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RNAi沉默NF-kB p65對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的影響

發(fā)布時(shí)間:2022-01-16 16:33
  研究背景和目的肺炎是呼吸系統(tǒng)常見疾病,重癥肺炎(severe community-acquired pneumonia,SCAP)因其療效差,病情發(fā)展迅猛,易引發(fā)全身炎癥反應(yīng)綜合征(systemicinflammatory response syndrome,SIRS)、多器官功能障礙綜合征(MultipleSystem Organ dysfunction,MODS)等嚴(yán)重并發(fā)癥甚至造成人員死亡,成為威脅人類健康的一大問題。引起SCAP的原因很多,發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,一般由嚴(yán)重的細(xì)菌或/和病毒感染所致。在感染或非感染因素作用下,肺內(nèi)的炎性細(xì)胞如中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等活化后產(chǎn)生內(nèi)源或外源性炎性物質(zhì)如細(xì)胞因子、凝血和纖溶物質(zhì)、血管活性肽、黏附因子、遲發(fā)性炎性物質(zhì)如高遷移率蛋白分子等引起炎癥反應(yīng),發(fā)揮機(jī)體的防御作用。既往認(rèn)為,重癥肺炎造成病情加重、多組織器官出現(xiàn)損傷及功能不全是病原體或毒素直接作用的結(jié)果。現(xiàn)階段看法不盡然,大量研究表明,初始炎癥信號(hào)經(jīng)過活化擴(kuò)大后,上述的內(nèi)、外源性炎癥介質(zhì)表達(dá)迅速上調(diào),失控性釋放,激發(fā)連鎖“瀑布效應(yīng)”(cascade effect,CE),使炎性/抗炎反應(yīng)... 

【文章來源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:68 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【圖文】:

RNAi沉默NF-kB p65對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的影響


一la正常Ana一l細(xì)胞(*200)

細(xì)胞,基因圖,吸光度比值,細(xì)胞轉(zhuǎn)染


第一章RNAi技術(shù)沉默小鼠巨噬細(xì)胞NF一 kBp65基因圖2一Za經(jīng) lmg/mlLpS刺激后Ana一1細(xì)胞(*200) F19.2一 ZaAna一 1eellstimulatedbylmg/mlLPS(*200)圖2一lb經(jīng) lmg/mlLPs刺激Ana一l細(xì)胞轉(zhuǎn)染6h后(熒光顯微鏡卜*200) F19.2一 1aAna一 1cellwhiehstimulatedb少 lmg/mlLpStransfeeted6h(under fluoreseentmicroseoPe*200)三.RT-PCR結(jié)果圖3各組細(xì)胞NF一 kBp65(RelA)m洲A水平的檢測(cè) Fig.3NF一 kBP65(RelA)mRNAexPressionineaehgrouP表 1ANA一1細(xì)胞不同處理時(shí)各組NF一 kBp65/GADPHmRNA吸光度比值比較(丁士5.,=6) Table1TheabsorbaneerateofNF一 kBP65/GADPHmRNAwithdifferentdeal eaehgrouP(丁士s.n=6)26

標(biāo)準(zhǔn)曲線,小鼠,標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)準(zhǔn)曲線


默NF一kBP65基因巨噬細(xì)胞刺激后TNF一a、IL一lp、IL一6、IL細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)量得出標(biāo)準(zhǔn)曲線,并能過曲線擬合系的方程。見表l一l、l一2、l一3、l一4與圖l一l、l一2、表1一1小鼠TNF一a標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)量OD值與濃度數(shù)值lel一1TheODvalueandCONCvalueofTNF一astandardPL)0.1350.2340.2650.3310.4721250.609015.62531.2562.5250值進(jìn)行曲線擬合,方程為廠一56.92一x,+747.996x孔11.s21x一15.7TNF一a標(biāo)準(zhǔn)曲線nU八UO八U八UOn曰n﹄nn11﹄llU9曰曰八︸O乃︶﹃bAqJ‘

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]針對(duì)SIRS的新型抗炎靶點(diǎn)及抗炎策略研究進(jìn)展——從炎癥介質(zhì)到核因子-κB[J]. 梁華平,王正國(guó),朱佩芳.  中國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué). 2001(11)



本文編號(hào):3593039

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