研究背景：大量證據(jù)顯示哮喘是氣道的一種炎癥性疾病，T淋巴細(xì)胞，特別是Th2細(xì)胞在炎癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起關(guān)鍵作用，并還通過(guò)招募其他炎性細(xì)胞，如嗜酸性粒細(xì)胞等進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng)。近年來(lái)的研究還顯示，氣道重塑是哮喘的重要病理改變之一，對(duì)哮喘的病理生理起重要作用。在氣道重塑改變中，氣道粘液細(xì)胞化生、增生和肥大是其重要組成部分，這些改變與哮喘的病理生理改變和某些臨床表現(xiàn)密切相關(guān)，如氣流受阻、肺功能下降，特別是哮喘發(fā)作或加重時(shí)的咳嗽、多痰等。在一些致死性哮喘尸檢中，幾乎無(wú)一例外地發(fā)現(xiàn)氣道大量粘液栓形成，并阻塞氣道。因此，研究哮喘時(shí)氣道粘液細(xì)胞化生和增生發(fā)生的機(jī)制并尋求拮抗化生途徑具有重要臨床意義。 研究目的：探索哮喘時(shí)氣道粘液細(xì)胞化生的發(fā)生機(jī)理，研究Th1／Th2細(xì)胞因子在粘液細(xì)胞化生中的作用。 研究方法： ① 用ELIsA法檢測(cè)哮喘動(dòng)物模型在吸入抗原后肺泡灌洗液中IFNγ和IL-13的改變； ② 采用細(xì)胞形態(tài)測(cè)定法并應(yīng)用數(shù)碼成象分析系統(tǒng)，研究哮喘模型吸入抗原后氣道粘液細(xì)胞特點(diǎn)，并觀察在不同細(xì)胞因子作用后氣道粘液細(xì)胞的改變； ③ 采用TUNEL方法，檢測(cè)在延長(zhǎng)抗原接觸時(shí)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

一EAB一PAs染色顯示吸入抗原5天(B)和15天(C)粘液細(xì)胞;TUNEL檢測(cè)顯示5天D原吸鼠TUNEL陽(yáng)性改，經(jīng)原吸小鼠

6天經(jīng)鼻滴注IFN丫、IL一13或生理鹽水，再2天后處死動(dòng)物。結(jié)果顯示，100ngIFNY可明顯加速M(fèi)cM恢復(fù)(圖3.A)。TUNEL檢測(cè)顯示，IFNY灌注的小鼠氣道粘液細(xì)胞顯示陽(yáng)性反應(yīng)，提示細(xì)胞核斷裂，細(xì)胞出現(xiàn)凋亡改變(圖3.B)。一山E︸UJ的O芝卜。﹂oqujnZSalineIFN丫IFNYSOng!L一13100ng圖3.A滴注生理鹽水、IFNY和IL一132天后氣道MCM改變

結(jié)果1.IFNY誘導(dǎo)正常人氣道上皮細(xì)胞凋亡為明確工FN7是否能直接誘導(dǎo)粘液細(xì)胞凋亡，我們觀察了工FNy對(duì)體外培養(yǎng)的正常人支氣管上皮細(xì)胞的作用。NHBES在該培養(yǎng)條件下可產(chǎn)生粘液樣物質(zhì)，即細(xì)胞分化為粘液樣細(xì)胞，AB一PAS染色也證實(shí)了這一結(jié)論。經(jīng)Hoechst33342細(xì)胞核染色并作TUNEL檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)IFNY處理的NHBEs表現(xiàn)為細(xì)胞失去原有形態(tài)，胞體伸長(zhǎng)，胞質(zhì)濃縮，特別是細(xì)胞核固縮，并見(jiàn)核碎裂;TUNEL實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，提示細(xì)胞核DNA有斷裂(圖1.1，D“F)，對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)完整，核染色均勻，TUNEL實(shí)驗(yàn)陰性。


本文編號(hào)：3600037