人脂肪干細(xì)胞對(duì)急性肺損傷大鼠肺內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-04-14 21:14
本文關(guān)鍵詞:人脂肪干細(xì)胞對(duì)急性肺損傷大鼠肺內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:急性肺損傷是由肺外致病危險(xiǎn)因子發(fā)動(dòng)或介導(dǎo)的以肺血管通透性增加為主要病理生理學(xué)改變的疾病,常作為急診及各種危重癥病情惡化的表征或并發(fā)癥,其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,進(jìn)展迅速,死亡率高。雖然經(jīng)過多年的基礎(chǔ)研究和臨床探索,目前對(duì)于急性肺損傷治療的問題,未能完全有效解決。近些年來,隨著多潛能分化干細(xì)胞逐漸被熟知,,利用干細(xì)胞對(duì)多種疾病進(jìn)行治療在臨床實(shí)踐中取得重大突破,也為治療急性肺損傷提供了一種潛在的、具有可操作性的治療新思路,F(xiàn)有研究已經(jīng)證實(shí),干細(xì)胞對(duì)急性肺損傷有良好的治療效果。但在干細(xì)胞治療急性肺損傷過程中,干細(xì)胞對(duì)肺血管修復(fù)方面的研究尚未有詳細(xì)的報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯咳酥靖杉?xì)胞對(duì)脂多糖作用后的離體大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響;以及人脂肪干細(xì)胞通過尾靜脈移植到急性肺損傷大鼠的體內(nèi),對(duì)在體肺組織中的內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白的影響。 方法:本實(shí)驗(yàn)采用0.1%I型膠原酶消化人脂肪組織,獲取人脂肪干細(xì)胞,通過流式細(xì)胞儀對(duì)人脂肪干細(xì)胞表面抗原CD90、CD106、CD34進(jìn)行鑒定;通過大鼠外周肺組織塊獲取大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞,用免疫熒光方法對(duì)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面Flt-1、vWF抗原進(jìn)行鑒定。離體實(shí)驗(yàn),脂多糖5μg/ml作用于大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞4小時(shí)后,對(duì)照組采取更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)72小時(shí);實(shí)驗(yàn)組采取更換正常培養(yǎng)基,并通過0.4μm的Transwell與人脂肪干細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)72小時(shí),免疫熒光檢測(cè)大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮型一氧化氮合酶的表達(dá)變化。在體實(shí)驗(yàn),除空白組腹腔注射生理鹽水外,其他組均采用腹腔注射脂多糖(6mg/kg)復(fù)制大鼠急性肺損傷模型。半小時(shí)后,空白組、急性肺損傷組,尾靜脈注射生理鹽水;治療組,尾靜脈移植5×105個(gè)人脂肪干細(xì)胞到大鼠急性肺損傷的體內(nèi)。7天后,檢測(cè)大鼠肺濕/干重比,Western Blot檢測(cè)肺組織中的內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白的表達(dá)變化。 結(jié)果:1.人脂肪干細(xì)胞表面抗原CD90高度表達(dá),90.6%;CD106少量表達(dá),7.5%;CD34幾乎不表達(dá),1.8%。 2.大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面Flt-1、vWF抗原鑒定檢測(cè)呈陽性。 3.離體實(shí)驗(yàn):72小時(shí)后,對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行比較,實(shí)驗(yàn)組的大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達(dá)明顯增加。 4.在體實(shí)驗(yàn):7天后,治療組肺濕/干重比與急性肺損傷組比較顯著降低(P<0.05)。治療組肺組織中的內(nèi)皮型一氧化氮合酶蛋白表達(dá)與急性肺損傷組比較顯著增加(P<0.05)。 結(jié)論:人脂肪干細(xì)胞可以促進(jìn)脂多糖作用后的大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達(dá)增加。人脂肪干細(xì)胞可以顯著降低急性肺損傷大鼠肺濕/干重比;人脂肪干細(xì)胞可以促進(jìn)急性肺損傷大鼠肺組織的內(nèi)皮型一氧化氮合酶表達(dá)顯著增加。
【關(guān)鍵詞】:脂肪干細(xì)胞 急性肺損傷 內(nèi)皮型一氧化氮合酶
【學(xué)位授予單位】:大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R563
【目錄】:
- 摘要6-8
- Abstract8-10
- 前言10-11
- 材料與方法11-19
- 結(jié)果19-23
- 討論23-26
- 結(jié)論26-27
- 參考文獻(xiàn)27-30
- 文獻(xiàn)綜述30-39
- 參考文獻(xiàn)36-39
- 致謝39-40
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:人脂肪干細(xì)胞對(duì)急性肺損傷大鼠肺內(nèi)皮型一氧化氮合酶的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):306872
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