發(fā)布時間：2017-04-11 01:21

  本文關(guān)鍵詞：miR-34a對CSE誘導(dǎo)的人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：探討CSE干預(yù)對HPMEC凋亡及miR-34a表達(dá)的影響；并進(jìn)一步研究miR-34a對CSE誘導(dǎo)的HPMEC凋亡的影響。 方法：體外培養(yǎng)HPMEC,給予不同濃度(0%、0.5%、1%、2.5%、5%)及不同時間(Oh、6h、12h、24h)的CSE干預(yù),采用Annexin-V FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,Real-time PCR檢測miR-34a-5p與miR-34a-3p的表達(dá),并分析HPMEC早期凋亡率和miR-34a-5p與miR-34a-3p表達(dá)之間的相關(guān)性。進(jìn)一步將HPMEC分為四組,各組細(xì)胞處理如下：對照組(CSE組)不予處理；miR-34a inhibitor陰性對照轉(zhuǎn)染組(N+CSE組)轉(zhuǎn)染miR-34a inhibitor的陰性對照；miR-34a-3p inhibitor轉(zhuǎn)染組(3p+CSE組)轉(zhuǎn)染miR-34a-3p inhibitor; miR-34a-5p inhibitor轉(zhuǎn)染組(5p+CSE組)轉(zhuǎn)染miR-34a-5p inhibitor。各組細(xì)胞予以相應(yīng)處理后再均以1%CSE干預(yù)12h,然后檢測各組細(xì)胞的凋亡率及miR-34a的表達(dá)水平。各組計量資料以(M±SD)表示,采用SPSS18.0對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,P0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 1.CSE誘導(dǎo)的HPMEC凋亡呈濃度依賴性,隨著CSE干預(yù)濃度從0%增加到1%,HPMEC的早期凋亡率逐漸增加(P0.05),1%CSE濃度組的HPMEC早期凋亡率為(36.23±4.20)%；1%、2.5%CSE組的HPMEC早期凋亡率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);5%CSE組HPMEC早期凋亡率較2.5%CSE組下降(P0.05)。1%CSE誘導(dǎo)的HPMEC凋亡呈時間依賴性,隨著1%CSE干預(yù)時間從Oh延長到12h,HPMEC早期凋亡率逐漸增加(P0.05);1%CSE干預(yù)24h組HPMEC的早期凋亡率較12h組稍下降,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 2.隨著CSE干預(yù)濃度從0%增加到2.5%,miR-34a-5p、 miR-34a-3p的相對表達(dá)量增加(P0.05);2.5%CSE濃度組miR-34a-5p、miR-34a-3p的相對表達(dá)量分別為(16.05±0.389)×10-3、(0.75±0.034)×10-3;5%CSE組miR-34a-5p、miR-34a-3p的相對表達(dá)量較2.5%CSE組下降(P0.05)；隨著1%CSE干預(yù)時間從0h延長到12h,miR-34a-5p、miR-34a-3p的相對表達(dá)量增加(P0.05)；1%CSE干預(yù)24h組miR-34a-5p、miR-34a-3p的相對表達(dá)量較12h稍下降,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3. HPMEC早期凋亡率與miR-34a表達(dá)的相關(guān)性分析結(jié)果顯示HPMEC中miR-34a-5p的相對表達(dá)量與其早期凋亡率呈正相關(guān)(r=0.97,P0.001), miR-34a-3p的相對表達(dá)量與其早期凋亡率呈正相關(guān)(r=0.92,P0.01)。 4.5p+CSE組和3p+CSE組HPMEC早期凋亡率分別為(34.08±1.29)%、(33.58±0.93)%,較N+CSE組HPMEC早期凋亡率(44.52±1.39)%明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論： 1.CSE誘導(dǎo)HPMEC早期凋亡率和miR-34a的表達(dá)增加,且具有CSE干預(yù)的濃度和時間依賴性。 2.CSE誘導(dǎo)的HPMEC早期凋亡率和miR-34a的表達(dá)呈正相關(guān)。 3.miR-34a抑制物能減少CSE所致的HPMEC早期凋亡率,miR-34a在CSE所致HPMEC凋亡中可能具有重要作用。
【關(guān)鍵詞】：人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞 凋亡 miR-34a 香煙提取物
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R563.9
【目錄】：

• 摘要5-8
• Abstract8-12
• ~.略詞表12-13
• 第一章 前言13-16
• 第二章 材料與方法16-26
• 2.1 細(xì)胞株16
• 2.2 主要設(shè)備和試劑16-18
• 2.3 主要溶液配制18-19
• 2.4 實驗方法19-25
• 2.5 統(tǒng)計分析25-26
• 第三章 結(jié)果26-38
• 3.1 HPMEC細(xì)胞的形態(tài)26
• 3.2 CSE干預(yù)對HPMEC凋亡的影響26-30
• 3.3 CSE干預(yù)對HPMEC中miR-34a表達(dá)的影響30-33
• 3.4 HPMEC凋亡率與miR-34a表達(dá)的相關(guān)性分析33
• 3.5 miR-34a抑制實驗33-38
• 第四章 討論38-44
• 4.1 選擇HPMEC及CSE干預(yù)進(jìn)行細(xì)胞實驗的原因38-39
• 4.2 CSE干預(yù)后HPMEC的早期凋亡率的變化情況39
• 4.3 CSE干預(yù)HPMEC后miR-34a的表達(dá)情況39-41
• 4.4 miR-34a與HPMEC早期凋亡率的相關(guān)性41
• 4.5 miRNA inhibitor干預(yù)miRNA功能的原理及應(yīng)用41-44
• 第五章 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 綜述51-62
• 參考文獻(xiàn)57-62
• 攻讀學(xué)位期間主要研究成果62-63
• 致謝63

【共引文獻(xiàn)】

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3 楊q，

本文編號：298000