目的:探討Rho/Rock通路在肺纖維化中的作用及外源性硫化氫抗肺纖維化的可能機制,為治療肺纖維化提供新的實驗依據(jù)。方法:使用10%DMEM培養(yǎng)液+1%青鏈霉素培養(yǎng)小鼠肺成纖維細(xì)胞（NIH3T3細(xì)胞）,放置37℃下5%CO₂培養(yǎng)箱中。等細(xì)胞融合至90%,加用0.25%胰酶消化予以傳代接種（細(xì)胞密度5×10⁴）并放置于培養(yǎng)瓶,待細(xì)胞融合至約70%后用于實驗。將NIH3T3細(xì)胞隨機分為A、B、C、D、E5組。各組按以下方法處理:A組（空白對照組）:無處理;B組（TGF-β1組）:加入TGF-β1（5μg/L）;C組（TGF-β1+NaHS組）:加入TGF-β1（5μg/L）及NaHS（40μmol/L）;D組（TGF-β1+Y-27632組）:加入TGF-β1（5μg/L）及Y-27632（10μmol/L）;E組（TGF-β1+NaHS+Y-27632組）:加入TGF-β1（5μg/L）、NaHS（40μmol/L）及Y-27632（10μmol/L）。NaHS及Y-27632均預(yù)先處理1h。使用MTT法檢測各組細(xì)胞增殖水平;WB檢測各組細(xì)胞纖... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組細(xì)胞形態(tài)（200x）

13圖3.2各組在12h、24h、48h細(xì)胞存活率注：A、B、C、D、E分別對應(yīng)為A、B、C、D、E組細(xì)胞存活率*：各組與B組比較，P<0.053.3各組蛋白表達量結(jié)果用western-blot法檢測各組細(xì)胞中蛋白表達情況，結(jié)果示：TGF-β1組α-SMA及CollagenI蛋白的表達高于空白組，而分別予以NaHS、Y-27632及NaHS+Y-27632干預(yù)后，SMA及CollagenI蛋白的表達均下調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。其中TGF-β1+Y-27632組α-SMA及CollagenI蛋白的表達高于TGF-β1+NaHS組及TGF-β1+NaHS+Y-27632組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。同時TGF-β1組中RhoA、Rock1、Rock2蛋白表達高于空白組，而分別予以NaHS、

15表3.6RhoA、Rock1、Rock2蛋白表達量分組RhoAt值P值rock1t值P值rock2t值P值C46.35±1.30*8.0940.00138.27±0.88*55.9720.00141.03±0.88*16.7550.001D37.55±1.377.03±0.4030.63±0.62注：*：各組與D組比較，P<0.05圖3.3各組細(xì)胞α-SMA、CollagenI蛋白、RhoA、rock1、rock2蛋白表達量注：A、B、C、D、E分別對應(yīng)為A、B、C、D、E組*：各組與B組比較，P<0.05α-SMACollagenIRhoARock1Rock2GAPDH

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Rho-ROCK信號通路在肺纖維化中的作用（英文）[J]. 俞文英,余陳歡,戴巍,孫潔胤.  Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences. 2016(01)



本文編號：3597619