本文關(guān)鍵詞：柴樸湯對(duì)肝郁型哮喘miR-21、PTEN的表達(dá)及嗜酸性粒細(xì)胞凋亡的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的:通過研究柴樸湯對(duì)肝郁型哮喘大鼠mi R-21、PTEN表達(dá)及嗜酸性粒細(xì)胞凋亡的影響,從而探討柴樸湯防治肝郁型哮喘的機(jī)制與mi R-21、PTEN及嗜酸性粒細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系。研究方法:1)70只雄性SD大鼠隨機(jī)原則分為肝郁組(n=30)與非肝郁組(n=40),肝郁組大鼠于第1~28天進(jìn)行慢性不可預(yù)見性應(yīng)激刺激,非肝郁組不做任何處理。造模結(jié)束后檢測(cè)肝郁組與非肝郁組大鼠體重變化、糖水消耗量、血液腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)含量,評(píng)價(jià)肝郁型模型。造模成功后將肝郁組與非肝郁組每10只分為一組一共7組,非肝郁組分為對(duì)照組、正常中藥組、哮喘組、哮喘治療組,肝郁組分為肝郁哮喘組、肝郁哮喘治療組、地塞米松組。哮喘組、哮喘治療組、肝郁哮喘組、肝郁哮喘治療組、地塞米松組5組采用用卵蛋白(OVA)誘導(dǎo)復(fù)制哮喘模型。自霧化致敏大鼠造模開始,每次霧化吸入致敏劑前30 min,各組大鼠均予以胃內(nèi)注藥處理。正常中藥組、哮喘治療組、柴樸湯組予以柴樸湯顆粒(每克顆粒含生藥18.5g)350 mg/kg灌胃;地塞米松組大鼠予以地塞米松1 mg/kg灌胃;正常對(duì)照組、哮喘模型組、肝郁哮喘組3組大鼠予以等量生理鹽水處理。干預(yù)結(jié)束后,根據(jù)各組大鼠的癥狀及體征進(jìn)行評(píng)分;肺功能測(cè)定,小動(dòng)物呼吸機(jī)測(cè)定各組大鼠在不同濃度乙酰膽堿激發(fā)下測(cè)定的氣道阻力;蘇木素-伊紅染色觀察各組大鼠氣道及肺組織病理改變;涂片法測(cè)定各組大鼠支氣管肺泡灌洗液中白細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù),嗜酸性粒細(xì)胞比例;用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)測(cè)定支氣管灌洗液EOS凋亡率;熒光實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)血液及肺組織mi R-21水平表達(dá);蛋白質(zhì)免疫印跡(Western-blot)和RT-PCR檢測(cè)肺組織表達(dá)PTEN及PTEN m RNA水平。結(jié)果:1、肝郁模型的鑒定:1)體重比較:肝郁組體重286.69±7.36(g)造模結(jié)束后較對(duì)照組233.46±8.52(g)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2)肝郁組糖水消耗量8.41±0.79(ml)造模結(jié)束后較對(duì)照組19.42±0.86(ml)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3)正常對(duì)照組血漿ACTH含量709±263(ng/L)造模結(jié)束后較肝郁組1768±256(ng/L)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);2、各組大鼠癥狀評(píng)分及肺功能結(jié)果:哮喘組和肝郁哮喘組大鼠支氣管癥狀評(píng)分及肺功能測(cè)定氣道阻力高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);肝郁哮喘高于哮喘組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘治療組低于哮喘組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);肝郁哮喘治療組、地塞米松組均低于肝郁哮喘組,,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘治療組、肝哮治療組及地塞米松組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞分類計(jì)數(shù)白細(xì)胞細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞總數(shù)、及嗜酸性粒細(xì)胞百分比哮喘組與肝郁哮喘組均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中肝郁哮喘組高于哮喘組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘治療組低于哮喘組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);肝郁哮喘治療組、地塞米松組均低于肝郁哮喘組,,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘治療組、肝哮治療組及地塞米松組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。支氣管肺組織HE染色可見:正常對(duì)照組、正常中藥組支氣管肺組織結(jié)構(gòu)正常完整,未見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),支氣管壁厚度正常;哮喘組:大量粘液栓,鏡下黏膜上皮局部脫落,基底層膜增厚及玻璃樣變,粘膜下水腫,粘液腺增生。杯狀細(xì)胞增多,平滑肌增生肥大,可見平滑肌破壞斷裂,在管壁及粘液栓中可見嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)。相對(duì)于哮喘組肝郁哮喘炎癥反應(yīng)及氣道重塑更為嚴(yán)重;余各組支氣管肺組織病理改變明顯輕于哮喘模型組及肝郁哮喘組。3、各組大鼠肺泡灌洗液嗜酸性粒細(xì)胞凋亡率哮喘組(4.20±0.41)及肝郁哮喘組(4.29±0.28)嗜酸性粒細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組(5.82±0.48)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘組(4.20±0.41)與肝郁哮喘組(4.29±0.28)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。哮喘治療組(15.74±0.34)嗜酸性粒細(xì)胞凋亡率高于哮喘組(4.20±0.41),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),肝哮治療組(15.77±0.42)及地塞米松組(15.43±0.55)嗜酸性性粒細(xì)胞凋亡率明顯高于肝哮治療組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),哮喘治療組、肝哮治療組及地塞米松組之間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。4、各組大鼠血液及肺組織中mi R-21的相對(duì)表達(dá)量哮喘組、肝郁型哮喘組血液和肺組織mi R-21的相對(duì)表達(dá)量明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);肝郁哮喘組血液和肺組織mi R-21相對(duì)表達(dá)量高于哮喘組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘治療組血液和肺組織mi R-21相對(duì)表達(dá)量低于哮喘組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);肝哮治療組及地塞米松組均低于肝郁哮喘組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘治療組、肝哮治療組、地塞米松組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5、各組大鼠肺組織PTENm RNA、PTEN蛋白的相對(duì)表達(dá)量哮喘組及肝郁哮喘組肺組織PTENm RNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘組表達(dá)高于肝郁型哮喘組,哮喘治療組表達(dá)高于哮喘組(P0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;肝哮治療組及地塞米松高于肝郁哮喘組(P0.05),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;哮喘治療組、肝哮治療組、地塞米松組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、肝郁型哮喘大鼠血液mi R-21表達(dá)增加,且與哮喘的癥狀、炎癥反應(yīng)程度呈正相關(guān),mi R-21可能作為哮喘控制水平的一個(gè)重要指標(biāo);2、柴樸湯在治療肝郁型哮喘過程中可以通過抑制mi R-21的表達(dá)、上調(diào)的PTEN表達(dá),從而促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞的凋亡,可能通過抑制mi R-21-PTEN通路導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：支氣管哮喘 PTEN mi R-21 嗜酸性粒細(xì)胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R562.25
【目錄】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-14
• 主要縮略詞14-16
• 第一章 前言16-20
• 第二章 材料與方法20-32
• 第三章 結(jié)果32-40
• 第四章 討論40-44
• 第五章 結(jié)論44-46
• 參考文獻(xiàn)46-52
• 附圖52-62
• 綜述62-72
• 參考文獻(xiàn)67-72
• 碩士期間撰寫論文72-74
• 致謝74

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本文編號(hào)：347352