本文關(guān)鍵詞：人脂肪干細胞對急性肺損傷大鼠肺內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：急性肺損傷是由肺外致病危險因子發(fā)動或介導的以肺血管通透性增加為主要病理生理學改變的疾病，常作為急診及各種危重癥病情惡化的表征或并發(fā)癥，其發(fā)病機制復雜，進展迅速，死亡率高。雖然經(jīng)過多年的基礎(chǔ)研究和臨床探索，目前對于急性肺損傷治療的問題，未能完全有效解決。近些年來，隨著多潛能分化干細胞逐漸被熟知，，利用干細胞對多種疾病進行治療在臨床實踐中取得重大突破，也為治療急性肺損傷提供了一種潛在的、具有可操作性的治療新思路。現(xiàn)有研究已經(jīng)證實，干細胞對急性肺損傷有良好的治療效果。但在干細胞治療急性肺損傷過程中，干細胞對肺血管修復方面的研究尚未有詳細的報道。本實驗目的是研究人脂肪干細胞對脂多糖作用后的離體大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響；以及人脂肪干細胞通過尾靜脈移植到急性肺損傷大鼠的體內(nèi)，對在體肺組織中的內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白的影響。 方法：本實驗采用0.1%I型膠原酶消化人脂肪組織，獲取人脂肪干細胞，通過流式細胞儀對人脂肪干細胞表面抗原CD90、CD106、CD34進行鑒定；通過大鼠外周肺組織塊獲取大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞，用免疫熒光方法對大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞表面Flt-1、vWF抗原進行鑒定。離體實驗，脂多糖5μg/ml作用于大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞4小時后，對照組采取更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)72小時；實驗組采取更換正常培養(yǎng)基，并通過0.4μm的Transwell與人脂肪干細胞進行共培養(yǎng)72小時，免疫熒光檢測大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞內(nèi)皮型一氧化氮合酶的表達變化。在體實驗，除空白組腹腔注射生理鹽水外，其他組均采用腹腔注射脂多糖（6mg/kg）復制大鼠急性肺損傷模型。半小時后，空白組、急性肺損傷組，尾靜脈注射生理鹽水；治療組，尾靜脈移植5×105個人脂肪干細胞到大鼠急性肺損傷的體內(nèi)。7天后，檢測大鼠肺濕/干重比，Western Blot檢測肺組織中的內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白的表達變化。 結(jié)果：1.人脂肪干細胞表面抗原CD90高度表達，90.6%；CD106少量表達，7.5%；CD34幾乎不表達，1.8%。 2.大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞表面Flt-1、vWF抗原鑒定檢測呈陽性。 3.離體實驗：72小時后，對照組與實驗組進行比較，實驗組的大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達明顯增加。 4.在體實驗：7天后，治療組肺濕/干重比與急性肺損傷組比較顯著降低（P＜0.05）。治療組肺組織中的內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白表達與急性肺損傷組比較顯著增加（P＜0.05）。 結(jié)論：人脂肪干細胞可以促進脂多糖作用后的大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達增加。人脂肪干細胞可以顯著降低急性肺損傷大鼠肺濕/干重比；人脂肪干細胞可以促進急性肺損傷大鼠肺組織的內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達顯著增加。
【關(guān)鍵詞】：脂肪干細胞 急性肺損傷 內(nèi)皮型一氧化氮合酶
【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R563
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-19
• 結(jié)果19-23
• 討論23-26
• 結(jié)論26-27
• 參考文獻27-30
• 文獻綜述30-39
• 參考文獻36-39
• 致謝39-40

【參考文獻】

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  本文關(guān)鍵詞：人脂肪干細胞對急性肺損傷大鼠肺內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：306872