本文關鍵詞：苦參堿通過調控Nrf2對人胚肺成纖維細胞γ-GCS表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：氧化/抗氧化失衡在肺纖維化發(fā)病機制中發(fā)揮著重要的作用。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS）是谷胱甘肽（glutathione,GSH）合成反應的限速酶，認為是非常重要的抗氧化酶；體外細胞學培養(yǎng)研究認為紅系衍生核因子相關因子-2（NF-E2related factor2,Nrf2）可以調控抗氧化酶的表達。本實驗室前期動物實驗研究表明苦參堿具有抗炎、抗纖維化作用，但其調控Nrf2表達的具體機制不明。 目的：本研究探討苦參堿通過調控Nrf2對人胚肺成纖維細胞γ-GCS表達的影響，為尋找有效的抗肺纖維化藥物提供臨床治療的實驗基礎。 方法：體外培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞MRC-5至指數(shù)生長期，分為空白對照組、苦參堿組、苦參堿+SiRNA干預組�？瞻讓φ战M為A組：細胞使用MEM/NEAA培養(yǎng)基加10％FBS(Hyclone)培養(yǎng)；苦參堿組：正常培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞加入苦參堿；苦參堿+SiRNA干預組：正常培養(yǎng)的人胚肺成纖維細胞加入苦參堿并加入SiRNA沉默Nrf2mRNA。根據(jù)苦參堿濃度進行亞分組：苦參堿組中0.25mmol/LMat為B組、0.5mmol/LMat為C組、1.0mmol/LMat為D組；苦參堿+SiRNA干預組中0.25mmol/L Mat為E組、0.5mmol/LMat為F組、1.0mmol/LMat為G組。以上各組細胞，經苦參堿處理1、2、4、8小時后，細胞Nrf2、γ-GCSmRNA表達水平使用RT-PCR檢測，，細胞Nrf2、γ-GCS蛋白表達水平使用Western blot檢測。 結果： （1）人胚肺成纖維細胞中γ-GCSmRNA、Nrf2mRNA表達：A組低于B、C、D組（P＜0.05）；表達隨Mat濃度增大呈上升趨勢，以4h較高，第8h較低，但仍高于空白組（P＜0.05）。 （2）人胚肺成纖維細胞中γ-GCS蛋白、Nrf2蛋白表達：A組低于B、C、D組（P＜0.05）；表達隨Mat濃度增大呈上升趨勢，以4h較高，第8h較低，但仍高于A組（P＜0.05）；人胚肺成纖維細胞中γ-GCS蛋白質及mRNA表達，E、F、G組分別低于B、C、D組（P＜0.05）；且均低于A組（P＜0.05）。 （3）人胚肺成纖維細胞中γ-GCS的表達與Nrf2mRNA、蛋白表達呈正相關。 結論： 苦參堿可通過調控Nrf2的表達上調人胚肺成纖維細胞內源性抗氧化酶γ-GCS的表達。
【關鍵詞】：肺纖維化 紅系衍生核因子相關因子-2 谷氨酰半胱氨酸合成
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R563
【目錄】：

• 主要英文縮略語索引4-5
• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-18
• 結果18-28
• 討論28-31
• 結論31-32
• 參考文獻32-36
• 綜述36-41
• 參考文獻39-41
• 碩士期間撰寫論文41-42
• 致謝42

【參考文獻】

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  本文關鍵詞：苦參堿通過調控Nrf2對人胚肺成纖維細胞γ-GCS表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：298297