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大鼠原位肝移植術后急性肺損傷模型的建立以及綠茶多酚對肝移植術后急性肺損傷的保護作用研究

發(fā)布時間:2021-11-21 01:03
  目的建立原位肝移植手術急性肺損傷的動物模型,并初步探討肝移植所致成年大鼠急性肺損傷炎癥反應的相關機制;觀察綠茶多酚對大鼠原位肝移植術后急性肺損傷的影響。方法(1)建立成年大鼠原位肝移植術后急性肺損傷模型:健康雄性SD大鼠72只,隨機分為兩組:對照組(8只)和肝移植組(32對64只)。對照組進行麻醉和開腹手術,肝移植組進行肝移植手術,分別于手術完成后1h、4h、8h和12h處死大鼠。觀察各組大鼠動脈血氣變化,計算氧合指數(shù)(PaO2/FiO2),測定肺系數(shù)、肺濕/干值、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中白細胞(WBC)、中性粒細胞計數(shù)和總蛋白含量,HE染色觀察肺組織病理學改變,BALF和血清中TNF-α,IL-1β、IL-8含量,肺組織和血清中MDA、SOD水平以及肺組織MPO水平。免疫組化法檢測NF-κB蛋白的表達情況,以及WesternBlotting法檢測各組肺組織TNF-α和IL-1β的表達情況。(2)應用第一部分建立的肺損傷模型,選取健康雄性SD大鼠40只,隨機分為三組:對照組(8只)、肝移植組(8對)和綠茶多酚組(8對),對照組進行麻醉和... 

【文章來源】:中國人民解放軍醫(yī)學院北京市

【文章頁數(shù)】:93 頁

【學位級別】:博士

【部分圖文】:

大鼠原位肝移植術后急性肺損傷模型的建立以及綠茶多酚對肝移植術后急性肺損傷的保護作用研究


TNF一a檢測標準曲線

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圖15工L一lp檢測標準曲線F中IL一8含量的測定用放射免疫分析(班A)方法,放免試劑盒購自中國人民解放軍發(fā)中心放免研究所,嚴格按說明操作。本實驗采用平衡法,取編號,按表6步驟操作。表6IL一SRIA檢測加樣程序(閃)試劑NSB5051一55樣品緩沖液IL一8標準待測樣品125IL一8200100一一一一100一_一一100100100100100

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圖16IL一8檢測標準曲線P65免疫組化檢測肺中葉用10%甲醛固定,常規(guī)切片。采用SABC免疫組化法染完成后干燥、封片,普通光鏡下觀察。一忍P65免疫組化方法:S妞C法(具體步驟如下)1)切片:將小鼠肺組織石蠟塊連續(xù)切片,厚度為sum。2)切片脫蠟:二甲苯常規(guī)脫蠟2次,每次10min。脫蠟后切片,90%,80%,70%乙醇中各smin,PBS漂洗2次,每次smin。)每張切片滴加0.3%H20250川,室溫下孵育10min,以滅活酶,PBS漂洗3次,每次smin。4)熱修復抗原:

【參考文獻】:
期刊論文
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本文編號:3508446

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