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COPD模型大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡及Bcl-2、Bax表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-08 23:18

  本文關(guān)鍵詞:COPD模型大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡及Bcl-2、Bax表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】: 目的:觀察細(xì)胞凋亡對(duì)COPD模型大鼠骨骼肌萎縮影響及相關(guān)基因Bcl-2、Bax的表達(dá)。 方法:100只健康Wistar大鼠隨機(jī)分為模型組80只,對(duì)照組20只。模型組采用1-29天,31-60天熏香煙,第30天氣管內(nèi)注入豬胰蛋白酶(PEE)的方法建立COPD大鼠模型。對(duì)照組不熏香煙,在模型組氣管內(nèi)注入PEE的同一天采用同一術(shù)式氣管內(nèi)注入等量生理鹽水。繼續(xù)飼養(yǎng)至第90天,以低于對(duì)照組大鼠平均體重的90%作為判斷發(fā)生營養(yǎng)不良的標(biāo)準(zhǔn),將實(shí)驗(yàn)大鼠分為:對(duì)照組、COPD營養(yǎng)正常組和COPD營養(yǎng)不良組。取大鼠膈肌、趾長伸肌制備石蠟切片,分別采用TUNEL法測定膈肌、趾長伸肌石蠟切片細(xì)胞凋亡率和免疫組織化學(xué)法測定Bcl-2、Bax表達(dá),Image-Pro Plus version 6.0圖像系統(tǒng)測定免疫組化表達(dá)強(qiáng)度,所得數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 13.0軟件進(jìn)行單因素方差分析、t檢驗(yàn)及相關(guān)性分析。 結(jié)果:1.COPD模型大鼠營養(yǎng)不良組膈肌、趾長伸肌的凋亡率均顯著高于對(duì)照組(P<0.01,P<0.01)、COPD模型大鼠營養(yǎng)正常組(P<0.01,P<0.01)。三組大鼠膈肌凋亡率與趾長伸肌比較均無差異(P>0.5)。2.對(duì)照組膈肌、趾長伸肌Bcl-2的表達(dá)均強(qiáng)于COPD模型大鼠營養(yǎng)正常組(P<0.01,P<0.01)、COPD模型大鼠營養(yǎng)不良組(P<0.01,P<0.01);COPD模型大鼠營養(yǎng)不良組膈肌、趾長伸肌的Bax表達(dá)均強(qiáng)于COPD模型大鼠營養(yǎng)正常組(P<0.01,P<0.01)、對(duì)照組(P<0.01,P<0.01)。三組大鼠膈肌Bcl-2、Bax與趾長伸肌比較均無差異(P>0.5)。 結(jié)論:COPD模型大鼠存在明顯骨骼肌凋率增加,細(xì)胞凋亡可能是COPD模型大鼠骨骼肌萎縮的重要機(jī)制。Bcl-2、Bax參與調(diào)節(jié)COPD模型大鼠骨骼肌凋亡。
【關(guān)鍵詞】:慢性阻塞性肺疾病 骨骼肌肌萎縮 細(xì)胞凋亡 Bcl-2 Bax
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2008
【分類號(hào)】:R563.9
【目錄】:
  • 摘要4-5
  • ABSTRACT5-11
  • 前言11-13
  • 第一章 材料與方法13-19
  • 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組13
  • 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
  • 1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組13
  • 1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)13
  • 1.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)13
  • 1.2 主要試劑13-14
  • 1.3 主要儀器14
  • 1.4 主要實(shí)驗(yàn)用溶液的配制14
  • 1.4.1 豬胰彈性蛋白酶生理鹽水溶液14
  • 1.4.2 4%多聚甲醛14
  • 1.4.3 0.01M檸檬酸鹽緩沖液14
  • 1.5 大鼠COPD模型建立14-15
  • 1.5.1 氣管內(nèi)注入豬胰彈性蛋白酶14-15
  • 1.5.2 被動(dòng)吸煙方法15
  • 1.6 COPD模型組大鼠營養(yǎng)不良的判斷15
  • 1.7 模型組成模后分組15
  • 1.8 處死動(dòng)物的時(shí)間、方式、肺功能的測定及標(biāo)本的處理15-16
  • 1.8.1 處死動(dòng)物的時(shí)間15
  • 1.8.2 肺功能的測定15-16
  • 1.8.3 處死動(dòng)物的方式16
  • 1.8.4 肌肉組織的處理16
  • 1.8.5 肺組織的處理16
  • 1.8.6 骨骼肌、肺組織石蠟切片的制作16
  • 1.9 肺組織病理學(xué)檢查16-17
  • 1.10 骨骼肌組織病理學(xué)檢測17
  • 1.11 骨骼肌細(xì)胞凋亡率測定17
  • 1.11.1 方法17
  • 1.11.2 結(jié)果觀察和分析17
  • 1.12 Bcl-2蛋白表達(dá)檢測17-18
  • 1.13 Bax蛋白表達(dá)檢測18
  • 1.14 Bcl-2、Bax觀察和分析18
  • 1.15 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析18-19
  • 第二章 結(jié)果19-37
  • 2.1 模型評(píng)價(jià)19-21
  • 2.1.1.大鼠一般情況19
  • 2.1.2 大鼠肺組織、氣道病理改變(見本章附圖1)19
  • 2.1.3.肺功能19
  • 2.1.4 大鼠體重變化19-21
  • 2.2 趾長伸肌骨骼肌重量變化21-22
  • 2.3 骨骼肌病理變化(見本章附圖2)22
  • 2.4 骨骼肌凋亡率測定22-25
  • 2.4.1 實(shí)驗(yàn)大鼠膈肌、趾長伸肌凋亡率(見本章附圖3)22-23
  • 2.4.2 趾長伸肌凋亡率與體重相關(guān)性分析23
  • 2.4.3 趾長伸肌凋亡率與骨骼肌重量的相關(guān)性分析23-25
  • 2.5 Bcl-2、Bax表達(dá)25-30
  • 2.5.1 Bcl-2表達(dá):(免疫組化圖片見本章附圖4)25-26
  • 2.5.2 Bax的表達(dá):(免疫組化圖片見本章附圖5)26-27
  • 2.5.3 趾長伸肌凋亡率與Bcl-2、Bax相關(guān)性27-30
  • 附圖30-37
  • 附圖130-31
  • 附圖231-32
  • 附圖332-33
  • 附圖433-35
  • 附圖535-37
  • 第三章 討論37-43
  • 3.1 COPD模型制備及本實(shí)驗(yàn)建立COPD大鼠模型的評(píng)價(jià)37-38
  • 3.2 骨骼肌萎縮在COPD營養(yǎng)不良判定中的作用38-39
  • 3.3 細(xì)胞凋亡在COPD模型大鼠骨骼肌萎縮中的作用39-40
  • 3.4 Bcl-2家族蛋白對(duì)COPO骨骼肌細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)作用40-43
  • 第四章 結(jié)論43-44
  • 參考文獻(xiàn)44-49
  • 附錄 綜述49-64
  • 致謝64

【引證文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李風(fēng)森;高振;荊晶;徐丹;楊劍;哈木拉提·吾甫爾;;慢性阻塞性肺疾病西北寒燥證模型全身炎癥反應(yīng)狀態(tài)研究[J];科技導(dǎo)報(bào);2011年18期


  本文關(guān)鍵詞:COPD模型大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡及Bcl-2、Bax表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):293919

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