術路線圖28-29
• 結果29-37
• 討論37-47
• 小結47-48
• 致謝48-49
• 參考文獻49-55
• 綜述55-64
• 參考文獻60-64
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學位論文64-65
• 導師評閱表65

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