目的建立原位肝移植手術(shù)急性肺損傷的動物模型,并初步探討肝移植所致成年大鼠急性肺損傷炎癥反應(yīng)的相關(guān)機制;觀察綠茶多酚對大鼠原位肝移植術(shù)后急性肺損傷的影響。方法（1）建立成年大鼠原位肝移植術(shù)后急性肺損傷模型:健康雄性SD大鼠72只,隨機分為兩組:對照組（8只）和肝移植組（32對64只）。對照組進行麻醉和開腹手術(shù),肝移植組進行肝移植手術(shù),分別于手術(shù)完成后1h、4h、8h和12h處死大鼠。觀察各組大鼠動脈血氣變化,計算氧合指數(shù)（PaO₂/FiO₂）,測定肺系數(shù)、肺濕/干值、支氣管肺泡灌洗液（BALF）中白細胞（WBC）、中性粒細胞計數(shù)和總蛋白含量,HE染色觀察肺組織病理學(xué)改變,BALF和血清中TNF-α,IL-1β、IL-8含量,肺組織和血清中MDA、SOD水平以及肺組織MPO水平。免疫組化法檢測NF-κB蛋白的表達情況,以及WesternBlotting法檢測各組肺組織TNF-α和IL-1β的表達情況。（2）應(yīng)用第一部分建立的肺損傷模型,選取健康雄性SD大鼠40只,隨機分為三組:對照組（8只）、肝移植組（8對）和綠茶多酚組（8對）,對照組進行麻醉和... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

TNF一a檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖15工L一lp檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線F中IL一8含量的測定用放射免疫分析(班A)方法，放免試劑盒購自中國人民解放軍發(fā)中心放免研究所，嚴(yán)格按說明操作。本實驗采用平衡法，取編號，按表6步驟操作。表6IL一SRIA檢測加樣程序(閃)試劑NSB5051一55樣品緩沖液IL一8標(biāo)準(zhǔn)待測樣品125IL一8200100一一一一100一_一一100100100100100

圖16IL一8檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線P65免疫組化檢測肺中葉用10%甲醛固定，常規(guī)切片。采用SABC免疫組化法染完成后干燥、封片，普通光鏡下觀察。一忍P65免疫組化方法:S妞C法(具體步驟如下)1)切片:將小鼠肺組織石蠟塊連續(xù)切片，厚度為sum。2)切片脫蠟:二甲苯常規(guī)脫蠟2次，每次10min。脫蠟后切片，90%，80%，70%乙醇中各smin，PBS漂洗2次，每次smin。)每張切片滴加0.3%H20250川，室溫下孵育10min，以滅活酶，PBS漂洗3次，每次smin。4)熱修復(fù)抗原:

【參考文獻】：
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本文編號：3508446